血红蛋白与核黄素的凝胶柱色谱分离
原理凝胶渗透色谱就是按照溶质分子的大小不同而进行分离的一种色谱技术,当溶质分子大小不同的样品溶液通过凝胶柱时,由于凝胶颗粒内部的网络结构具有分子筛作用,分子大小不同的溶质就会受到不同的阻滞作用,本实验血红蛋白分子量大,不易渗入网络,被排阻在凝胶颗粒之外,因而所受到阻滞作用小,先流出色谱床。核黄素分子量小,能渗透到网络的内部,洗脱流程长,因此所受到的阻滞作用大,后流出色谱床,这样就可以达到分级分离的目的。本实验采用Sephadex G-25凝胶柱,分离血红蛋白和核黄素的混合溶液,并测出洗脱曲线。操作1.凝胶处理:(1)溶涨与浮选:将凝胶放入过量的水中浸泡6小时(沸水浴中为2小时)。浸泡后搅动凝胶再静置,待凝胶沉积后,倾去上层细粒悬液,如此反复多次。(2)平衡:将浸泡后的凝胶,用十倍量的洗脱液处理,约1小时,搅拌后继续去除上层细浮悬液。2.装柱将色谱柱垂装好,自柱底端出口的胶皮管内用重力通入溶液以除去柱管内和砂芯底部的气泡,待气泡排......阅读全文
血红蛋白与核黄素的凝胶柱色谱分离
原理凝胶渗透色谱就是按照溶质分子的大小不同而进行分离的一种色谱技术,当溶质分子大小不同的样品溶液通过凝胶柱时,由于凝胶颗粒内部的网络结构具有分子筛作用,分子大小不同的溶质就会受到不同的阻滞作用,本实验血红蛋白分子量大,不易渗入网络,被排阻在凝胶颗粒之外,因而所受到阻滞作用小,先流出色谱床。核黄素分子
凝胶色谱柱
分类 根据分离的对象是水溶性的化合物还是有机溶剂可溶物,凝胶色谱又可分为凝胶过滤色谱(GFC)和凝胶渗透色谱(GPC)。凝胶过滤色谱一般用于分离水溶性的大分子
凝胶色谱柱
凝胶色谱柱:由于凝胶色谱柱是根据被分离物质的分子量大小而分离物质,通常用稀的氢氧化钠或非离子型去垢剂(0.2%-1%NP-40或Lubrol)冲洗可除去大部分的结合物质,如果一些污染物仍然不能清除时,用24%或30%乙腈冲洗过夜可除去疏水蛋白,用30%-50%乙酸可除去亲水蛋白,用蛋白水解酶处理可分
凝胶色谱柱
分类 根据分离的对象是水溶性的化合物还是有机溶剂可溶物,凝胶色谱又可分为凝胶过滤色谱(GFC)和凝胶渗透色谱(GPC)。凝胶过滤色谱一般用于分离水溶性的大分子,凝胶过滤色谱柱如多糖类化合物。凝胶的代表是葡萄糖系列,洗脱溶剂主要是水。凝胶渗透色谱法主要用于有机溶剂中可溶的高聚物 (聚苯乙烯、
柱色谱分离
所用色谱管为内径均匀、下端缩口的硬质玻璃管,下端用棉花或玻璃纤维塞住,管内装有吸附剂。色谱柱的大小,吸附剂的品种和用量,以及洗脱时的流速,均按各单体中的规定。吸附剂的颗粒应尽可能保持大小均匀,以保证良好的分离效果,除另有规定外通常多采用直径为0.07-0.15mm的颗粒。吸附剂的活性或吸附力对分离效
凝胶过滤色谱柱
凝胶过滤色谱柱如多糖类化合物。凝胶的代表是葡萄糖系列,洗脱溶剂主要是水。凝胶渗透色谱法主要用于有机溶剂中可溶的高聚物 (聚苯乙烯、聚氯已烯、聚乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯等) 相对分子质量分布分析及分离,常用的凝胶为交联聚苯乙烯凝胶,洗脱溶剂为四氢呋喃等有机溶剂。凝胶色谱不但可以用于分离测定高聚物的相对分
SRT凝胶色谱柱
SRT凝胶色谱柱:SRT SEC键合固定相采用ZL的表面修饰技术,通过在高纯度具有良好机械稳定性的硅胶基质上,键合一层均匀的纳米厚度中性亲水薄膜而制备得到。工艺采用可控的化学修饰技术,因此能确保色谱柱与色谱柱之间有着可靠的重现性。SRT填料采用化学键合技术,表面亲水涂层覆盖完全,因此不仅具有优异的稳
凝胶色谱柱操作
1、 溶胀商品凝胶是干燥的颗粒,通常以40~63um的使用zui多。凝胶使用前需要在洗脱液中充分溶涨一至数天,如在沸水浴中将湿凝胶逐渐升温到近沸,则溶涨时间可以缩短到1~2小时。凝胶的溶涨一定要完全,否则会导致色谱柱的不均匀。热溶涨法还可以杀死凝胶中产生的细菌、脱掉凝胶中的气泡。2、 装柱由于凝胶的
色谱柱分离经验
色谱柱可以分为:加压、常压、减压色谱柱。压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候,常压柱是效率最高的,但是时间也最长,比如天然化合物的分离,一个柱子几个月也是有的。减压柱能够减少硅胶的使用量,感觉能够节省一半甚至更多,但是由于大量的空气通过硅胶
色谱柱分离经验
柱子可以分为:加压,常压,减压。压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候,常压柱是效率最高的,但是时间也最长,比如天然化合物的分离,一个柱子几个月也是有的。减压柱能够减少硅胶的使用量,感觉能够节省一半甚至更多,但是由于大量的空气通过硅胶会使溶剂
色谱柱分离原理
原理很简单,就是相似相溶的原理,相溶的停留时间长,极性不相溶的仪时间短。
色谱柱分离经验
色谱柱子可以分为:加压,常压,减压。 压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候,常压柱是效率最高的,但是时间也最长,比如天然化合物的分离,一个柱子几个月也是有的。 减压柱能够减少硅胶的使用量,感觉能够节省一半甚至更多,但是由于大量的
SRT凝胶色谱柱特点
SRT凝胶色谱柱特点:● 高柱容量、高分辨率● 宽的pH范围 (pH范围2-8.5)● 使用寿命长● 低盐浓度洗脱,适合LC-MS分析● 对于生物样品无强吸附● 极低的非特异性吸附, 高的蛋白回收率及活性回收率● 解决多维色谱分析应用
TSK凝胶色谱柱简介
TOSOH公司是世界上专门从事生产生物样品分离介质的公司之一,其最著名的产品是TSK-GEL色谱柱及其填料,已经在世界范围内非常多的实验室和工厂使用。大量的数据表明该产品非常适合生物及相关样品的分析分离。TSK-GEL SW系列凝胶色谱柱TSK-GEL SW系列色谱柱的填料是以刚性的球形硅胶为基质,
凝胶色谱柱清洗方法
亲水性乙烯基树脂基质蛋白分离用色谱柱,除了可选用键合了离子交换基团的离子交换柱外,还可选用疏水反应、亲和等其他多种类型的柱子。 这些类型的色谱柱,其充填介质化学稳定性好,不易发生由于官能基脱落而导致样品组分洗脱位置变化的现象。尽管如此,由于柱子的反复使用,在长时间使用后,样品组分的洗脱情况
TSK凝胶色谱柱简介
TOSOH公司是世界上专门从事生产生物样品分离介质的公司之一,其最著名的产品是TSK-GEL色谱柱及其填料,已经在世界范围内非常多的实验室和工厂使用。大量的数据表明该产品非常适合生物及相关样品的分析分离。 TSK-GEL SW系列凝胶色谱柱 TSK-GEL SW系列色谱柱的填料是以刚性的球形硅胶为基
凝胶色谱柱清洗方法
亲水性乙烯基树脂基质蛋白分离用色谱柱,除了可选用键合了离子交换基团的离子交换柱外,还可选用疏水反应、亲和等其他多种类型的柱子。 这些类型的色谱柱,其充填介质化学稳定性好,不易发生由于官能基脱落而导致样品组分洗脱位置变化的现象。尽管如此,由于柱子的反复使用,在长时间使用后,样品组分的洗脱情况还
凝胶渗透色谱分离原理
分离原理凝胶具有化学惰性,它不具有吸附、分配和离子交换作用。让被测量的高聚物溶液通过一根内装不同孔径的色谱柱,柱中可供分子通行的路径有粒子间的间隙(较大)和粒子内的通孔(较小)。当聚合物溶液流经色谱柱(凝胶颗粒)时,较大的分子(体积大于凝胶孔隙)被排除在粒子的小孔之外,只能从粒子间的间隙通过,速率较
凝胶色谱的分离原理
一个含有各种分子的样品溶液缓慢地流经凝胶色谱柱时,各分子在柱内同时进行着两种不同的运动:垂直向下的移动和无定向的扩散运动。大分子物质由于直径较大,不易进入凝胶颗粒的微孔,而只能分布颗粒之间,所以在洗脱时向下移动的速度较快。小分子物质除了可在凝胶颗粒间隙中扩散外,还可以进入凝胶颗粒的微孔中,即进入
凝胶色谱柱适用于分析分离蛋白和多肽类样品
凝胶色谱柱专为合成高分子在高温条件下的GPC分离而设计。该填料为高硬度且经过表面修饰的硅胶颗粒,可解决有机聚合填料如PS/DVB等在有机溶剂中遇高温溶胀的难题。在有机溶剂中可在高温度条件下保持高度稳定。此外,它还具有低的传质阻力,从而可确保了分离中的高的分离效率。凝胶色谱柱的填料是亲水而刚性,多孔球
色谱分离柱的选择
气相色谱法作为一种非常优异的分析方法的主要原因,就是其具有对多种气体成分(尤其是复杂气体混合物)先进行逐一分离,然后再鉴定的功能。而被测成份的分离功能是色谱分离柱来完成的。因此,色谱柱的选择是关系到能否检测出被测成份的关键环节。如果色谱柱不能把被测成份(包括已知成分和未知成分)一一分开,则检测
SRTC凝胶色谱柱
SRT-C凝胶色谱柱:在实际的蛋白分离、分析工作中,科研工作者经常会遇到某些疏水性蛋白及聚合物改性蛋白在常规SEC柱上出峰状态与理论不符的情况。针对此种情况,成都摩尔科学仪器有限公司在SRT系列色谱柱的基础上,专门推出针对该类样品的Sepax SRT-C SEC系列色谱柱。该键合固定相采用ZL的表面
凝胶柱色谱系统概述
凝胶柱色谱系统是一种用于食品科学技术、生物学领域的分析仪器,于2018年1月26日启用。 技术指标 凝胶净化系统GPC、固相萃取SPE和定量浓缩系统三个模块在同一平台上可以按需在线联机组合使用。 主要功能 主要用于各类食品样品、食品添加剂以及食品塑化剂中除去大分子物质和杂质,能全在线转移
凝胶色谱柱的操作要点
1、溶胀 商品凝胶是干燥的颗粒,通常以40~63um的使用最多。凝胶使用前需要在洗脱液中充分溶涨一至数天,如在沸水浴中将湿凝胶逐渐升温到近沸,则溶涨时间可以缩短到1~2小时。凝胶的溶涨一定要完全,否则会导致色谱柱的不均匀。热溶涨法还可以杀死凝胶中产生的细菌、脱掉凝胶中的气泡。 2、装柱
凝胶层析柱,离子交换柱,色谱吸附柱
凝胶柱层层析又称凝胶过滤,是一种按分子量大小分离物质的层析方法。该方法是把样品加到充满着凝胶颗粒的层析柱中,然后用缓冲液洗脱。大分子不能进入凝胶颗粒中的静止相中,只留在凝胶颗粒之间的流动相中,因此以较快的速度首先流出层析柱,而小分子则能自由出入凝胶颗粒中,并很快在流动相和静止相之间形成动态平衡,因
装填凝胶色谱柱时,色谱柱不能有气泡存在
凝胶柱是不允许气泡进入的,否则将会使柱效降低甚至形成微小的难以驱除的气室。因此,为了防止气泡进入色谱柱,一定要使用经过脱气的流动相,并且要严格按照下列步骤来安装色谱柱。a.拆卸下色谱柱入口处的密封螺丝,观察是否有溶剂渗出;b.如有溶剂渗出,即可将色谱柱接到管路上,以避免气泡的进入;c.如无溶剂渗出时
凝胶柱洗脱速度对分离效果的影响
洗脱速度会影响凝胶过滤的分离效果,一般洗脱速度要恒定而且合适。保持洗脱速度恒定通常有两种方法,一种是使用恒流泵,另一种是恒压重力洗脱。洗脱速度取决于很多因素,包括柱长、凝胶种类、颗粒大小等,一般来讲,洗脱速度慢一些样品可以与凝胶基质充分平衡,分离效果好。但洗脱速度过慢会造成样品扩散加剧、区带变宽,反
PH梯度萃取分离及柱色谱分离原理
pH梯度萃取法是分离酸性、碱性、两性成分常用的手段.其原理是由于溶剂系统 pH变化改变了它们的存在状态(游离型或解离型),从而改变了它们在溶剂系统中的分配系数.如混合黄酮苷元,由于结构中酚羟基的数目和位置不同,...
SRTC-凝胶色谱柱特点
SRT-C 凝胶色谱柱特点:● 高载量及高分辨率● 稳定的的批间重现性● 高的蛋白回收率,且蛋白不易失活● 极低的非特异性吸附● 专为疏水性蛋白及改性蛋白(如PEG化抗体)设计● 适用于常规生物样品的分离与制备