胰蛋白酶的制备及活力的测定2
(9)0.8 mol/L pH9.0硼酸缓冲液:取20ml 0.8 mol/L硼酸溶液,加80ml 0.2 mol/L四硼酸钠溶液,混合后,用pH计检查校正。(10)0.4 mol/L pH9.0硼酸缓冲液(用0.8 mol/L稀释1倍即可);(11)0.2 mol/L pH8.0硼酸缓冲液:取70ml 0.2 mol/L硼酸溶液,加30ml 0.5 mol/L四硼酸钠溶液,混合后,用pH计校正。(12)0.05 mol/L pH8.0 Tris-HCl 缓冲液:取50mL 0.1 mol/LTris加29.2 mL mol/L HCl 加水定容至100mL。(13)底物溶液的配制:即每毫升0.05 mol/L pH8.0 Tris-HCl 缓冲液中加0.34mgBAEE和2.22mg的氯化钙。2、器材(1)新鲜或冰冻猪胰脏(2)食品加工机和高速分散器。(3)研钵。(4)大玻璃漏斗。(5)布氏漏斗。(6)抽滤瓶。(7)纱布。(8......阅读全文
电子显微镜生物标本的制备及观察实验2
实验方法原理电子枪发射出的热电子,在加速电压作用下,形成高速电子流,经聚光镜和物镜的作用形成一极细的电子束,扫描于标本表面。入射电子与标本中的原子相互作用产生二次电子,二次电子的数量和每个电子的能量随标本表面形状及元素成分的不同而变化。二次电子被接收并经过放大,即可在荧光屏上显现出被放大的标本表面图
超纯水制备系统(2)
工作原理 其中初步吸附过滤阶段包括蜂房过滤器、活性炭过滤器、压缩活性炭过滤器、保安过滤器 ①蜂房过滤器的主要作用是去除大于10um的凝聚胶体和悬浮颗粒 ②活性炭过滤器的主要作用是活性炭利用本身良好的吸附作用将水中的余下氯气和小分子有机物截留在滤芯,随滤芯带走 ③压缩活性炭的主要作用是利用比活
小鼠细胞染色体制备及核型分析实验2
GIEMSA 显带(G显带)实验材料分裂中期染色体玻片试剂、试剂盒2XSSCNaCl胰蛋白酶 Giemsa溶液磷酸盐缓冲液玻片染色缸仪器、耗材亮视野显微镜实验步骤1.于室温存放染色体玻片 7~10d。2.在盛有 60~62°C 的 2XSSC 溶液的广口瓶中孵育玻片 1.5 h,每个广口瓶中盛放玻片
兔肝RNA的制备及测定实验原理和操作步骤
实验原理细胞内大部份RNA均与蛋白质结合在一起,并且多以核蛋白的形式存在。因此,分离制备RNA 时,首先遇到的是必须使RNA与蛋白解离,并除去蛋白质。由于RNA的种类来源和存在形式不同,所用的制备方法各异,一般常用的方法有,盐酸胍法,去污剂法和苯酚法。其中,以苯酚法使用较为广泛。产品纯度高,适合
酶的活力定义
酶的活力由多种定义方式,常用的有以下两种:1、在一定的条件下(温度、PH),单位时间内催化转化一定量的底物生成特定产物所需的酶量;当测定酶系活力时,如果在特定条件下,采用每1分钟催化1μmol的底物转化为产物的酶量的表达形式时,该酶活力值即为国际单位(IU)。2、在一定的条件下(温度、PH),单位时
酶的活力单位
开特(英文:Katal,符号:kat)是一个量度酶的催化活动的国际单位,定义为每秒能转化多少摩尔的浓度,例如1开特等于每秒能转化1摩尔的浓度。这个单位于1972年开始被使用,并于1999年正式成为国际单位的衍生单位。
酶的活力单位
酶活力的高低,是以酶活力的单位数来表示。(1)国际单位 1961年国际生物化学与分子生物学联合会规定:在特定条件下(温度可采用25℃或其他选用的温度,pH值等条件均采用最适条件),每1min催化1μmol的底物转化为产物的酶量定义为1个酶活力单位。(2)比活力 是酶纯度的一个指标,是指在特定的条件下
胰蛋白酶切磷酸化多肽作图实验—样品制备
实验材料蛋白质试剂、试剂盒甲醇电泳缓冲液仪器、耗材凝胶电泳实验步骤1. 用单向或者双向凝胶电泳将 32P 标记的目的蛋白质与其他不需要的成分分开。2. 电泳结束后,用 50% 甲醇清洗三次,时间控制在 6 小时,去处 SDS 和电泳缓冲液将凝胶放在两张塞热玢膜(Bio-Rad) 之间吸干。用放射性墨
植物组织中超氧物歧化酶活力的测定
实验概要 超氧物歧化酶(SOD)普遍存在于动、植物体内,是一种清除超氧阴离子自由基(O2- )的酶,它催化下列反应: 反应产物H2O2可被过氧化氢酶进一步分解或被过氧化物酶利用。因此SOD有保护生物体免受活性氧伤害的能力。已知此酶活力与植物抗逆性及衰老有密切关系,故成
药用植物种子生活力的测定方法
种子生活力是指种子发芽的潜在能力或种胚具有的生命力。药用植物种子寿命长短各异,很多种子休眠期较长,为了在短期内了解种子的品质,一般采用生物化学的方法测定种子的牛活力,以确定种子是否能用并估算播种量。测定种子生活力的方法常见的有红四氮唑染色法、靛红染色法、剥胚法、荧光法等。日前应用较为广泛的是红四氮唑
测定α1抗胰蛋白酶(AAT)的临床意义
肝脏合成,α1-抗胰蛋白酶是α1-区带显色的主要成份。是血液中最主要的蛋白酶抑制剂,可抑制多种蛋白酶的活性。一般认为α1-抗胰蛋白酶的主要功能是对抗由多形核白细胞吞噬作用时释放的溶酶体蛋白水解酶。临床意义(1)浓度升高:见于急性炎症、外科手术(急性时相反应蛋白)妊娠、长期服用可的松、雌激素等药物也可
亲和层析法(affinity-chromatography)纯化胰蛋白酶2
本实验采用猪胰蛋白酶的天然抑制剂—鸡卵类粘蛋白作为配基.从猪胰脏的粗提液中分离纯化胰蛋白酶。鸡卵类粘蛋白是一种专一性很强的胰蛋白酶的抑制剂,对猪和牛的胶蛋白酶有很强的抑制作用。而对胰凝乳蛋白酶无抑制作用。在pH7.6~8.0的范围内,猪或牛胰蛋白酶能牢固地吸附在鸡卵类粘蛋白上,在 PH2.5
荧光法测定种子生活力实验
实验方法原理 植物种子经常存在许多能够在紫外线照射下产生荧光的物质,如某些黄酮类,香豆素类、酚类物质等,在种子衰老过程中,这些荧光物质的结构和成分往往发生变化,因而荧光的颜色也相应改变,有些种子在衰老死亡时荧光物质的性质虽未改变,但由于生活力衰退或已死亡的细胞原生质透性加大,浸种时种子中的荧光物质很
荧光法测定种子生活力实验
实验方法原理:植物种子经常存在许多能够在紫外线照射下产生荧光的物质,如某些黄酮类,香豆素类、酚类物质等,在种子衰老过程中,这些荧光物质的结构和成分往往发生变化,因而荧光的颜色也相应改变,有些种子在衰老死亡时荧光物质的性质虽未改变,但由于生活力衰退或已死亡的细胞原生质透性加大,浸种时种子中的荧光物质很
荧光法测定种子生活力实验
实验方法原理植物种子经常存在许多能够在紫外线照射下产生荧光的物质,如某些黄酮类,香豆素类、酚类物质等,在种子衰老过程中,这些荧光物质的结构和成分往往发生变化,因而荧光的颜色也相应改变,有些种子在衰老死亡时荧光物质的性质虽未改变,但由于生活力衰退或已死亡的细胞原生质透性加大,浸种时种子中的荧光物质很容
如何利用酶标仪进行细胞增殖与活力测定
酶标仪在细胞生物学与药物筛选方面有着非常高的使用频率,而在各种细胞检测实验中,细胞增殖能力的检测是最为常见也是最基础的检测之一。 ●为什么要检测细胞状态呢? 细胞状态是直接反应细胞生理状态的重要指标,通过监测细胞在各种化合物刺激作用下的反应状态,从而确定测试分子是否对细胞增殖有影
样品的采取及制备
首先明确的是食品分析的一般程序为:样品的采集、制备和保存,样品的预处理、成分分析、分析数据处理及分析报告的撰写。 那么什么是样品的采集呢?所谓采样就是从整批产品中抽取一定量具有代表性样品的过程。一. 采样的目的意义 首先正确采样,必须遵守两个原则:第一,采集的样品要均匀,有代表性,能
溶菌酶的制备及优点
制备 溶菌酶是采用 生物工程技术进行克隆、提取而制取,它是一种天然酶,安全绿色的添加剂,无抗药性。 该酶广泛存在于人体多种组织中,鸟类和家禽的蛋清、哺乳动物的泪、 唾液、血浆、尿、乳汁等体液以及微生物中也含此酶,其中以蛋清含量最为丰富。从鸡蛋清中提取分离的溶菌酶是由18种129个 氨基酸残基
溶胶的制备及电泳
可以减少溶液间的扩散现象,使界面保持清晰。电导大的辅助液,离子浓度大,离子进入溶胶,容易引起溶胶凝聚,还降低溶胶内部的电场强度,降低电泳速度。
肝素Sepharose-CL2B-的制备实验
试剂、试剂盒SepharoseCL-2B乙腈溴化氰甘氨酸NaOH肝素Na2CO3NaHCO3盐酸乙醇胺NaAcNaCl尿素NaCl3Tris-HClEDTA叠氮钠实验步骤材料SepharoseCL-2B(PharmaciaBiotech,Inc.)乙腈溴化氰(CNBr)(AldrichChemica
单克隆抗体上清的制备实验2
实验材料抗体试剂、试剂盒PBS仪器、耗材离心机离心管实验步骤1. 同备择方案1中大规模制备MAb上清的步骤1~4,但等细胞长到合适的密度时就应收获细胞,或者是在细胞生长的平台期收获。 2. 将细胞倒入无菌的250 ml 锥形离心管中,于4℃ 250 g 离心15 min,弃上清。 3. 置细胞
肝素Sepharose-CL2B-的制备实验
肝素-Sepharose CL-2B 的制备实验 试剂、试剂盒 SepharoseCL-2B 乙腈
肝素Sepharose-CL2B-的制备实验
试剂、试剂盒 SepharoseCL-2B乙腈溴化氰甘氨酸NaOH肝素Na2CO3NaHCO3盐酸乙醇胺NaAcNaCl 尿素NaCl3Tris-HClEDTA叠氮钠实验步骤 材料SepharoseCL-2B(PharmaciaBiotech,Inc.)乙腈溴化氰(CNBr)(AldrichChem
干旱对冬小麦根系的水分及活力影响
干旱对冬小麦根系的水分及活力影响干旱对于冬小麦根系水分及活力的影响简介 水分短缺是影响我北方冬小麦生产力的重要因素,因此冬小麦的抗旱性成为当前农业研究中的重要课题。小麦种植环境的干旱情况可使用土壤张力计进行测定分析,通过该仪器对干旱情况的掌握并进行调节降低干旱对小麦生长的影响。在小麦的生长过程中
细胞活力分析计数仪的技术指标及功能
技术指标 成像模式:一体化全自动细胞分析系统,触摸式电动开启。具备荧光和透射光宽场成像分析模式。成像方式:单色,多色,终点法,时间延迟法,动力学法,孔模式,蒙太奇拼接,Z轴层切,触发模式等。光源:荧光成像为长寿命固态光源,4个独立单色光源整合,寿命大于一万小时。自动电子关闸系统:配合独立检测通
注射用胰蛋白酶的类别及贮藏方法
类别同胰蛋白酶规格(1)1.25万单位(2)2.5万单位(3)5万单位(4)10万单位贮藏密闭,在凉暗处保存。
灰黄霉素测定实验的试样制备
1、对照品溶液的制备 精密称取灰黄霉素对照品约50mg,置50mL量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,精密量取5mL,置50mL量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,即为对照品溶液。 2、供试品溶液的制备 取供试品10片,精密称定,研细,精密称取适量(约相当于灰黄霉素100mg),置100mL量
植物体内硝酸还原酶活力的测定(活体法)
【原理】硝酸还原酶(NR)是植物氮素同化的关键酶,它催化植物体内的硝酸盐还原为亚硝酸盐:产生的亚硝酸盐与对–氨基苯磺酸(或对–氨基苯磺酰胺)及α–萘胺(或萘基乙烯二胺)在酸性条件下定量生成红色偶氮化合物。其反应如下:生成的红色偶氮化合物在540nm波长下有最大吸收峰,可用分光光度法测定。硝酸还原酶活
植物体内硝酸还原酶活力的测定(离体法)
【原理】 硝酸还原酶(NR)是植物氮素同化的关键酶,它催化植物体内的硝酸盐还原为亚硝酸盐: 产生的亚硝酸盐与对–氨基苯磺酸(或对–氨基苯磺酰胺)及α–萘胺(或萘基乙烯二胺)在酸性条件下定量生成红色偶氮化合物。其反应如下: 生成的红色偶氮化合物在540nm波长下有最大吸收峰,可用分
凝乳酶的活力参数
指1毫升凝乳酶溶液或1克干粉在35摄氏度条件下,40分钟内能凝结原奶的毫升数。标准液态凝乳酶的活力通常是1.2-1.5万,粉状凝乳酶是前者10倍,为12-15万。