下游纯化工艺简介1
Downstream（下游）与上游相对的概念，一般而言，上游指基因克隆、细胞培养等目的产物表达工序，下游指从表达有目的产物的复杂的混合液中分离纯化得到符合要求的目的产物的一系列步骤。美、日、欧等发达国家生物技术产品工业化的实践证明：生物技术产品的产业化高度依赖于基因工程下游工序技术及设备的进步。一、纯化工艺常用衔接技术：1、盐析。常采用硫酸铵、硫酸钠盐析，获得的盐析沉淀物在低温冰箱(<-20℃)中可以长期保存。2、等电点沉淀。根据蛋白质、多肽在等电点时溶解度最小的特点进行。3、有机溶剂沉淀。采用冷的丙酮、乙醇沉淀蛋白质。例如人血浆蛋白的乙醇分级沉淀。4、透析。根据目的蛋白质、多肽的分子量，选取适宜的透析袋进行透析，可以起到更换缓冲液以及去除一些低分子杂质的目的。5、超滤。根据目的蛋白质、多肽的分子量，选取适宜截留分子量(MWcutoff)的超滤膜进行超滤。6、真空冷冻干燥。利用在低温和高真空条件下，冰不经融化为液态水而直接......阅读全文
下游纯化工艺简介4
2、离子交换色谱（ion exchange chromatography）蛋白质、多肽均属于两性电解质，在缓冲液pH小于其等电点时，带净正电荷，而在缓冲液pH大于其等电点时，带净负电荷。阴离子交换凝胶本身带有正电荷基团，阳离子交换凝胶本身带负电荷基团。由于静电相互作用而使样品结合到凝胶上，再采用盐浓
下游纯化工艺简介3
4、蛋白质的来源 （1）天然蛋白： 天然产物中的目的蛋白一般含量很少而且组分极复杂，在分离过程中须采用多个步骤才能去除各种杂质，并应在整个过程中降低蛋白水解酶的活性。 （2）重组蛋白： 重组蛋白则目标蛋白的丰度较高。重组蛋白主要有三种表达定位： a、细胞质：在这种情况下，必须
下游纯化工艺简介1
Downstream（下游）与上游相对的概念，一般而言，上游指基因克隆、细胞培养等目的产物表达工序，下游指从表达有目的产物的复杂的混合液中分离纯化得到符合要求的目的产物的一系列步骤。美、日、欧等发达国家生物技术产品工业化的实践证明：生物技术产品的产业化高度依赖于基因工程下游工序技术及设备的进步。一、
下游纯化工艺简介2
（2）样品预处理a、去除样品中颗粒物（0.45-0.22微米膜过滤或者10000 g离心15分钟）b、去除样品中脂类（10000 g离心15分钟或有机溶剂抽提）c、去除样品中核酸（加入核酸酶消化或者使核酸沉淀）d、抑制样品中蛋白水解酶（加入蛋白酶抑制剂、低温下快速第一步分离或在蛋白酶缺陷宿主中表达重
重组人胰岛素的制备—下游纯化工艺的研究（二）
3. 2 复性及重折叠经过初步纯化的RRhP I 通过Sephadex G225柱层析脱尿素并转换缓冲液为50 mmo löL 甘氨酸2N aOH, pH9. 5。层析图谱(见图3) , 有2 个层析峰,峰2 主要为折叠趋于正确的单体RRhP I, 收集峰2。进行SDS2PA GE 分析。结
重组人胰岛素的制备—下游纯化工艺的研究（一）
摘要 建立了一套通过大肠杆菌表达(H is) 62A rg2A rg2人胰岛素原[ (H is) 62A rg2A rg2human p ro insulin,RRhP I]制备重组人胰岛素的工艺。将大肠杆菌中以包涵体形式表达的RRhP I 依次经过DEA E2琼脂糖快流速阴离子交换层析, Se
下游处理的定义
中文名称下游处理英文名称downstream processing定 义特指生物工程产品生产程序中的后期加工。相对于工程菌、工程细胞株构建、发酵等生物工程产品生产的开始步骤而言，指的是生物产品的分离、纯化、加工、剂型制备等，直至达到产品质量要求的整个处理过程。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科
PCR的下游应用
・ Agarose Gel Electrophoresis of PCR Products(Robert H. Cruickshank)・ Agarose Gel Electrophoresis of PCR Products(Immunology Resource)
PCR的下游应用
· Agarose Gel Electrophoresis of PCR Products (Robert H. Cruickshank)· Agarose Gel Electrophoresis of PCR Products (Immunology Resourc
什么是上下游引物
引物（Primer）在聚合作用的起始时，可以刺激合成另一种大分子，并与反应物以共价键形式连接的序列。在核酸化学中，引物是一段短的单链RNA或DNA片段，可结合在核酸链上与之互补的区域，其功能是作为核苷酸聚合作用的起始点，核酸聚合酶可由其3′端开始合成新的核酸链。体外人工设计的引物被广泛用于聚合酶链反
DNA－下游序列的结构特点
中文名称下游序列英文名称downstream sequence定 义DNA或RNA分子中，相对于某一序列的3′方向的序列。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），总论（二级学科）
什么是上下游引物？
引物（Primer）在聚合作用的起始时，可以刺激合成另一种大分子，并与反应物以共价键形式连接的序列。在核酸化学中，引物是一段短的单链RNA或DNA片段，可结合在核酸链上与之互补的区域，其功能是作为核苷酸聚合作用的起始点，核酸聚合酶可由其3′端开始合成新的核酸链。体外人工设计的引物被广泛用于聚合酶链反
什么是上下游引物
引物（Primer）在聚合作用的起始时，可以刺激合成另一种大分子，并与反应物以共价键形式连接的序列。在核酸化学中，引物是一段短的单链RNA或DNA片段，可结合在核酸链上与之互补的区域，其功能是作为核苷酸聚合作用的起始点，核酸聚合酶可由其3′端开始合成新的核酸链。体外人工设计的引物被广泛用于聚合酶链
塔里木河下游再获生态输水
随着气温回升以及源流阿克苏河流域及塔里木河干流春灌的全面结束，塔里木河大西海子水库近期再次开闸放水，第十四次向塔里木河下游生态输水“解渴”。经过此前的13次生态输水，塔里木河下游生态“脱水”的病情已有明显改善，流域生态环境也得到保护和恢复。
什么是上游引物和下游引物
虽然这个问题很简单，但我怎么发觉挺难回答的......上游引物就是和要扩增基因片断上游序列结合的引物（引物就是单链寡聚核苷酸，基因扩增需要从引物开始），同理，下游引物指与目的基因片断下游序列结合者。具体示意如下：（上下两条长线代表DNA模板）5'-----------------------
上游盈利向好,下游景气度维持
国际原油价格：2017Q3Brent、WTI原油期货价格呈现由低往上走势，季度均价分别为52.2美元/桶和48.2美元/桶。本轮反弹首先是基于基本面的改善，后面不断得叠加地缘政治因素推升市场情绪，尤其是沙特王储反腐固权行动催生地缘不断发酵，17Q4以来Brent和WTI油价上涨超过10%，创下
税收大数据助力上下游产业
税收大数据时效性强、覆盖面广、颗粒度细，不仅可作为经济运行的“晴雨表”，还在助企实现有效购销、稳定产业链供应链等方面扮演重要角色。 今年以来，各地税务部门深入开展“补链助企”活动，利用税收大数据帮助企业拓展上游原料供给来源、打通下游产品销售渠道。 “产品交货期临近，但合作多年的供应商突然‘掉
环境成本高昂－湄公河下游大坝项目暂缓
老挝、泰国、柬埔寨、越南4国政府就是否在湄公河干流下游河段修建第一座大坝，即沙耶武里(Xayaburi)水坝的事宜日前未能达成协议。这意味着，湄公河主流下游河段盆地修建大坝的讨论将推延到湄公河流域国家的部长级会议上，目前时间尚未确定。 利益相关方各有态度 这对老挝来
病毒纯化和蛋白纯化区别
病毒纯化和蛋白质纯化都是生物制剂工程中常见的分离纯化方法，但它们的对象不同，具体区别如下：1. 病毒纯化与蛋白质纯化对象不同。病毒纯化的目标是将病毒从其它生物物质中进行分离和去除，以获得单个且纯净的病毒颗粒，如用于疫苗生产的病毒载体，而蛋白质纯化的目标是从生物体或来源中提取和纯化单一或多种蛋白质，如
细胞的纯化方法介绍（自然纯化和人工纯化）（二）
（1）上皮细胞与成纤维细胞的分离纯化： 两者在胰蛋白酶的作用下，由于成纤维细胞先脱壁，二上皮细胞要消化相当长的时间才脱壁，特别是在原代细胞初次传代和早期传代中两种差别尤为明显，故可采用多次差别消化方法将上皮细胞和成纤维细胞分开，方法步骤如下。 采用常规消化传代方式将0.25%胰蛋白酶注入培养
细胞的纯化方法介绍（自然纯化和人工纯化）（一）
体外培养的细胞源于人或动物或胚胎组织，体内的细胞都是混杂生长，每一种组织都有血管和间叶组织，因此，来源于上述组织的培养材料的原代细胞、传代细胞绝大多数都呈混合生长，既有上皮样细胞又有纤维样细胞，纤维样细胞又包括成纤维细胞、肌细胞、骨细胞、滑膜细胞等，混杂的细胞会直接影响实验结果，而利用体外培养细胞进
核酸纯化仪简介/核酸纯化仪
Nucleic Acid Extraction System是使用通用磁珠法提取核酸的高科技产品，具有自动化程度高，提取速度快，结果稳定，操作简便的优点。利用一般生化专用的96孔反应盘，可同时操作1-32个样品，可广泛应用于常规科研、基因组学、疾控系统、食品安全、法医等领域。使用本仪器只需加入样品与
下游消费减弱－PTA趋势性上涨机会不大
10月以来，PTA期货价格相对其他商品表现稍强，尤其是10月底甲醇、PP等化工品再创年内新低时，PTA却明显抗跌。究其原因，笔者认为，市场库存压力不大，供给偏紧对PTA价格形成了明显支撑。但是下游聚酯行业压力较大，产业链矛盾难以化解，预期PTA价格上行空间有限，PTA1601合约在4800元/吨
下游需求萎缩－煤化工板块中期业绩欠佳
数据显示，截至7月6日，有12家煤化工行业公司发布中期业绩预告，除1家不确定外，业绩预喜的公司仅有5家（包括续盈），占比41%。下游需求萎缩，产品价格下降，导致煤化工行业表现不佳。 多因素挤压利润空间 宏观经济增速放缓、下游需求不足、煤化工主要产品市场持续低迷以及原油价格走跌等因素压制煤化工
己二酸市场平稳运行－下游需求缓慢
5月13日AA偏强震荡，但下游需求缓慢，采购积极性较低，截止到目前为止，华东地区海力货源商谈在10,500-10,700元/吨，新疆货源稀缺，辽化货源主流商谈在11,800-12,000元/吨。华南地区海力货源商谈在10,600-10,800元/吨附近，新疆地区货源在10,800-11,000元
下游需求低迷－国内甲醇市场小幅收跌
国内盘面:郑州甲醇MA1605合约收跌,当日最高报价1720元/吨,最低报价1706元/吨,收盘报于1710元/吨,较上一交易日跌0.23%,持仓减少24320手,成交量950388手。 消息方面:1、12月25日,四川玖源甲醇暂不报价,50万吨/年天然气装置停车,开车时间暂未确定。2、12
武汉推动疫病检测向下游延伸（图）
近日，武汉市动物疫病预防控制中心与检测行业技术专家召开了技术交流会，会上就兽医实验室ELISA检测数据的分析与应用等方面进行了交流探讨。这次交流会对武汉市推动疫病检测向下游服务延伸具有积极作用。 技术专家就国内兽医实验室ELISA检测应用情况做了汇报，通过猪蓝耳病、伪狂犬病等血清学检测数据分析
上游引物和下游引物有什么区别
简单的说上游引物就是和要扩增基因片断上游序列结合的引物,下游引物指与目的基因片断下游序列结合者.上游引物：DNA分子两端不一样，因为核苷酸分子不是对称的，5'位有个磷酸，3'位是-OH 就是：磷酸端和羟基端。DNA复制总是从5’端到3’端，因为DNA聚合酶只能往3’端加核苷酸。下游引
抗体纯化
Antibody PurificatioinPurification of IgG Using Protein A- or Protein G-Agarose (KPL) Purifying Antibodies (Perkin-Elmer)Precipitation MethodsProtein
纯化DNA实验_纯化质粒（碱裂解法）
实验材料大肠杆菌试剂、试剂盒LB葡萄糖缓冲液乙酸钾仪器、耗材离心管实验步骤1. 单个大肠杆菌克隆接种到 2 ml 含适当抗生素的 LB 中。37℃ 剧烈振荡孵育 5~8 小时。或者可以培养过夜使饱和。2. 倒 1.5 ml 培养液到已作标记的微量离心管中。把剩下的培养液存放在 4℃。3. 在微量离心