多肽融合标签的移除策略

谢浩 杨程 陈丽娥(武汉理工大学生物科学与技术系,武汉430070)摘要:多肽融合标签能够赋予目标蛋白新的特性,便于目标蛋白的定位、追踪、纯化以及结构和相互作用研究.但在很多情况下,尤其是研究蛋白质结构或分离纯化药用蛋白时,需要将多肽融合标签从融合蛋白上切除,以降低和消除多肽融合标签对目标蛋白结构和功能的影响.可用来切除多肽融合标签的方法主要有4 种,即化学法、内切蛋白酶法、外切蛋白酶法以及自我剪切法.介绍和比较了每种方法的基本原理、应用以及研究进展.关键词融合蛋白,多肽融合标签,标签移除,内含肽,蛋白酶融合标签技术是利用DNA 重组技术将不同来源的基因或基因片段进行拼接,在基因水平上改造目标蛋白,产生含有融合标签的重组蛋白,不仅保持原有蛋白质的功能活性,还具有融合标签所特有的生理生化特性.随着蛋白质组学的发展及药用蛋白的研究开发,融合标签技术被广泛地应用于科研及工业领域,尤其在蛋白质分离纯化、膜蛋白结构研究、蛋白质生理......阅读全文

多肽类广谱冠状病毒融合抑制剂EK1C4有望防控疫情

  复旦大学教授陆路、姜世勃和中科院生物物理所研究员朱赟及武汉病毒所研究员石正丽合作,发现新冠病毒与SARS病毒相比具有超强的膜融合能力,多肽类广谱冠状病毒融合抑制剂EK1C4有望能开发成药,用于预防和治疗当前正在流行的新冠肺炎和将来新发与再现的类SARS冠状病毒感染。相关成果于3月30日发表于《细

柴油发电机组的安装、移除及运输

柴油发电机组的安装、移除及运输的安全注意事项如下:  1、连接电线必须依照相关的标准、规范及其他要求,包括接地要求及漏电故障保护。  2、分体油箱及燃油系统的安装,必须符合相关的规范、标准及其他要求。  3、柴油机排放出的废气对人体有害。所有安装在户内的发电机必须符合标准之密封管将废气排出户外。确保

Nat-Commun:移除颈动脉小球可有效治疗高血压

布里斯托大学的研究者通过研究表示,通过移除机体中最小的器官就可以治疗高血压。(Credit: © Superingo / Fotolia)   近日,刊登在国际著名杂志Nature Communications上的一篇研究论文中,来自布里斯托大学的研究者通过研究表示,通过移除机体中最小的器官就

不依赖“碳移除”-为地球降温寻找“更优解”

  3月13日从天津大学获悉,该校环境科学与工程学院副教授金超团队联合多家国内外知名研究机构,提出一种最大限度减少碳移除依赖的地球降温发展路径。该研究成果发表在环境领域国际期刊《环境科学与技术》上,并入选当期封面文章。  二氧化碳的大量排放是引发地球升温重要因素之一。科学家们一再警告,1.5摄氏度被

研究发现移除生物钟基因提升小鼠抗菌力

  英国一个研究团队在新一期美国《国家科学院学报》上发表论文介绍,他们移除实验鼠体内一个与生物钟调控相关的关键基因后,其体内具有噬菌作用的巨噬细胞变强,提升了小鼠抵抗细菌性肺炎的能力。  生物钟是大多数生物体内的一种生理机制,调节生命活动,例如人们有昼夜节律的睡眠、不同时间段的饮食行为都是出于生物钟

EMBO-Rep:移除特殊基因有望帮助人类攻克肥胖

  未来研究人员可能会开发出一种新方法,让你想吃多少就能吃多少而且还不会增加体重,这听起来似乎难以置信;当名为RCAN1的单一基因从小鼠机体中移除后,再给予小鼠喂食高脂肪饮食,结果发现小鼠的体重并不会增加,即使是长时间摄入高脂肪饮食后。研究人员希望能够找到类似的方法,通过抑制该基因的表达帮助人类有效

细胞融合的融合过程简述

细胞膜有内外两层,细胞融合首先发生在外层,然后再到内层,由此就出现了两种融合通道,细胞体内物质通过这两种通道转移。病毒膜与目标细胞融合时,只出现一种融合通道,即导致融合的基因只能在病毒中找到,而在目标细胞中却找不到。但是,通过EFF-1发生的细胞融合则是一个双向融合过程,需要EFF-1出现在两个相互

细胞融合技术电融合法

在直流电脉冲的诱导下,细胞膜表面的氧化还原电位发生改变,使异种细胞粘合并发生质膜瞬间破裂,进而质膜开始连接,直到闭和成完整的膜,形成融合体。优点:融合率高、重复性强、对细胞伤害小;装置精巧、方法简单、可在显微镜下观察或录像观察融合过程;免去PEG诱导后的洗涤过程、诱导过程可控性强。

细胞融合技术电融合法

在直流电脉冲的诱导下,细胞膜表面的氧化还原电位发生改变,使异种细胞粘合并发生质膜瞬间破裂,进而质膜开始连接,直到闭和成完整的膜,形成融合体。优点:融合率高、重复性强、对细胞伤害小;装置精巧、方法简单、可在显微镜下观察或录像观察融合过程;免去PEG诱导后的洗涤过程、诱导过程可控性强。

什么叫融合基因-融合基因介绍

1、所谓融合基因,是指将两个或多个基因的编码区首尾相连。置于同一套调控序列控制之下,构成的嵌合基因。融合基因的表达产物为融合蛋白。根据构成融合基因的种类,可以将融合基因分为...1、所谓融合基因,是指将两个或多个基因的编码区首尾相连。置于同一套调控序列控制之下,构成的嵌合基因。融合基因的表达产物为融

细胞融合的融合过程介绍

细胞膜有内外两层,细胞融合首先发生在外层,然后再到内层,由此就出现了两种融合通道,细胞体内物质通过这两种通道转移。病毒膜与目标细胞融合时,只出现一种融合通道,即导致融合的基因只能在病毒中找到,而在目标细胞中却找不到。但是,通过EFF-1发生的细胞融合则是一个双向融合过程,需要EFF-1出现在两个相互

GST标签抗体GST标签与IFIP等多种应用

近年来在原核表达体系中,谷胱甘肽S转移酶GST表达纯化系统的应用更为普遍,它的来源是日本血吸虫的25kDa大小的GST蛋白。GST标签系统具有蛋白表达产率高、表达产物纯化方便,以及利于GST抗体制备等特点和优势。GST融合蛋白在水溶液中可溶,可从细菌裂解液中提取,在不变性的条件下通过亲和层析得到。G

抗原多肽设计

为了使产生的抗体获得最佳效果,仔细地设计抗原多肽是很有必要的,设计应满足一个基本条件:在免疫过程中,该抗原既不会产生过强的免疫反应,同时又能产生出对感兴趣的蛋白有结合能力的抗体。抗原设计是一个很复杂的课题,有诸多需要注意的细节。根据我们所积累的经验,有几点关键的基本设计原则可供大家参考:确定抗体的用

多肽小常识

保存:  大多肽在-20℃很稳定,特别是冷冻干燥并保存在干燥器中,在将它们暴露于空气之前, 冷冻干燥多肽可以放于室温。这将是湿度影响减少,当无法冷冻干燥时,最好的方法是以小的工作样量存放。   对于含Cys, Met orTrP的多肽,脱氧缓冲剂对其溶解必不可少,因为这种多肽可易空气氧化, 在封瓶前

多肽的特点

  传统获得肽的方法有很多。传统法主要有:酸法、碱法、电法、人工嫁接法、基因表达法等。但在工艺技术方面,这些合成工艺方法的局限性,是导致其这些合成方法没有产品的原因。  而酶法在传统法的基础上有所突破和创新,适应了低碳经济和绿色环保的要求。酶法就是用生物酶催化蛋白质获得多肽,就是蛋白质降解,人工合成

多肽合成仪

美国洛克菲勒大学教授Bruce Merrifield 在1963年发明的多肽固相合成技术(SPPS)是多肽合成领域的一个重大突破,对化学,生化,医药,免疫和基因科学等学科和领域都起了巨大的推动作用。 他本人也因此项发明荣获1984化学诺贝尔奖。

多肽质谱仪类型

多肽质谱仪类型有多种。1、按分析目的可分:实验室多肽质谱仪和工业多肽质谱仪。2、按质量分析器的工作状态可分:静态多肽质谱仪和动态多肽质谱仪。3、按分析规模可分:小型多肽质谱仪和大型多肽质谱仪。4、按联用方式可分:多肽液相色谱质谱联用仪、多肽毛细管电泳质谱联用仪和多肽串联质谱仪等。5、按质量分析器的工

多肽是什么

多肽是α-氨基酸以肽键连接在一起而形成的化合物,是蛋白质水解的中间产物。由两个氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫做二肽,同理类推还有三肽、四肽、五肽等。通常由10~100个氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫多肽。它们的分子量低于10000Da(Dalton,道尔顿),能透过半透膜,不被三氯乙酸及硫酸铵所

多肽合成历史

多肽合成概述: 1963年,R.B.Merrifield[1]创立了将氨基酸的C末端固定在不溶性树脂上,然后在此树脂上依次缩合氨基酸,延长肽链、合成蛋白质的固相合成法,在固相法中,每步反应后只需简单地洗涤树脂,便可达到纯化目的.克服了经典液相合成法中的每一步产物都需纯化的困难,为自动化合成肽奠定了基

多肽合成步骤

 1、树脂的选择及氨基酸的固定   用于多肽合成的高分子的载体主要有3类:交联聚苯乙烯;聚酰胺;聚乙烯乙二醇脂类树脂。氨基酸的固定主要是通过保护的氨基酸的羧基同树脂的反应基团之间形成共价键来实现。   2、氨基、羧基、侧链的保护及脱除   要成功合成具有特定的氨基酸顺序的多肽,需要对暂不参与形成酰胺

什么是多肽?

多肽:由多个a-氨基酸分子缩合消去水分子而形成含有多个肽键,天然产物中得到一种有机物。

多肽合成仪

多肽合成仪,是以固相合成为原理合成多肽粗品的仪器。整体由主体、传输设备、动力装置以及软件系统组成。以固相合成为反应原理,在密闭的防爆玻璃反应器中使氨基酸按照已知顺序不断添加、反应、合成,操作最终得到多肽载体。

多肽小常识

多肽的基本常识保存:  大多肽在-20℃很稳定,特别是冷冻干燥并保存在干燥器中,在将它们暴露于空气之前, 冷冻干燥多肽可以放于室温。这将是湿度影响减少,当无法冷冻干燥时,最好的方法是以小的工作样量存放。   对于含Cys, Met orTrP的多肽,脱氧缓冲剂对其溶解必不可少,因为这种多肽可易空气氧

多肽的简介

  肽(peptide)是α-氨基酸以肽键连接在一起而形成的化合物,它也是蛋白质水解的中间产物。  一般肽中含有的氨基酸的数目为二到九,根据肽中氨基酸的数量的不同,肽有多种不同的称呼:由两个氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫做二肽,同理类推还有三肽、四肽、五肽等,一直到九肽。通常由10~100个氨基酸

溶解多肽的方法及多肽应用的注意点

多肽的溶解度取决元计算的物理特性。氨基酸可分类为酸性,碱性,极性,非极性,疏水性。多肽有高含量的非极性疏水性氨基酸或极性不带电荷的氨基酸。建议溶解在有机溶液中(例如:DMF,甲醇,丙醇,异丙醇,DMSO)。总之,酸性多肽一般溶解于碱性溶液中,而碱性多肽溶解在酸性溶液中。氨基酸的属性碱性:Arg,Hi

化学试剂标签

  化学试剂的质量指标决定了化学试剂的可适用范围,因此笔者建议,应该公布批准一个“化学试剂标签”的国家标准,在标准中给出一个化学试剂规范的质量指标描述系统将对化学试剂的规范生产、合理使用具有十分重要的意义。  《化学试剂标签》承载信息:  注册商标:明确标示生产厂商注册的商标。  质量标准:质量标准

定制标签打印软件

       定制标签打印软件产品介绍条码技术做为一种信息载体,它的出现在很大程度提高了生产效率,同时也减轻了工人的负担,提高了生产效率。在实际生产中,标签的打印在各行各业的应用都十分广泛。每家企业所需要打印的标签也是多种多样的。例如在产品装箱或者进行称重检测、功能检测后,需要打印一张OK或NG标签

我国学者发现过度依赖碳移除会带来潜在风险

原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2024/3/519069.shtm

氢氧化镁将从危化品目录移除

  11月3日结束的全国镁化合物行业会议传出消息,通过企业和中国无机盐工业协会镁化合物分会多次呼吁,国家安监总局将氢氧化镁产品从危化品目录中剔除。氢氧化镁碱性并不强,人体接触没有腐蚀性,也没有其他有毒有害隐患。在10月底结束公示的危化品目录中,氢氧化镁产品已经从目录中移除。

原生质体融合的融合过程介绍

将植物细胞A与植物细胞B用纤维素酶和果胶酶处理,得到不含细胞壁的原生质体A和原生质体B,运用物理方法或是化学方法诱导融合,形成杂种细胞,再利用植物细胞培养技术将杂种细胞培养成杂种植物体。①杂交时间:植物细胞杂交是从细胞融合开始,到培育成的新植物体结束。a.原生质体制备:用酶解法去除细胞壁(纤维素酶和