胰蛋白酶切磷酸化多肽作图实验—样品制备
实验材料蛋白质试剂、试剂盒甲醇电泳缓冲液仪器、耗材凝胶电泳实验步骤1. 用单向或者双向凝胶电泳将 32P 标记的目的蛋白质与其他不需要的成分分开。2. 电泳结束后，用 50% 甲醇清洗三次，时间控制在 6 小时，去处 SDS 和电泳缓冲液将凝胶放在两张塞热玢膜（Bio-Rad) 之间吸干。用放射性墨水在凝胶边缘点几个记号。3. 置于 X 射线片下曝光，在读片灯下看放射自显影图，找到放射标记的目的蛋白带用干净刀片小心地切下目的胶带，放入带螺帽的离心管用 0.5~1 ml 50 mol/L 碳酸氢铵泡。剥下赛璐玢膜，将胶带修剪成更小的小条。4. 加一等份胰蛋白酶（1 μg 溶于 50 mmol/L 碳酸氢铵，TPCK 处理过），于 37℃ 在 360° 旋转器中消化和洗脱几小时或者过夜。5. 10000 g 离心样品 5 分钟。小心取出上清，用一小等份做液闪计数估计回收效率。6. 用真空离心浓缩器（Savant) 抽干上清......阅读全文
胰蛋白酶切磷酸化多肽作图实验—样品制备
实验材料蛋白质试剂、试剂盒甲醇电泳缓冲液仪器、耗材凝胶电泳实验步骤1. 用单向或者双向凝胶电泳将 32P 标记的目的蛋白质与其他不需要的成分分开。2. 电泳结束后，用 50% 甲醇清洗三次，时间控制在 6 小时，去处 SDS 和电泳缓冲液将凝胶放在两张塞热玢膜（Bio-Rad) 之间吸干。用放射性墨
胰蛋白酶切磷酸化多肽作图实验
实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 甲醇电泳缓冲液仪器、耗材 凝胶电泳实验步骤 1. 用单向或者双向凝胶电泳将 32P 标记的目的蛋白质与其他不需要的成分分开。2. 电泳结束后，用 50% 甲醇清洗三次，时间控制在 6 小时，去处 SDS 和电泳缓冲液将凝胶放在两张塞热玢膜（Bio-Rad) 之间吸干。用
胰蛋白酶切磷酸化多肽作图实验
胰蛋白酶切蛋白质样品的制备 双向薄层电泳与层析分离多肽片段 反向高效液相层析绘制多肽图谱 实验材料 蛋白质
胰蛋白酶切磷酸化多肽作图实验
胰蛋白酶切蛋白质样品的制备双向薄层电泳与层析分离多肽片段反向高效液相层析绘制多肽图谱实验材料蛋白质 试剂、试剂盒甲醇
胰蛋白酶切磷酸化多肽作图_双向薄层电泳/层析分离多肽
实验材料多肽样品试剂、试剂盒电泳缓冲液仪器、耗材平板电泳仪实验步骤1. 将平板电泳仪（型号 FBE-3000, Phannacia) 放在通过循环仪连接到恒温水浴的冷却板上进行电泳。电泳前 30 分钟将水浴温度调至 10℃ 到 15℃ 之间。每个电极槽加 400 ml 缓冲液。切两张 Whatman
胰蛋白酶切磷酸化多肽—反向高效液相层析绘制多肽图谱
实验材料胰蛋白酶切样品试剂、试剂盒尿素或盐酸胍仪器、耗材离心机实验步骤1. 加样前。做一次模拟加样，进行整个程序的洗脱，测 OD 初始值。记录所有实验变量：加样量、溶剂梯度、流速、吸收范围等。2. 制备 32P 标记的胰蛋白酶切样品（需要几千 cpm 才能有效地检测到 32P 标记的多肽 )。用 0
限制性酶切作图的概念
限制性酶切作图，它是将限制性酶切位点标定在DNA分子的相对位置。最简单的构建限制图的方法是比较不同限制酶产生的DNA片段的大小。
识别特异性酪氨酸磷酸化多肽抗体的制备
实验步骤基 本 方 案 1 多克隆抗磷酸肽抗体的制备材料B S A -琼 脂 糖 亲 和 基 质（Sigma) 填 装（如辅助方案 2 ) 于柱床体积IOml的层析柱磷酸化酪氨酸亲和基质层析柱（IOml 柱床体积；见辅助方案3)磷酸肽-B S A 偶联物免疫家兔的粗制血清PB S /叠氮钠.•含有0
多肽制备
固相多肽合成就是不断地在固相载体上加入α-氨基和侧链基团被保护的氨基酸。FMOC基团是用来保护α-氨基中的N的，去除保护基团后，再加入第二个氨基酸。产生的多肽通过一个连接臂将C端连接在树脂上，它可以被裂解下来。通常情况下，在多肽从树脂上裂解下来的同时去除侧链保护基团，一般采用哌啶去 FMOC保护基团
DNA作图实验
实验材料 DNA试剂、试剂盒 限制酶缓冲液仪器、耗材 电泳仪实验步骤 用低频率切割的不同限制性内切酶分别完全消化DNA。2. 从每个反应取小份样品作电泳分析，用已知的分子量标准作对照。剩余的样品置于冰浴。3. 比较分子量标准估算出DNA片段的长度，推导出每种限制性内切酶的酶切位点数目。4.
DNA作图实验
多种酶消化 限制酶部分消化 实验方法原理 应用遗传学技术构建能显示基因以及其他序列待征在基因组上位置的图。
磷酸化多肽及其修饰方法
蛋白质磷酸化是生物界最普遍，也是最重要的一种蛋白质翻译后修饰，20世纪50年代以来一直被生物学家看作是一种动态的生物调节过程。在细胞中，大概有1/3的的蛋白质被认为是通过磷酸化修饰的。蛋白质的磷酸化修饰与多种生物学过程密切相关，如DNA损伤修复、转录调节、信号传导、细胞凋亡的调节等。磷酸化蛋白质
磷酸化多肽及其修饰方法
蛋白质磷酸化是生物界最普遍，也是最重要的一种蛋白质翻译后修饰，20世纪50年代以来一直被生物学家看作是一种动态的生物调节过程。在细胞中，大概有1/3的的蛋白质被认为是通过磷酸化修饰的。蛋白质的磷酸化修饰与多种生物学过程密切相关，如DNA损伤修复、转录调节、信号传导、细胞凋亡的调节等。磷酸化蛋白质
磷酸化多肽及其修饰方法
蛋白质磷酸化是生物界最普遍，也是最重要的一种蛋白质翻译后修饰，20世纪50年代以来一直被生物学家看作是一种动态的生物调节过程。在细胞中，大概有1/3的的蛋白质被认为是通过磷酸化修饰的。蛋白质的磷酸化修饰与多种生物学过程密切相关，如DNA损伤修复、转录调节、信号传导、细胞凋亡的调节等。磷酸化蛋白质及多
多肽磷酸化修饰及检测方法
磷酸化影响着细胞生命的方方面面。在细胞中，大概有1/3的的蛋白质被认为是通过磷酸化修饰的。蛋白质的磷酸化修饰与多种生物学过程密切相关，如DNA损伤修复、转录调节、信号传导、细胞凋亡的调节等。磷酸化蛋白质及多肽的研究可以帮助人们阐述上述过程的机理，进一步认识生命活动的本质。肽谷生物依据自身原料优势和技
应用切向流技术的DNA/蛋白质样品制备方案
生命科学研究中应用切向流技术（TFF）的DNA/蛋白质样品制备方案 生命科学实验室的超滤设备 密理博提供的实验室超滤全套解决方案 尽管切向流过滤Amicon® Ultra的超速装置，提供优良的性能（使用水平吊篮转子尤佳）。更多的用于与大规模操作
核酸透射电镜样品制备实验——核酸样品
实验方法原理很多球状蛋白均能在水溶液或盐溶液的表面形成不溶的变性薄膜，在适当的条件下这一薄膜可以成为单分子层，由伸展的肽链构成为一个分子网。当核酸分子与该蛋白质单分子膜作用时会由于蛋白质的氨基酸碱性侧链基团的作用，使得核酸从三维空间结构的溶液构型吸附于肽链网而转化为二维空间的构型，并从形态到结构均能
猪胰蛋白酶制备
实验概要本实验介绍了猪胰蛋白酶制备的原理及操作步骤等。实验原理胰蛋白酶是以无活性的酶原形式存在于动物胰脏中，在Ca2 的存在下，被肠激酶或有活性的胰蛋白酶自身激活，从肽链N端赖氨酸和异亮氨酸残基之间的肽键断开，失去一段六肽，分子构象发生一定改变后转变为有活性的胰蛋白酶。胰蛋白酶原的分子量约为2400
DNA荧光染色的样品制备实验
试剂、试剂盒PBS仪器、耗材DNA荧光染料流式细胞仪实验步骤DNA是细胞内含量比较恒定的参量，随着细胞增殖周期的各时相而发生变化。荧光染料（如PI）可选择性地定量嵌入核酸（DNA/RNA）的双螺旋碱基之间，与细胞特异性结合，DNA含量与荧光染料的结合量成正比，因此通过测定荧光强度可获知细胞的增殖情况
DNA荧光染色的样品制备实验
试剂、试剂盒 PBS 仪器、耗材 DNA荧光染料 流式细胞仪 实验步骤
电镜酶细胞化学实验——样品制备
目前电镜能定位的酶主要有三类，它们是水解酶、氧化酶、转移酶。通过电镜酶细胞化学技术间接证明酶的存在，可定性研究细胞的标志酶，以及在正常和病理状态下酶的改变与疾病之关系。实验方法原理电镜酶细胞化学反应分两步：①细胞内酶在一定条件下与底物进行初级酶反应（形成初级产物）；②应用捕捉剂与初级产物反应形成电子
DNA荧光染色的样品制备实验
试剂、试剂盒 PBS 仪器、耗材 DNA荧光染料 流式细胞仪 实验步骤
减数分裂作图实验
实验材料 酵母菌株试剂、试剂盒 消解酶 100T仪器、耗材 毛细吸管头强力胶水光学玻璃纤维YPD平板YPD培养管实验步骤 第 1 天显微针的制备四分体解剖针可以通过手工拉制细玻璃丝或使用「技术和方案 23, 制备四分体解剖针」中描述的光学纤维玻璃丝来制备。将会演示针的准备过程并且提供给你一些必需品，
DNA作图实验——多种酶消化
主要用于显示基因以及其他序列待征在基因组上位置的图。实验方法原理应用遗传学技术构建能显示基因以及其他序列待征在基因组上位置的图。实验材料DNA试剂、试剂盒限制酶缓冲液仪器、耗材电泳仪实验步骤1. 用低频率切割的不同限制性内切酶分别完全消化DNA。 2. 从每个反应取小份样品作电泳分析，用已知的分
减数分裂作图实验
实验材料酵母菌株试剂、试剂盒消解酶 100T仪器、耗材毛细吸管头强力胶水光学玻璃纤维YPD平板YPD培养管实验步骤第 1 天显微针的制备四分体解剖针可以通过手工拉制细玻璃丝或使用「技术和方案 23, 制备四分体解剖针」中描述的光学纤维玻璃丝来制备。将会演示针的准备过程并且提供给你一些必需品，以便你可
核酸透射电镜样品制备实验
实验方法原理很多球状蛋白均能在水溶液或盐溶液的表面形成不溶的变性薄膜，在适当的条件下这一薄膜可以成为单分子层，由伸展的肽链构成为一个分子网。当核酸分子与该蛋白质单分子膜作用时会由于蛋白质的氨基酸碱性侧链基团的作用，使得核酸从三维空间结构的溶液构型吸附于肽链网而转化为二维空间的构型，并从形态到结构均能
细菌透射电镜样品制备实验
实验方法原理 由于生物样品主要由碳、氢、氧、氮等元素组成，散射电子的能力很低，在电镜下反差小。所以在进行电镜的生物样品制备时通常还须采用重金属盐染色或金属喷镀等方法来增加样品的反差，提高观察效果。负染色法就是用电子密度高，本身不显示结构且与样品几乎不反应的物质（如磷钨酸钠或磷钨酸钾）来对样品进行「染
核酸透射电镜样品制备实验
核酸样品 实验方法原理 很多球状蛋白均能在水溶液或盐溶液的表面形成不溶的变性薄膜，在适当的条件下这一薄膜可以成为单分子层，由伸展的肽链构成为一个分子网。当核酸
LSCM样品制备中相关实验方法
样品制备中相关实验方法 用于免疫荧光抗体标记组织切片的载玻片需经过明胶、蛋白胶、多聚赖氨酸 ( Poly-L-Lysine)、硅烷(3-氨丙基三乙氧基硅烷，APES) 等处理，以粘贴组织切片，防止组织切片在免疫反应过程中脱落。简易明胶处理方法是将干净的载玻片浸于 0.1% 明胶热溶液中一分钟，取出沥
X射线衍射实验样品制备要求
1、金属样品如块状、板状、圆拄状要求磨成一个平面，面积不小于15X20毫米，如果面积太小可以用几块粘贴一起。 2、对于片状、圆拄状样品会存在严重的择优取向，衍射强度异常。因此要求测试时合理选择相应的方向平面。 3、对于测量金属样品的微观应力（晶格畸变），测量残余奥氏体，要求样品不能简单粗磨，