发根农杆菌诱根现象观察
一、原理发根农杆菌是一种寄主范围非常广泛的土壤细菌，可以侵染几乎所有的双子叶植物和少数单子叶植物。植物伤口感染发根农杆菌后，一到数周出现毛状根。毛状根没有向地性，除菌后在无激素培养基上可迅速生长并产生许多分枝。通过培养可直接从毛状根上再生植株，或经愈伤组织途径分化出再生植株。发根农杆菌转化系统是实现植物基因转化的又一重要系统。二、目的观察发根农杆菌诱发植物产生毛状根的过程，掌握发根农杆菌转化植物的基本方法。三、材料和试剂1、烟草实生苗，试管苗，子叶柄，胚轴，叶片，叶柄，茎段等。2、发根农杆菌野生型菌株。3、YEB液体、固体培养基。4、MS液体、固体培养基。5、微量注射器，塑料袋，解剖刀，无菌牙签，无菌滤纸。四、操作步骤1、将发根农杆菌在YEB平板上划线培养。2、挑取单菌落接种于20ml YEB液体培养基中，20℃，200rpm条件下振荡培养，至OD600值为0.6-0.8。3、按1％量接种到新鲜的YEB或MS培养液(pH 5......阅读全文
发根农杆菌诱根现象观察
一、原理发根农杆菌是一种寄主范围非常广泛的土壤细菌，可以侵染几乎所有的双子叶植物和少数单子叶植物。植物伤口感染发根农杆菌后，一到数周出现毛状根。毛状根没有向地性，除菌后在无激素培养基上可迅速生长并产生许多分枝。通过培养可直接从毛状根上再生植株，或经愈伤组织途径分化出再生植株。发根农杆菌转化系统是实现
根癌农杆菌诱发冠瘿瘤现象观察
一、原理冠瘿瘤是根癌农杆菌感染双子叶植物后形成的一种形似帽状的瘤组织，该组织能在正常细胞不能生长的无激素培养基上无限制地生长。冠瘿瘤的形成，是由于根癌农杆菌Ti质粒上的T－DNA（可转移DNA，其中含致病和冠瘿碱合成酶等基因）整合到宿主植物细胞染色体DNA上的结果。在植物基因工程研究中，以野生型Ti
什么是发根农杆菌？
发根农杆菌是一类宿主范围广泛的G-土壤杆菌。农杆菌在侵染植物后，能够诱导植物产生大量高度分支的不定根，通常称为发根。发根农杆菌侵染植物所产生的发根具有生长速度快、分化程度高、生理生化和遗传性稳定、易于进行操作控制等特点。 土壤发根农杆菌(Ag.rhizogenes)是一种侵染性非常广泛的土壤细
关于发根农杆菌的分类介绍
根诱导质粒( root inducing plasmid, Ri质粒)是发根农杆菌( Agrobacterium rhizogenes)染色体外的遗传物质。在带有完整T-DNA的Ri质粒的转化植物细胞中都能检测到一类特殊的非蛋白态的氨基酸，这一类氨基酸被总称为冠瘿碱。在Ri质粒转化细胞中检测到的
发根农杆菌的特征有哪些？
发根农杆菌Ri质粒诱发植物细胞大量繁殖，形成发根瘤。它与根癌农杆菌Ti质粒所诱发的冠瘿瘤有相似之处，也有其独特的特征。两者相似于： （1）根癌农杆菌的大质粒Ti质粒是诱发冠瘿瘤所必须的，发根农杆菌的大质粒Ri质粒是诱发发根瘤所不可缺少的，两种瘤都是由大质粒所引起的； （2）发根农杆菌所感染的
发根农杆菌用于生产次生代谢产物
利用植物细胞培养技术生产次生代谢物真正实现商品化生产的还为数甚少，其主要原因在于植物细胞生长缓慢，有些还需要激素维持，次生代谢物含量太低，以及生产能力不稳定等，因而工业化生产的成本太高。发根能合成植物特征的次生代谢产物，而且其含量往往比植物的含量还高，尤其是它的稳定性和生长迅速的特点是工业化生产
发根农杆菌能促使植物生根等重要作用
促使植物生根 Ri质粒能诱导转化植物产生大量毛根，促进植物生根，已引起了人们的高度重视，被人们广泛使用。1985年它被应用于苹果与扁桃的插条以改善生根状况，从而有益于对干旱的抵抗。Hatta等发现发根农杆菌能诱导枣树的插条生根，Caboni等用野生发根农杆菌1855感染胡桃的微小切口，诱导出发
发根(毛壮根,hairy－root)培养
20世纪初植物细胞全能性的概念建立以来，植物组织和细胞培养的研究已取得了很大的进展，如试管苗大量繁殖技术、单倍体技术、原生质体培养、细胞杂交、体细胞变异及突变体的选择和利用等。80年代，随着基因工程的发展，其研究成果也渗透到细胞工程中来，引起了细胞培养研究的新突破。其中通过发根农杆菌（Agrobac
发根农杆菌用于获得转基因植物和培育作物新品种
对Ri质粒T-DNA进行改造，可以构建出新的具有目的基因和标记基因的Ri质粒，用改造型Ri质粒的发根农杆菌感染植物细胞，可以将目的基因导入植物组织，并可再生出转基因植物，所以发根农杆菌为遗传工程改良植物抗性和品质提供了一条十分有效的途径。1985年，Ooms等用发根农杆菌转化甘蓝型油菜的子叶，得
毛状根培养技术
毛状根(hairy roots)是发根农杆菌（Agrobacterium rhizogenes）感染双子叶植物后，其Ri质粒上的T—DNA片断整合进植物细胞核基因组中诱导产生的一种特殊表现型，近10年来已发展成一种新的培养系统。 发根农杆菌 (Agrobacterium rhizogenes)是
毛状根培养技术
毛状根(hairy roots)是发根农杆菌（Agrobacterium rhizogenes）感染双子叶植物后，其Ri质粒上的T—DNA片断整合进植物细胞核 基因组中诱导产生的一种特殊表现型，近10年来已发展成一种新的培养系统。 发根农杆菌 (Agrobacterium rhizogen
关于农杆菌的基本内容介绍
农杆菌是指生活在植物根表面依靠由根组织渗透出来的营养物质生存的一类普遍存在于土壤中的革兰氏阴性细菌。农杆菌主要有两种：根癌农杆菌和发根农杆菌。根癌农杆菌能在自然条件下趋化性地感染140多种双子叶植物或裸子植物的受伤部位，并诱导产生冠瘿瘤。引发冠瘿瘤的原因是，Ti质粒上的T-DNA上有8个左右的基
农杆菌的分类介绍
农杆菌主要有两种：根癌农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）和发根农杆菌（Agrobacterium rhizogenes）。根癌农杆菌的Ti质粒和发根农杆菌的Ri质粒上有一段T-DNA，农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后，可将T-DNA插入到植物基因组中。因此，农杆菌是一种
根癌农杆菌介导的植物转化－叶盘转化法
一、原理以根癌农杆菌介导的遗传转化是目前最有效的途径之一。根癌农杆菌对植物释放的化学物质产生趋化反应，向植物受伤组织集中。经共培养后，受伤部位的化学诱导物透过农杆菌的细胞膜使Ti质粒上的Vir基因活化。Vir基因产物使Ti质粒上的T－DNA进入植物细胞，并整合到植物核基因组中。插入在T－DNA左右边
直接导入法将中间载体质粒导入根癌农杆菌
一、原理同大肠杆菌一样，根癌农杆菌细胞在对数生长的早中期，经一定浓度的CaCl2处理后也可进入感受态。通过低温处理和37℃热击可使中间载体质粒DNA容易进入到根癌农杆菌细胞中，并在其中复制与表达。已摄入外源质粒DNA的细胞可在含有适当抗生素的培养基上生长，而不含质粒细菌则不能在上面生长，借此可分离出
自然界中的转基因现象
转基因现象在自然界广泛存在。植物界的异花授粉、天然杂交以及农杆菌天然转基因系统等等。异花授粉植物的群体是来源不同、遗传性不同的两性细胞结合而产生异质结合子所繁衍的后代。异花授粉普遍发生于高等植物所有的科。天然杂种优势的应用是把已选出的个体或系统在隔离的田间种在一起，使之相互自由进行杂交。一般应用于紫
自然界中的转基因
转基因现象在自然界广泛存在。植物界的异花授粉、天然杂交以及农杆菌天然转基因系统等等。异花授粉植物的群体是来源不同、遗传性不同的两性细胞结合而产生异质结合子所繁衍的后代。异花授粉普遍发生于高等植物所有的科。天然杂种优势的应用是把已选出的个体或系统在隔离的田间种在一起，使之相互自由进行杂交。一般应用于紫
自然界中的转基因现象
转基因现象在自然界广泛存在。植物界的异花授粉、天然杂交以及农杆菌天然转基因系统等等。异花授粉植物的群体是来源不同、遗传性不同的两性细胞结合而产生异质结合子所繁衍的后代。异花授粉普遍发生于高等植物所有的科。天然杂种优势的应用是把已选出的个体或系统在隔离的田间种在一起,使之相互自由进行杂交。一般应用于紫
厌氧菌培养方法、结核杆菌生长现象观察、抗酸染色
厌氧菌是自然界中分布广泛、性能独特的一类微生物, 专性厌氧菌因其细胞内缺乏超氧化物歧化酶、过氧化氢酶或过氧化物酶,因此无法消除机体在有氧条件下产生的有毒产物——超氧阴离子自由基，故这类微生物极易受氧毒害。专性厌氧微生物即使短暂地把它暴露于空气中,也会引起损伤致死。因此对它们进行分离、培养和研究时
三亲交配法将中间载体质粒导入根癌农杆菌
一、原理用三亲交配法将中间质粒转入农杆菌的过程需要三种细菌，即含有中质粒的大肠杆菌供体菌，含有游动质粒pRK2013的大肠杆菌“协助”菌(helper)和根癌农杆菌受体菌。当这三种菌混合时，协助质粒pRK2013游动进入大肠杆菌内，提供游动(mol)和转移(tra)功能，把供体的中间质粒转移进根癌农
农杆菌介导法简介
农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌，它能在自然条件下趋化性地感染大多数双子叶植物的受伤部位 [1] ，并诱导产生冠瘿瘤或发状根。根癌农杆菌和发根农杆菌中细胞中分别含有Ti质粒和Ri质粒，其上有一段T-DNA，农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后，可将T-DNA插入到植物基因组中。因此，农杆
转基因技术农杆菌介导转化方法的介绍
农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌，它能在自然条件下趋化性地感染大多数双子叶植物的受伤部位，并诱导产生冠瘿瘤或发状根。根癌农杆菌和发根农杆菌中细胞中分别含有Ti质粒和Ri质粒，其上有一段T-DNA，农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后，可将T-DNA插入到植物基因组中。 因此，农杆菌是一
农杆菌的转化
实验概要本实验介绍了农杆菌感受态细胞的制备及转化方法。主要试剂YEP固体培养基，含有相应抗生素的YEP培养基，0.15mM NaCl，20mM CaC12，液氮，选择平板(Rif 100ug/mL加Gm 50ug/mL加Kan 50ug/mL )主要设备培养箱，摇床，离心机，-80℃冰箱实验步骤1.
农杆菌介导法概述
农杆菌介导法起初只被用于双子叶植物中，农杆菌的介导转化在一些单子叶植物(尤其是水稻)中也得到了广泛应用。此外，生物技术学家还可以通过发根农杆菌转化，在液体培养基中培养高密度的根，作为一种在转基因植物中获得大量蛋白质的方法。 农杆菌Ti质粒的T-DNA可高效率地整合到植物受体细胞的染色体上并得到
农杆菌介导水稻转化
实验概要本实验介绍了农杆菌介导的水稻转化。主要试剂GUS染色液：100 mmol/L NaPO4 (pH7.0)；0.1% Triton X-100；10 mmol/L EDTA；0.5 mmol/L亚铁氰化钾头抱霉素，乙醇，次氯酸钠溶液主要设备高速离心机，培养箱，人工气候室实验材料水稻种子实验步骤
农杆菌介导转化拟南芥
实验概要1. 学习真核生物的转基因技术及农杆菌介导的转化原理。2. 掌握农杆菌介导转化拟南芥 的实验方法，了解拟南芥的生理特点及在基因工程实验中应用实验原理拟南芥（Arabidopsis thaliana）是一种十字花科植物，二年生草本，高7～40厘米，花期3～5月。广泛用于植物遗传学、发育生物学和
蚕豆根的结构观察实验
蚕豆（Vicia faba）属双子叶植物，它不但有顶端生长，也有加粗生长。因此，蚕豆的幼根中可以观察根的初生结构，而在老根中还可观察其次生结构。 （一）观察蚕豆根徒手切片 取已生长15—20天的蚕豆幼苗，用水将根系冲洗干净，分出主根及其各级侧根，借助放大镜仔细观察根尖的结构。由于根从
农杆菌转化法培养抗虫棉
（1）图中A为基因表达载体；农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上．根据农杆菌的这一特点，在构建基因表达载体时，如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上．（2）①过程是将基因表达载
农杆菌转化法的原理
选择一种特制的空质粒载体（如PBI121质粒载体），其上要求含有T-DNA边界序列（此处可参见词条双元表达载体系统），在序列之间含有复制原点、抗性基因、GUS报告基因、Hind Ⅲ和BamH I 等酶切位点（以上这些构成了一个T-DNA区）。先通过双酶切反应酶切空质粒载体和目的基因，再通过酶连反应连
植物基因转化方法分为这三种！
农杆菌介导基因转化： 转化原理:农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌，它能在自然条件下趋化性地感染大多数双子叶植物的受伤部位，并诱导产生冠瘿瘤或发状根。根癌农杆菌和发根农杆菌中细胞中分别含有Ti质粒和Ri质粒，其上有一段T-DNA，农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后，可将T-DNA插入到