生物素亲和素酶联免疫吸附试验(BASELISA)
生物素亲和素(又称抗生物素)系统(biotinavidin system,BAS)标记抗体的技术是20世纪70年代后期发展起来的一种新的免疫检测方法。由于亲和素与生物素间的亲和力极强,结合迅速,且极其稳定,生物素标记抗体和酶的标记率高,又不影响蛋白的活性,使BAS标记技术比常规酶联免疫、放射免疫及荧光免疫技术有着更高的灵敏度,为微量抗原、抗体的检测开辟了新的途径。目前生物素和亲和素(近年来,在BAS检测中多用链霉亲和素“streptavidin,SA”,它是链霉菌培养过程中的分泌物,完整的链霉亲和素和从卵白中提取的亲和素一样,也由4条相同的肽链组成。因链霉亲和素在检测应用中发生的非特异性结合远较亲和素低,因此日渐受重视,已有取代亲和素之势), 各种抗体或酶的标记物在国内已有商品供应,使用方便。BASELISA具有的特点: ①对于所有的抗原抗体系统,包括免疫细胞化学、ELISA、免疫印迹法等都适用,应......阅读全文
亲和层析--生物素/亲和素纯化
低耐压:生物素琼脂糖微球生物素琼脂糖凝胶是用于纯化或去除亲和素或链霉亲和素样本的产品,生物素是通过间隔臂以多种共价结合的方式固定在基材上的,最大限度避免配基脱落。 这种结合非常紧密,可以应用于不可逆结合(如:从某个样本中去除亲和素组分)高耐压:链霉亲和素 HC 琼脂糖微球 ABT Streptavi
生物素亲和素标记缺点
灵敏度生物素容易与蛋白质和核酸类等生物大分子结合,形成的生物素衍生物,不仅保持了大分子物质的原有生物活性,而且比恬度高,具多价性。此外,每个亲和素分子有四个生物素结合部位,可同时以多价形式结合生物素化的大分子衍生物和标记物。因此,BAS具有多级放大作用,使其在应用时可极大地提高检测方法的灵敏度。特异
生物素亲和素系统介绍
生物素-亲和素系统(Biotin-Avidin—System,BAS)是70年代末发展起来的一种新型生物反应放大系统。生物素与亲和素之间高亲合力的牢固结合以及多级放大效应,使BAS免疫标记和有关示踪分析更加灵敏。BAS目前已广泛用于抗原、抗体的定性、定量检测及定位观察研究。生物素(biotin,B)
免疫印迹与免疫检测实验——亲和素生物素偶联
实验材料蛋白质试剂、试剂盒TTBS缓冲液TBS缓冲液过氧化物酶碱性磷酸酶仪器、耗材摇床硝酸纤维素膜尼龙膜实验步骤1. 在旋转摇床或摆动平台中持续摇动使膜与合适的封闭液平衡。对于硝酸纤维素膜或PVDF膜,需在室温封闭30~60 min。尼龙膜则需在37℃封闭2 h。2. 用TTBS溶液(用于硝酸纤
生物素亲和素酶联免疫吸附试验(BASELISA)
生物素亲和素(又称抗生物素)系统(biotinavidin system,BAS)标记抗体的技术是20世纪70年代后期发展起来的一种新的免疫检测方法。由于亲和素与生物素间的亲和力极强,结合迅速,且极其稳定,生物素标记抗体和酶的标记率高,又不影响蛋白的活性,使BAS标记技术比常规酶联免疫、放
亲和素和生物素为什么亲和力最高
生物素容易与蛋白质和核酸类等生物大分子结合,形成的生物素衍生物,不仅保持了大分子物质的原有生物活性,而且比恬度高,具多价性。此外,每个亲和素分子有四个生物素结合部位,可同时以多价形式结合生物素化的大分子衍生物和标记物。因此,BAS具有多级放大作用,使其在应用时可极大地提高检测方法的灵敏度。特异性亲和
链亲和素生物素结合物免疫荧光标记实验
免疫荧光标记是微生物学、免疫学、病理学及免疫组织化学中常用的一种免疫学实验方法,在临床上得到了广泛的应用。实验方法原理免疫荧光标记技术(immunofluorescence technique)是将已知的抗体或抗原分子标记上荧光素,当与其相对应的抗原或抗体起反应时,在形成的复合物上就带有一定量的荧光
链亲和素生物素结合物免疫荧光标记实验
实验材料 组织样品试剂、试剂盒 生物素荧光染料链亲和素仪器、耗材 离心机摇床实验步骤 1. 将湿纸巾铺于载玻片盒底部做成加湿盒,由冰冻切片仪中取出载有切片的载玻片,放入玻片盒中(每边放6片),或故湿盒中(载玻片勿相互接触)。 2. 待载玻片达室湿且未干时,铺加PBS于切片上(勿溢出玻片)。 3.
亲和素生物素系统:如何减少干扰更好地应用于免疫...
亲和素-生物素系统:如何减少干扰更好地应用于免疫检测-1-什么是亲和素-生物素系统(链霉)亲和素-生物素是免疫检测中常用的信号放大系统。亲和素是蛋清中常见的糖类蛋白,由四个相同的亚基组成。每一个亚基都包含一个生物素结合位点,因此一个理论上正常的亲和素能够结合4个生物素。亲和素与生物素具有非常强烈的亲
生物素亲合素系统的生物素与亲和层析介绍
亲和层析是将具有特殊结构的亲和分子制成固相吸附剂放置在层析柱中,当要被分离的蛋白混合液通过层析柱时,与吸附剂具有亲和能力的蛋白质就会被吸附而滞留在层析柱中。那些没有亲和力的蛋白质由于不被吸附,直接流出,从而与被分离的蛋白质分开,然后选用适当的洗脱液, 改变结合条件将被结合的蛋白质洗脱下来。 生
生物素亲和素系统要注意什么问题
灵敏度生物素容易与蛋白质和核酸类等生物大分子结合,形成的生物素衍生物,不仅保持了大分子物质的原有生物活性,而且比恬度高,具多价性。此外,每个亲和素分子有四个生物素结合部位,可同时以多价形式结合生物素化的大分子衍生物和标记物。因此,BAS具有多级放大作用,使其在应用时可极大地提高检测方法的灵敏度。特异
标记亲和素生物素法(BAELISA)实验
实验方法原理 亲和素是卵白蛋白中提取的一种碱性糖蛋白,对生物素有非常高的亲和力(结合常数高达1015M-1)。生物素很易与蛋白质(如抗体等)以共价键结合。这样,结合了酶的亲和素分子与结合有特异性抗体的生物素分子产生反应,既起到了多级放大作用,又由于酶在遇到相应底物时的催化作用而呈色,达到检测未知抗原
亲和素-生物素系统在ELISA中的应用
亲和素是一种糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,每个分子由4个亚基组成,可以和4个生物素分子亲密结合。维生素H,分子量244.31,存在于蛋黄中。用化学方法制成的衍生物,生物素-羟基琥珀亚胺酯(biotin-hydroxysuccinimide,BNHS)可与蛋白质、糖类和酶等多种类型的大小分子
标记亲和素生物素法(BAELISA)实验
检测未知抗原 检测未知抗体 实验方法原理 亲和素是卵白蛋白中提取的一种碱性糖蛋白,对生物素有非常高的亲和力(结合常数高达1015M-1)。
人脂联素(ADP)酶联免疫分析(ELISA)
人脂联素(ADP)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中脂联素(ADP)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人脂联素(ADP)水平。用纯化的抗-脂联素(ADP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单
SABC法亲和素与生物素系统的操作流程
实验概要本实验介绍了SABC法亲和素与生物素系统的操作步骤。实验原理SABC法或称S-P法、LSAB法,它是采用生物素标记的第二抗体与结合有HRP或AKP酶的链霉亲和素(streptavidin)连接来测定细胞及组织中的抗原。链霉亲和素是一种从链霉菌培养物中提取的蛋白质,相对分子质量60000,不含
SABC法亲和素与生物素系统的操作流程
实验概要本实验介绍了SABC法亲和素与生物素系统的操作步骤。实验原理SABC法或称S-P法、LSAB法,它是采用生物素标记的第二抗体与结合有HRP或AKP酶的链霉亲和素(streptavidin)连接来测定细胞及组织中的抗原。链霉亲和素是一种从链霉菌培养物中提取的蛋白质,相对分子质量60000,不含
生物素亲和素法化学染色有哪些技术呢
生物素即维生素H,是一种碱性蛋白。亲和素具有4个与生物素亲和力极高的结合位点。能够彼此牢固结合而不影响彼此的生物学活性。常用的技术类型有: (一)亲和素-生物素-过氧化物酶复合物技术(ABC) 原理:亲和素与酶标生物素结合,形成可溶性亲和素-生物素-过氧化物酶复合物(ABC)。其与生物素化抗
生物素亲和素系统的基本类型及原理
基本类型有两种,一类以游离亲和素为中间物,分别连接包含生物素大分子的待检反应体系和标记生物素,称为BAB法;后来又在此基础上发展了亲和素-生物素化酶复合物技术(ABC)。另一类是直接用标记亲和素连接生物素化大分子反应体系进行检测的BA法,或称标记亲和素-生物素法(LAB)。此外,依据待检反应体系中所
简述亲和素-生物素系统在ELISA中的应用
亲和素是一种糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,每个分子由4个亚基组成,可以和4个生物素分子亲密结合。维生素H,分子量244.31,存在于蛋黄中。用化学方法制成的衍生物,生物素-羟基琥珀亚胺酯(biotin-hydroxysuccinimide,BNHS)可与蛋白质、糖类和酶等多种类型的大小
猪网膜素(omentin)酶联免疫分析
实验概要本实验利用试剂盒测定了猪血清,血浆及相关液体样本中网膜素(omentin)的含量。实验原理应用双抗体夹心法测定标本中猪网膜素(omentin)水平。用纯化的猪网膜素(omentin)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入网膜素(omentin),再与HRP标记的网膜素(om
兔瘦素(leptin)酶联免疫分析
兔瘦素(leptin)酶联免疫分析检测范围:使用目的:本试剂盒用于测定兔血清、血浆及相关液体样本中瘦素(leptin)含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中兔瘦素(leptin)。用纯化的兔瘦素(leptin)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入瘦素( leptin)
大鼠瘦素(leptin)酶联免疫分析
大鼠瘦素(leptin)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中瘦素(leptin)的含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠瘦素(leptin)水平。用纯化的大鼠瘦素(leptin)抗体包被微孔板,制成固相抗
人瘦素(leptin)酶联免疫分析
人瘦素(leptin)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中瘦素(leptin)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人瘦素(leptin)水平。用纯化的人瘦素(leptin)抗体包被微孔板,制成固相
人肾素(Renin)酶联免疫分析
人肾素(Renin)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中肾素(Renin)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人肾素(Renin)水平。用纯化的人肾素(Renin)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往
犬瘦素(leptin)酶联免疫分析
犬瘦素(leptin)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定犬血清,血浆及相关液体样本中瘦素(leptin)的含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中犬瘦素(leptin)水平。用纯化的犬瘦素(leptin)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包
犬内皮素(ET)酶联免疫分析
犬内皮素(ET)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定犬血清,血浆及相关液体样本中内皮素(ET)的含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中犬内皮素(ET)水平。用纯化的犬内皮素(ET)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入内皮
人抑制素B(INHB)酶联免疫分析
人抑制素B(INHB)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中抑制素B(INHB)的含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人抑制素B(INHB)水平。用纯化的人抑制素B(INHB)抗体包被微孔板,制成
人肾上腺素(EPI)酶联免疫分析
人肾上腺素(EPI)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中肾上腺素(EPI)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人肾上腺素(EPI)水平。用纯化的人肾上腺素(EPI)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔
大鼠超敏胰岛素酶联免疫分析
大鼠超敏胰岛素酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆,细胞上清及相关液体样本中超敏胰岛素的含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠超敏胰岛素水平。用纯化的大鼠超敏胰岛素抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加