紫外吸收法测蛋白质含量

蛋白质分子中,酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,使蛋白质具有吸收紫外光的性质。吸收高峰在280nm 处,其吸光度(即光密度值)与蛋白质含量成正比。此外,蛋白质溶液在238nm的光吸收值与肽键含量成正比。利用一定波长下,蛋白质溶液的光吸收值与蛋白质浓度的正比关系,可以进行蛋白质含量的测定。紫外吸收法简便、灵敏、快速,不消耗样品,测定后仍能回收使用。低浓度的盐,例如生化制备中常用的(NH4)2SO4等和大多数缓冲液不干扰测定。特别适用于柱层析洗脱液的快速连续检测,因为此时只需测定蛋白质浓度的变化,而不需知道其绝对值。此法的特点是测定蛋白质含量的准确度较差,干扰物质多,在用标准曲线法测定蛋白质含量时,对那些与标准蛋白质中酪氨酸和色氨酸含量差异大的蛋白质,有一定的误差。故该法适于用测定与标准蛋白质氨基酸组成相似的蛋白质。若样品中含有嘌呤、嘧啶及核酸等吸收紫外光的物质,会出现较大的干扰。核酸的干扰可以通过查校正表,再进行......阅读全文

紫外可见吸收光谱法

分子的紫外-可见吸收光谱法是基于分子内电子跃迁产生的吸收光谱进行分析的一种常用的光谱分析法。分子在紫外-可见区的吸收与其电子结构紧密相关。紫外光谱的研究对象大多是具有共轭双键结构的分子。胆甾酮(a)与异亚丙基丙酮(b)分子结构差异很大,但两者具有相似的紫外吸收峰。两分子中相同的O=C-C=C共轭结构

紫外吸收法UVCOD在线分析仪

紫外吸收法UVCOD在线分析仪在市政污水厂进口的应用应用情况主要仪器:sc200控制器、UVAS plus sc、浸入式安装支架等,传感器安装示意图(如图1所示)。图1 UVAS plus sc安装示意图在该污水处理厂中,进出口均安装铬法COD分析仪,铬法COD分析仪反应时间长,在正常测量情况下需要

紫外吸收法测蛋白质含量

蛋白质分子中,酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,使蛋白质具有吸收紫外光的性质。吸收高峰在280nm 处,其吸光度(即光密度值)与蛋白质含量成正比。此外,蛋白质溶液在238nm的光吸收值与肽键含量成正比。利用一定波长下,蛋白质溶液的光吸收值与蛋白质浓度的正比关系,可以进行蛋白质含量的

紫外吸收光谱法鉴别布洛芬

1.绘制紫外吸收光谱称取25mg布洛芬片剂溶于100ml 0.4%的氢氧化钠溶液中,其浓度为0.25mg/ml,振摇,使溶解,放置20min后,在紫外-可见分光光度计上,以0.4%氢氧化钠溶液为参比溶液,用1cm吸收池,从220nm开始,每次增加5nm,依次测定其吸光度,测定至300nm。利用上述在

紫外可见吸收光谱法的特点

1、紫外可见吸收光谱所对应的电磁波长较短,能量大,它反映了分子中价电子能级跃迁情况。主要应用于共轭体系(共轭烯烃和不饱和羰基化合物)及芳香族化合物的分析。2、由于电子能级改变的同时,往往伴随有振动能级的跃迁,所以电子光谱图比较简单,但峰形较宽。一般来说,利用紫外吸收光谱进行定性分析信号较少。3、紫外

蛋白质定量检测方法——紫外吸收法

大多数蛋白质在280nm波长处有特征的最大吸收,这是由于蛋白质中有酪氨酸,色氨酸和苯丙氨酸存在,可用于测定0.1~0.5mg/mL含量的蛋白质溶液。取9支试管分别标号,前8支试管分别加入不同浓度的标准蛋白溶液,1号试管不加标准蛋白溶液,最后一支试管加待测蛋白质溶液,而不加标准蛋白溶液,每支试管液体总

测量蛋白质的方法紫外吸收法

蛋白质及其降解产物的芳香环残疾,在紫外区内对一定波长的光具有选择性吸收作用。在次波长下(280nm),光吸收程度与蛋白质浓度成直线关系,因此,通过测定蛋白质溶液的吸光度,并参照事先用凯氏定氮法测定蛋白质含量的标准样所做的标准曲线,即可求出样品蛋白质含量。考马斯亮蓝G-250是一种蛋白质染料,与蛋白质

紫外可见吸收光谱法的特点

1、紫外可见吸收光谱所对应的电磁波长较短,能量大,它反映了分子中价电子能级跃迁情况。主要应用于共轭体系(共轭烯烃和不饱和羰基化合物)及芳香族化合物的分析。2、由于电子能级改变的同时,往往伴随有振动能级的跃迁,所以电子光谱图比较简单,但峰形较宽。一般来说,利用紫外吸收光谱进行定性分析信号较少。3、紫外

紫外可见吸收光谱法的应用

利用紫外光谱可以推导有机化合物的分子骨架中是否含有共轭结构体系,如C=C-C=C、C=C-C=O、苯环等。利用紫外光谱鉴定有机化合物远不如利用红外光谱有效,因为很多化合物在紫外没有吸收或者只有微弱的吸收,并且紫外光谱一般比较简单,特征性不强。利用紫外光谱可以用来检验一些具有大的共轭体系或发色官能团的

紫外可见分子吸收光度法原理

紫外—可见分光光度法是利用某些物质分子能够吸收200 ~ 800 nm光谱区的辐射来进行分析测定的方法。这种分子吸收光谱源于价电子或分子轨道上电子的电子能级间跃迁,广泛用于无机和有机物质的定量测定,辅助定性分析(如配合IR)。在分子中,除了电子相对于原子核的运动外,还有核间相对位移引起的振动和转动。

GB原子吸收法或紫外分光光度法

(一)紫外-可见分光光度法ultravioletvisible absorption spectroscopy根据被测量物质分子对紫外-可见波段范围(150~800纳米)单色辐射的吸收或反射强度来进行物质的定性、定量或结构分析的一种方法.分光光度测量是关于物质分子对不同波长和特定波长处的辐射吸收程度

紫外可见吸收光谱法的仪器组成

紫外可见吸收光谱仪由光源、单色器、吸收池、检测器以及数据处理及记录(计算机)等部分组成普通紫外可见光谱仪,主要由光源、单色器、样品池(吸光池)、检测器、记录装置组成.为得到全波长范围(200~800-nm)的光,使用分立的双光源,其中氘灯的波长为185~395 nm,钨灯的为350~800nm.绝大

紫外可见吸收光谱法的仪器组成

紫外可见吸收光谱仪由光源、单色器、吸收池、检测器以及数据处理及记录(计算机)等部分组成普通紫外可见光谱仪,主要由光源、单色器、样品池(吸光池)、检测器、记录装置组成.为得到全波长范围(200~800-nm)的光,使用分立的双光源,其中氘灯的波长为185~395 nm,钨灯的为350~800nm.绝大

紫外可见吸收光谱法的仪器组成

紫外可见吸收光谱仪由光源、单色器、吸收池、检测器以及数据处理及记录(计算机)等部分组成普通紫外可见光谱仪,主要由光源、单色器、样品池(吸光池)、检测器、记录装置组成.为得到全波长范围(200~800-nm)的光,使用分立的双光源,其中氘灯的波长为185~395 nm,钨灯的为350~800nm.绝大

紫外可见吸收光谱法的仪器组成

紫外可见吸收光谱仪由光源、单色器、吸收池、检测器以及数据处理及记录(计算机)等部分组成普通紫外可见光谱仪,主要由光源、单色器、样品池(吸光池)、检测器、记录装置组成.为得到全波长范围(200~800-nm)的光,使用分立的双光源,其中氘灯的波长为185~395 nm,钨灯的为350~800nm.绝大

紫外可见吸收光谱法的仪器组成

紫外可见吸收光谱仪由光源、单色器、吸收池、检测器以及数据处理及记录(计算机)等部分组成普通紫外可见光谱仪,主要由光源、单色器、样品池(吸光池)、检测器、记录装置组成.为得到全波长范围(200~800-nm)的光,使用分立的双光源,其中氘灯的波长为185~395 nm,钨灯的为350~800nm.绝大

紫外可见吸收光谱法的工作原理

紫外-可见吸收光谱的产生及基本原理2.1 物质对光的选择性吸收分子的紫外-可见吸收光谱是基于分子内电子跃迁产生的吸收光谱进行分析的一种常用的光谱分析方法。当某种物质受到光的照射时,物质分子就会与光发生碰撞,其结果是光子的能量传递到了分子上。这样,处于稳定状态的基态分子就会跃迁到不稳定的高能态,即激发

紫外线吸收法检测臭氧浓度的原理

原理为臭氧对波长 λ=254nm紫外光具有最大吸收稀疏,在此波长下紫外光通过臭氧层会产生衰减,符合兰波特-比尔(Lambert--Beer)定律: I=Ioe-klc :Io-无臭氧存在时入射光强度;I-光束穿透臭氧后的光强度;L-臭氧样品池光程长度;C-臭氧浓度;K-臭氧对光波长吸收系数。根据该公

红外吸收光谱法和紫外可见分子吸收光谱法的区别

1、吸收的波长不一样。红外吸收光谱法中,样品吸收的是红外波段的电磁辐射;紫外可见光谱法中,样品吸收的是紫外-可见波段的电磁辐射。2、仪器原理有区别。红外光谱法应用的是傅立叶变换红外光谱,红外光经过迈克尔逊干涉仪发生干涉后照射样品,采集到样品的干涉图再经过傅立叶变换得到样品的光谱; 而紫外-可见吸收光

红外吸收光谱法和紫外可见分子吸收光谱法的区别

1、吸收的波长不一样。红外吸收光谱法中,样品吸收的是红外波段的电磁辐射;紫外可见光谱法中,样品吸收的是紫外-可见波段的电磁辐射。2、仪器原理有区别。红外光谱法应用的是傅立叶变换红外光谱,红外光经过迈克尔逊干涉仪发生干涉后照射样品,采集到样品的干涉图再经过傅立叶变换得到样品的光谱; 而紫外-可见吸收光

紫外吸收法COD在环境监测中的应用

  摘要:紫外吸收法COD在环境监测中的应用其实就是利用紫外线对有机物质的强吸收性能,从而起到不间断测定水质中有机污染物浓度的作用。通过对紫外吸收法COD在环境监测中的现状进行阐述,分析紫外吸收法COD监测的技术方法与测量原理,探讨水质浑浊度、水质温度及水质pH酸碱度对紫外吸收法COD测量值的影响,

紫外吸收法对溶液的pH和盐浓度敏感

  在研究物质吸光度时,我们总要明确地定义缓冲液的离子强度以及pH,这就说明,吸光度本身是受到这两个因素影响的。  通常而言,偏酸的溶液,容易给出偏低的A260/A280数值。相反,偏碱的溶液则容易高估。相应地,也有报道称,当用水作为溶剂时,紫外吸收测定的数值变异度增大,而当使用Tris或Tris-

紫外吸收中末端吸收的定义

末端吸收是指在紫外光谱中,吸收曲线的最短波长处只呈现强吸收而不是峰形的部分。在日常的紫外检测中,靠近200nm处的吸收光谱线会出现向上飘移的现象,这实际上是由于一些紫外吸收峰出现在200nm以下,在检测范围内(190-200nm)只能看到这些吸收峰靠近长波方向的末端部分。这一现象产生的原因在于,紫外

紫外可见吸收光谱法的基本原理

紫外可见吸收光谱的基本原理是利用在光的照射下待测样品内部的电子跃迁,电子跃迁类型有:(1)σ→σ* 跃迁 指处于成键轨道上的σ电子吸收光子后被激发跃迁到σ*反键轨道(2)n→σ* 跃迁 指分子中处于非键轨道上的n电子吸收能量后向σ*反键轨道的跃迁(3)π→π* 跃迁 指不饱和键中的π电子吸收光波能量

紫外可见吸收光谱法的基本原理

紫外可见吸收光谱的基本原理是利用在光的照射下待测样品内部的电子跃迁,电子跃迁类型有:(1)σ→σ* 跃迁 指处于成键轨道上的σ电子吸收光子后被激发跃迁到σ*反键轨道(2)n→σ* 跃迁 指分子中处于非键轨道上的n电子吸收能量后向σ*反键轨道的跃迁(3)π→π* 跃迁 指不饱和键中的π电子吸收光波能量

紫外可见吸收光谱法的基本原理

紫外可见吸收光谱的基本原理是利用在光的照射下待测样品内部的电子跃迁,电子跃迁类型有:(1)σ→σ* 跃迁 指处于成键轨道上的σ电子吸收光子后被激发跃迁到σ*反键轨道(2)n→σ* 跃迁 指分子中处于非键轨道上的n电子吸收能量后向σ*反键轨道的跃迁(3)π→π* 跃迁 指不饱和键中的π电子吸收光波能量

测定什么时分别用红外光谱法,原子吸收法,紫外光谱法

分析被测样品前可以查查相应的国标,一般都有好几种方法,看看你用什么方法方便。红外化验的对象固体液体气体状态分子纯净物,由于每一种物质都有红外特征吸收峰,所以主要用于物质的定性分析。 应用领域主要有机化学,无机化学,高分子化学、石油化工、材料学、生物学、医药学、物理、环境科技、海关、商检、国防

测定什么时分别用红外光谱法,原子吸收法,紫外光谱法

分析被测样品前可以查查相应的国标,一般都有好几种方法,看看你用什么方法方便。红外化验的对象固体液体气体状态分子纯净物,由于每一种物质都有红外特征吸收峰,所以主要用于物质的定性分析。 应用领域主要有机化学,无机化学,高分子化学、石油化工、材料学、生物学、医药学、物理、环境科技、海关、商检、国防

化学发光法跟紫外差分吸收光谱法有什么不同

化学发光现象是一种常见]的自然现象,利用化学发光测定化学发光反应反应物、催化剂、增敏剂、抑制剂,偶合反应中的反应物、催化剂、增敏剂的方法叫做化学发光法。 烟道污染源排放的在线连续监测是解决固定污染源治理问题的有效途径。本研究将紫外差分吸收光谱(DOAS)技术引入烟道污染气体的测量和分析中,解决了工业

布洛芬片的紫外吸收光谱法及红吸光谱法鉴别

一、紫外吸收光谱法鉴别1.绘制紫外吸收光谱称取25mg布洛芬片剂溶于100ml 0.4%的氢氧化钠溶液中,其浓度为0.25mg/ml,振摇,使溶解,放置20min后,在紫外-可见分光光度计上,以0.4%氢氧化钠溶液为参比溶液,用1cm吸收池,从220nm开始,每次增加5nm,依次测定其吸光度,测定至