氨基酸的离子交换柱色谱分离

一、原理有些高分子物质含有一些可以解离的基团,例如-SO3H,-COOH等,因此可以和溶液中的离子产生交换反应如:R-SO3H+M→R-SO3M+H+或 R-NH3OH+Cl-→R-NH3Cl+OH-这类同分子物质通称离子交换剂,其中使用最普遍的是离子交换树脂。由于一定的离子交换剂对不同离子的静电引力不同,因此在洗脱过程中,不同的离子在离子交换柱上的迁移速度也不同,最后完全分离。本实验采用磺酸型阳离子交换树脂(732型)分离酸性氨基酸(天冬氨酸Asp pI=2.97)和硷性氨基酸(赖氨酸Lys pI=9.74)的混合液。在pH5.3条件下,因为低于Lys的pI值,Lys可解离成阳离子挂在树脂上;高于Asp的pI值,则Asp可解离为阴粒子,不能被树脂吸附而直接流出色谱柱。在pH 12条件下,因高于Lys的pI值,Lys又解离为阴离子从树脂上被交换下来,这样通过改变洗脱液的pH值可使它们被分别洗脱而达到分离的目的。二、操作1......阅读全文

氨基酸离子交换柱色谱分离实验

实验概要本实验介绍了氨基酸的离子交换柱色谱分离的原理和操作步骤等。实验原理本实验采用磺酸型阳子交换树脂(732型)分离酸性氨基酸(天冬氨酸Asp  pI=2.97)和硷性氨基酸(赖氨酸Lys  pI=9.74)的混合液。在pH5.3条件下,因为低于Lys的pI值,Lys可解离成阳离子挂在树脂上;高于

氨基酸的离子交换柱色谱分离

一、原理有些高分子物质含有一些可以解离的基团,例如-SO3H,-COOH等,因此可以和溶液中的离子产生交换反应如:R-SO3H+M→R-SO3M+H+或 R-NH3OH+Cl-→R-NH3Cl+OH-这类同分子物质通称离子交换剂,其中使用最普遍的是离子交换树脂。由于一定的离子交换剂对不同离子的静电引

氨基酸的离子交换柱色谱分离原理和操作

【原 理】本实验采用磺酸型阳子交换树脂(732型)分离酸性氨基酸(天冬氨酸Asp pI=2.97)和硷性氨基酸(赖氨酸Lys pI=9.74)的混合液。在pH5.3条件下,因为低于Lys的pI值,Lys可解离成阳离子挂在树脂上;高于Asp的pI值,则Asp可解离为阴离子,不能被树脂吸附而直接流出

离子交换色谱柱如何分离如何再生

离子交换色谱柱是指离子交换色谱中的固定相中的一些带电荷的基团,这些带电基团通过静电相互作用与带相反电荷的离子结合。如果流动相中存在其他带相反电荷的离子,按照质量作用定律,这些离子将与结合在固定相上的反离子进行交换。离子交换色谱柱基本原理:  离子交换色谱是蛋白纯化技术中常用的一种纯化方法,其原理是指

离子交换层析法分离氨基酸

实验概要本实验介绍了离子交换柱层析法的基本操作技术,采用离子交换树脂分离了氨基酸。实验原理离子交换层析法主要是根据物质的解离性质的差异而选用不同的离子交换剂进行分离的方法。各种氨基酸分子的结构不同,在同一pH时与离子交换树脂的亲和力有差异,因此可依据亲和力从小到大的顺序被洗脱液洗脱下来,达到分离的效

柱色谱分离

所用色谱管为内径均匀、下端缩口的硬质玻璃管,下端用棉花或玻璃纤维塞住,管内装有吸附剂。色谱柱的大小,吸附剂的品种和用量,以及洗脱时的流速,均按各单体中的规定。吸附剂的颗粒应尽可能保持大小均匀,以保证良好的分离效果,除另有规定外通常多采用直径为0.07-0.15mm的颗粒。吸附剂的活性或吸附力对分离效

离子交换色谱柱原理

 离子交换色谱柱是指离子交换色谱中的固定相中的一些带电荷的基团,这些带电基团通过静电相互作用与带相反电荷的离子结合。   如果流动相中存在其他带相反电荷的离子,按照质量作用定律,这些离子将与结合在固定相上的反离子进行交换。   离子交换色谱柱基本原理:   离子交换色谱是蛋白纯化技术中常用的一种纯化

色谱柱分离经验

色谱柱可以分为:加压、常压、减压色谱柱。压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候,常压柱是效率最高的,但是时间也最长,比如天然化合物的分离,一个柱子几个月也是有的。减压柱能够减少硅胶的使用量,感觉能够节省一半甚至更多,但是由于大量的空气通过硅胶

色谱柱分离经验

柱子可以分为:加压,常压,减压。压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候,常压柱是效率最高的,但是时间也最长,比如天然化合物的分离,一个柱子几个月也是有的。减压柱能够减少硅胶的使用量,感觉能够节省一半甚至更多,但是由于大量的空气通过硅胶会使溶剂

色谱柱分离原理

原理很简单,就是相似相溶的原理,相溶的停留时间长,极性不相溶的仪时间短。

色谱柱分离经验

色谱柱子可以分为:加压,常压,减压。    压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候,常压柱是效率最高的,但是时间也最长,比如天然化合物的分离,一个柱子几个月也是有的。    减压柱能够减少硅胶的使用量,感觉能够节省一半甚至更多,但是由于大量的

凝胶层析柱,离子交换柱,色谱吸附柱

 凝胶柱层层析又称凝胶过滤,是一种按分子量大小分离物质的层析方法。该方法是把样品加到充满着凝胶颗粒的层析柱中,然后用缓冲液洗脱。大分子不能进入凝胶颗粒中的静止相中,只留在凝胶颗粒之间的流动相中,因此以较快的速度首先流出层析柱,而小分子则能自由出入凝胶颗粒中,并很快在流动相和静止相之间形成动态平衡,因

离子交换层析(ion-exchange-chromatography)分离氨基酸

目的要求1.熟悉离子交换层析技术的基本原理和方法2.熟悉离子交换层析分离氨基酸的基本原理和操作实验原理氨基酸是两性电解质,有一定的等电点,在溶液pH小于其pI值时带正电,大于其pI时带负电。故在一定的pH条件下,各种氨基酸的带电情况不同,与离子交换剂上的交换基团的亲和力亦不同。因而得到分离。本实验选

色谱分离柱的选择

气相色谱法作为一种非常优异的分析方法的主要原因,就是其具有对多种气体成分(尤其是复杂气体混合物)先进行逐一分离,然后再鉴定的功能。而被测成份的分离功能是色谱分离柱来完成的。因此,色谱柱的选择是关系到能否检测出被测成份的关键环节。如果色谱柱不能把被测成份(包括已知成分和未知成分)一一分开,则检测

离子交换层析法(ion-exchange-chromatography)分离氨基酸

实验原理离子交换层析法主要是根据物质的解离性质的差异而选用不同的离子交换剂进行分离的方法。各种氨基酸分子的结构不同,在同一pH时与离子交换树脂的亲和力有差异,因此可依据亲和力从小到大的顺序被洗脱液洗脱下来,达到分离的效果。试剂和器材一、试剂与材料苯乙烯磺酸钠型树脂(强酸1×8,100—200目);2

离子色谱的分离方式—高效离子交换色谱

  HPIC 的分离机理主要是离子交换,是基于离子交换树脂上可离解的离子与流动相中具有相同电荷的离子之间进行的可逆交换。依据不同离子对交换剂的不同亲合力而被逐渐分离。它是离子色谱的主要分离方式,用于亲水性阴、阳离子的分离。如以 NaOH 为淋洗液分析水体中阴离子时,先用淋洗液平衡阴离子交换分离柱,再

色谱柱的填料有哪些阳离子交换柱

阳离子是指功能基团,有很多选择,强阳弱阳;基质又有多种,主要可分为硅胶和聚合物,聚合物种类比较多,如PSDVB,聚甲基丙烯酸酯等。

PH梯度萃取分离及柱色谱分离原理

pH梯度萃取法是分离酸性、碱性、两性成分常用的手段.其原理是由于溶剂系统 pH变化改变了它们的存在状态(游离型或解离型),从而改变了它们在溶剂系统中的分配系数.如混合黄酮苷元,由于结构中酚羟基的数目和位置不同,...

阴离子交换色谱柱的清洗方法

对于阴离子色谱,通用有三种清洗方式,分别用于清洗酸溶性、碱溶性或有机污染物,在清洗过程中必须要确保严格按照清洗过程进行,否则会引起色谱柱的局部高压而损坏色谱柱。对于有机溶剂清洗色谱柱,需要逐步减少有机溶剂的量以避免由于混合的流动相黏度的变化。   (一)选择合适的清洗溶剂   1对低价亲水污染物:用

离子交换色谱柱的优点及用途

离子交换色谱柱的优点是:1、具有开放性支持骨架,大分子可以自由进入和迅速扩散,故吸附容量大。2、具有亲水性,对大分子的吸附不大牢固,用温和条件使可以洗脱,不致引起蛋白质变性或酶的失活。3、多孔性,表面积大、交换容量大,回收率高,可用于分离和制备。离子交换色谱柱产品用途:1、超高速分离用色谱柱——蛋白

离子交换色谱法的分离原理

离子交换色谱(ion exchange chromatography,IEC)以离子交换树脂作为固定相,树脂上具有固定离子基团及可交换的离子基团。当流动相带着组分电离生成的离子通过固定相时,组分离子与树脂上可交换的离子基团进行可逆变换。根据组分离子对树脂亲合力不同而得到分离。阳离子交换:阴离子交换:

离子交换色谱法的分离原理

离子交换色谱(ion exchange chromatography,IEC)以离子交换树脂作为固定相,树脂上具有固定离子基团及可交换的离子基团。当流动相带着组分电离生成的离子通过固定相时,组分离子与树脂上可交换的离子基团进行可逆变换。根据组分离子对树脂亲合力不同而得到分离。阳离子交换:阴离子交换:

离子交换色谱法的分离原理

离子交换色谱(ion exchange chromatography,IEC)以离子交换树脂作为固定相,树脂上具有固定离子基团及可交换的离子基团。当流动相带着组分电离生成的离子通过固定相时,组分离子与树脂上可交换的离子基团进行可逆变换。根据组分离子对树脂亲合力不同而得到分离。阳离子交换:阴离子交换:

离子交换色谱法的分离原理

(Ion-exchange Chromatography)IEC是以离子交换剂作为固定相。IEC是基于离子交换树脂上可电离的离子与流动相中具有相同电荷的溶质离子进行可逆交换,依据这些离子以交换剂具有不同的亲和力而将它们分离。以阴离子交换剂为例,其交换过程可表示如下:X-(溶剂中) (树脂-R4N C

色谱柱柱温的高低对色谱分离有什么影响

柱温越高,出峰越快,保留时间越短,有些组份可能分离度不够.无法完全分开.

色谱柱柱温的高低对色谱分离有什么影响

柱温越高,出峰越快,保留时间越短,有些组份可能分离度不够.无法完全分开.

色谱柱柱温的高低对色谱分离有什么影响

柱温越高,出峰越快,保留时间越短,有些组份可能分离度不够.无法完全分开.

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柱温越高,出峰越快,保留时间越短,有些组份可能分离度不够.无法完全分开.

如何应用离子交换层析分离氨基酸混合物

  离子交换树脂是一种合成的高聚物,不溶于水,能吸水膨胀.高聚物分子由能电离的极性基团及非极性的树脂组成.极性基团上的离子能与溶液中的离子起交换作用,而非极性的树脂本身物性不变.通常离子交换树脂按所带的基团分为强酸(=R=S03H)