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多肽融合标签的移除策略

谢浩 杨程 陈丽娥(武汉理工大学生物科学与技术系,武汉430070)摘要:多肽融合标签能够赋予目标蛋白新的特性,便于目标蛋白的定位、追踪、纯化以及结构和相互作用研究.但在很多情况下,尤其是研究蛋白质结构或分离纯化药用蛋白时,需要将多肽融合标签从融合蛋白上切除,以降低和消除多肽融合标签对目标蛋白结构和功能的影响.可用来切除多肽融合标签的方法主要有4 种,即化学法、内切蛋白酶法、外切蛋白酶法以及自我剪切法.介绍和比较了每种方法的基本原理、应用以及研究进展.关键词融合蛋白,多肽融合标签,标签移除,内含肽,蛋白酶融合标签技术是利用DNA 重组技术将不同来源的基因或基因片段进行拼接,在基因水平上改造目标蛋白,产生含有融合标签的重组蛋白,不仅保持原有蛋白质的功能活性,还具有融合标签所特有的生理生化特性.随着蛋白质组学的发展及药用蛋白的研究开发,融合标签技术被广泛地应用于科研及工业领域,尤其在蛋白质分离纯化、膜蛋白结构研究、蛋白质生理......阅读全文

多肽融合标签的移除策略

谢浩 杨程 陈丽娥(武汉理工大学生物科学与技术系,武汉430070)摘要:多肽融合标签能够赋予目标蛋白新的特性,便于目标蛋白的定位、追踪、纯化以及结构和相互作用研究.但在很多情况下,尤其是研究蛋白质结构或分离纯化药用蛋白时,需要将多肽融合标签从融合蛋白上切除,以降低和消除多肽融合标签对目标蛋白结构和

自知“天然”不靠谱 美食品公司移除“天然”标签

  据美国媒体报道,不少消费者购买食物时,喜欢选购标注有“天然”(natural)标签的产品,但因所谓的“天然”产品并无明确定义,消费者针对这一标注的诉讼逐渐增多,美国越来越多的食品和饮料公司悄悄移除旗下产品的“天然”标签。   根据统计数据显示,过去一年,有“天然”标签的食品在美国的零售销售超过

BIORAD 采用 Profinity eXactTM融合标签表达系统纯化无标签...

BIORAD 采用 Profinity eXactTM融合标签表达系统纯化无标签的重组蛋白亲和标签已成为后基因组学时代纯化重组蛋白常用手段。此方法无需了解蛋白质的生化特性或生理活性,就可通过带标签的重组融合蛋白选择性地与层析基质上的配体结合,从而得以纯化任何蛋白质。此方法与常规的层析方法不同之处在于

Myc标签融合蛋白-检测,封闭应用数据

Myc 标签融合蛋白 - 检测,封闭Myc Tag来源于c-myc基因表达产物,其序列为EQKLISEEDL。以高亲和力闻名的Myc Tag的单克隆抗体(克隆号2D5),可以检测天然和变性的Myc融 合蛋白,被广泛用于WB、IF、IP实验。在天然洗脱条件下,使用Myc标签多 肽来与重组蛋白进

VSV-G标签融合蛋白-检测,封闭实验手册

VSV-G,来源于水泡性口炎病毒的融合性外壳G糖蛋白,常被用于逆转录病毒和慢病毒载体的生物医学研究。VSV-G标签通常融合于目的蛋白的N-或者C-端,以便使用免疫组化方法来进行观察和分析。Fig.1.Immunofluorescence staining (1:1,000) of VSV-G fus

多功能融合标签——多聚精氨酸(R9)

将重组蛋白与阳离子多肽(如九聚精氨酸, R9)融合是一种将重组蛋白转入哺乳动物细胞内的方法。许多阳离子多肽具有穿透细胞的能力,这些多肽可以作为蛋白转导结构用于转运小分子药和大分子(如蛋白质)。尽管转运的具体机制还不是特别清楚,但是这些多肽自身携带的大量正电荷对穿透功能是至关重要的。可能是通过

BIORAD 采用 Profinity eXactTM融合标签表达系统纯化 重组蛋白

  BIORAD 采用 Profinity eXactTM融合标签表达系统纯化无标签的重组蛋白   亲和标签已成为后基因组学时代纯化重组蛋白常用手段。此方法无需了解蛋白质的生化特性或生理活性,就可通过带标签的重组融合蛋白选择性地与层析基质上的配体结合,从而得以纯化任何蛋白质。此方法与常规的层析方

标签酶消化释放标签实验

试剂、试剂盒 溶液与缓冲液LoTE 仪器、耗材 Eppendorf 试管 实验步骤 实验方案 A 1.向含有 Dynabeads 的每个试管中加入下列物质: 2.65℃ 下酶解 Ih(每 IOmin 混合 1 次)。 3.时收集上清液(含有释放的 cDNA

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试剂、试剂盒 溶液与缓冲液LoTE 仪器、耗材 Eppendorf 试管 实验步骤 实验方案 A 1.向含有 Dynabeads 的每个试管中加入下列物质: 2.65℃ 下酶解 Ih(每 IOmin 混合 1 次)。 3.时收集上清液(含有释放的 cDNA 标签)

标签酶消化释放标签实验

            试剂、试剂盒 溶液与缓冲液 LoTE 仪器、耗材 Eppendorf 试管 实