碱性磷酸酶(AP)的色原底物

在ELISA测定中,碱性磷酸酶的色原底物最常用的是对硝基苯磷酸盐(p-nitropheny|phosate,)。在碱性磷酸酶的作用下生成对硝基酚(),其在入=405 nm处有最大吸收。由于碱性条件下的光吸收增强,并可使碱性磷酸酶失活,因而可使用碳酸钠作为终止剂。二乙醇胺缓冲液中不能有单乙醇胺,因为单乙醇胺对碱性磷酸酶有温度依赖的抑制作用。较高浓度的无机磷可竞争性地抑制碱性磷酸酶的活性,贮存时间过长由于非酶水解而产生硝基酚和磷酸盐时即可出现这种情况,此时呈黄色。因此,用于ELISA测定时,必须绝对五色。的摩尔消光系数(光吸收)的变化取决于溶液的pH及温度、离子强度、蛋白含量,当温度从15~C升高至45℃时,在入=405 nm处的光吸收将增加5%~7%。在ELISA测定时,色原底物的具体配方为①显色底物溶液:将以10 mmol/L的浓度溶于含1 mmol/LMgCl:的0.1 mol/L二乙醇胺缓冲液(pH 9.8),即可应用;②终......阅读全文

碱性磷酸酶(AP)的色原底物

在ELISA测定中,碱性磷酸酶的色原底物最常用的是对硝基苯磷酸盐(p-nitropheny|phosate,)。在碱性磷酸酶的作用下生成对硝基酚(),其在入=405 nm处有最大吸收。由于碱性条件下的光吸收增强,并可使碱性磷酸酶失活,因而可使用碳酸钠作为终止剂。二乙醇胺缓冲液中不能有单乙醇胺,因为单

用于酶联免疫测定(ELISA)酶的色原底物

辣根过氧化物酶的色原底物 HRP最常用的色原底物有邻苯二胺(OPD)、2,2’—吖嗪—(3—乙酰苯基噻唑磺酸—6)[2,2’—azino-di(3—ethylben2thiazolinesulphonicacid-6),ABTS](杂环吖嗪)、四甲基联苯胺(TMB)和4—氨基安替比林:苯酚耦联底

CHROMOGENIX发色底物

  CHROMOGENIX提供基于生色底物的止血和纤溶测试解决方案,用于医院,临床实验室,血库和药物测试。CHROMOGENIX产品组合包含30多种产品,包括单个发色底物以及完整的试剂盒,其中包含在自动化仪器上进行特定分析所需的所有试剂。   CHROMOGENIX发色底物   S-2222

被认为是HRP最为敏感的色原底物是TMD还是OPD?

HRP最为敏感的色原底物是OPD。四甲基联苯胺(TMB):TMB是一种优于OPD的新型HRP色原底物。TMB经HRP作用后变为蓝色,加入硫酸终止反应后变为黄色,最大吸收峰波长为450nm。TMB具有稳定性好,成色无需避光,无致突变作用等优点,已成为目前ELISA中应用最广泛的底物。缺点是水溶性差。邻

免疫印迹与免疫检测实验——发色底物显迹

实验材料蛋白质试剂、试剂盒Tris缓冲液发色底物显迹液PBS磷酸盐仪器、耗材摇床实验步骤1.  在室温以PBS洗膜15 min 以去除过量的磷酸盐和Tween 20。2.  将膜放入发色底物显迹液,条带应在10~30 min 内出现。3.  用蒸馏水洗膜,终止反应。晾干后拍照留永久的记录。

底物的定义

底物为参与生化反应的物质,可为化学元素、分子或化合物,作用可形成产物。一个生化反应的底物往往同时也是另一个化学反应的产物。

什么是底物?

底物为参与生化反应的物质,可为化学元素、分子或化合物,作用可形成产物。一个生化反应的底物往往同时也是另一个化学反应的产物。

什么是底物?

底物为参与生化反应的物质,可为化学元素、分子或化合物,经酶作用可形成产物。一个生化反应的底物往往同时也是另一个化学反应的产物。在异裂反应中,底物即为亲电试剂或亲核试剂进攻的物质特定的底物会在特定的酶作用下,合成或分解。

底物的定义

底物为参与生化反应的物质,可为化学元素、分子或化合物,作用可形成产物。一个生化反应的底物往往同时也是另一个化学反应的产物。

底物溶液的配制

pH 5.0磷酸-柠檬酸缓冲液加入邻苯二胺1mg/ml,再加入30%的H2O2 (1μl/ml)溶解后即为ELISA底物液,临用前配制,避光保存。

荧光底物有哪些

(一)荧光色素   许多物质都可产生荧光现象,但并非都可用作荧光色素.只有那些能产生明显的荧光并能作为染料使用的有机化合物才能称为免疫荧光色素或荧光染料.常用的荧光色素有:  异硫氰酸荧光素2.四乙基罗丹明  3.四甲基异硫氰酸罗丹明4.藻红蛋白(二)其他荧光物质   1.酶作用后产生荧光的物质:某

什么是假底物?

假底物是可以特异地结合到酶的活性中心但不被催化、阻止真底物结合的物质。

什么是自杀底物?

自杀底物是一类酶的天然底物的衍生物或类似物,在它们的结构中含有一种化学活性基团,当酶把他们作为底物结合时,其潜在的化学基团能被解开或激活,并与酶的活性部位发生共价结合,使结合物停留在某种状态,从而不能分解成产物,酶因而致“死”,此过程称为酶的自杀,这类底物称为自杀底物(suicide substra

什么是自杀底物?

自杀底物是一类酶的天然底物的衍生物或类似物,在它们的结构中含有一种化学活性基团,当酶把他们作为底物结合时,其潜在的化学基团能被解开或激活,并与酶的活性部位发生共价结合,使结合物停留在某种状态,从而不能分解成产物,酶因而致“死”,此过程称为酶的自杀,这类底物称为自杀底物(suicide substra

什么是底物循环?

也称之底物循环(substrate cycle)。一对催化两个途径的中间代谢物之间循环的方向相反、代谢上不可逆的反应。有时该循环通过ATP的水解导致热能的释放。例如,葡萄糖+ATP=葡萄糖-6-磷酸+ADP与葡萄糖-6-磷酸+H2O=葡萄糖+Pi反应组成的循环反应,其净反应实际上是ATP+H2O=A

什么是假底物?

中文名称假底物英文名称pseudosubstrate定  义可以特异地结合到酶的活性中心但不被催化、阻止真底物结合的物质。有些酶具有假底物结构域,其中的特定序列或残基作为假底物结合到酶的活性部位,抑制酶活性,当酶与配基结合后发生构象变化,释放假底物,恢复催化功能。这是体内调节酶活性的一种重要方式。应

底物循环的概念

无效循环(futile cycle):也称之底物循环(substrate cycle)。一对催化两个途径的中间代谢物之间循环的方向相反、代谢上不可逆的反应。有时该循环通过ATP的水解导致热能的释放。例如,葡萄糖+ATP=葡萄糖-6-磷酸+ADP与葡萄糖-6-磷酸+H2O=葡萄糖+Pi反应组成的循环反

碱性磷酸酶标记试剂

BCIP/T是碱性磷酸酶最常使用的呈色底物,碱性磷酸酶标记的试剂应该用真核生物的碱性磷酸酶,因为这种酶容易被EDTA灭活。细菌酶难以终止其活性,易引起显色过度,导致较高背景。 BCIP/T底物在酶结合位点形成强烈的黑紫色沉淀,此反应是一个稳定进行的过程。因此,可设定一个精确的反应对照。可以

碱性磷酸酶标记试剂的使用

实验概要本实验介绍了碱性磷酸酶标记试剂的使用方法。BCIP/NBT是碱性磷酸酶最常使用的呈色底物,碱性磷酸酶标记的试剂应该用真核生物的碱性磷酸酶,因为这种酶容易被EDTA灭活。细菌酶难以终止其活性,易引起显色过度,导致较高背景。BCIP/NBT底物在酶结合位点形成强烈的黑紫色沉淀,此反应是一个稳定进

生物学术语底物

底物为参与生化反应的物质,可为化学元素、分子或化合物,作用可形成产物。一个生化反应的底物往往同时也是另一个化学反应的产物。

尿酶测定的测定方法与参考值

  【测定方法】  采用合成色原底物法,其中又分为以对硝基酚(PNP)为色原的底物和以2-氯-4-硝基酚(CNP)为色原的底物。前者用于终点法比色分析,后者用于速率法自动分析(连续监测法)。  【参考值】  <1.81U/mmol cr(以PNP为色原,终点法)  <2.37U/mmol cr(以C

碱性磷酸酶的测定实验_细菌碱性磷酸酶

实验材料酶样品试剂、试剂盒Tris-HCl磷酸硝基苯仪器、耗材分光光度计实验步骤实验混合物25℃ 时,于 405 nm 处吸收值降低,ε405=18.5×103 l/(mol·cm)。

HRP底物分类及其操作步骤

底物范围较广,包括二氨基联苯胺(DAB)、氯萘酚和氨乙基咔唑等。二氨基联苯胺/金属盐 DAB是辣根过氧化物酶最敏感、常用的底物。它产生强烈的棕色产物,在水和醇中不溶解。多数情况下,推荐在DAB中加入不同的金属离子。当加入金属盐如钴、镍至底物液中,辣根过氧化物酶可以更加敏感。此类反应产物呈暗蓝灰色至黑

HRP底物归类以及操作流程

  二氨基联苯胺/金属盐   DAB是辣根过氧化物酶最比较敏感、常见的底物。它造成明显的深棕色物质,在水和醇中不融解。大部分状况下,强烈推荐在DAB中添加不一样的金属正离子。当添加金属盐如钴、镍至底物液中,辣根过氧化物酶能够更为比较敏感。该类反映物质呈暗灰蓝色至灰黑色,且在水及醇中平稳。DAB/金

生物学术语假底物

可以特异地结合到酶的活性中心但不被催化、阻止真底物结合的物质。有些酶具有假底物结构域,其中的特定序列或残基作为假底物结合到酶的活性部位,抑制酶活性,当酶与配基结合后发生构象变化,释放假底物,恢复催化功能。这是体内调节酶活性的一种重要方式。

酶免疫技术酶与底物

酶结合物是酶与抗原或者抗体、半抗原在交联剂作用下联结的产物,是 ELISA 成败的关键试剂。它不仅具有抗原抗体的特异性反应,还具有酶促反应的特性,最终产生生物放大的特性。酶免疫反应中,最常用的酶是辣根过氧化物酶,HRP的催化反应需要底物过氧化氢(H2O2)和供氢体(DH2)。供氢体多为无色的还原型染

耐皂洗色牢度测试,水洗色牢度仪,色牢度测试

 技术资料:皂洗色牢度测试,水洗色牢度仪,色牢度测试,不仅可测试水洗色牢度还可进行干洗色牢度测试。仪器设计参数同时符合ISO,BS,AATCC,JIS和SDC标准。皂洗色牢度测试可容两种洗水钢杯500mL和1200mL, 500mL符合ISO 105 - C06/E03或AATCC61-1A测试法则

免疫印迹与免疫检测实验——发光底物显迹

实验材料蛋白质试剂、试剂盒Tris缓冲液发光底物显迹液PBS磷酸盐仪器、耗材保鲜膜摇床实验步骤1.  用50 ml 底物缓冲液洗膜两次以平衡膜,每次15 min。 2.  对于使用硝酸纤维素膜或PVDF膜进行的碱性磷酸酶反应:膜置于Nitro-Block溶液中5 min,然后以50 ml 底物缓冲液

BCIP-NBT碱性磷酸酶显色试剂盒的简介和使用方法

 英文名称: BCIP/NBT Alkaline Phosphatase Color Development   规格:50ml   类别分类: 免疫印迹   储存条件: 4℃,避光,12个月   主要用途: 免疫印迹检测中的发色底物显迹,尤其适用于碱性磷酸酶系统。   注意事项: 用NBT氧化后,

碱性磷酸酶的测定实验_哺乳动物碱性磷酸酶

正磷酸单酯磷酸水解酶(最适碱度)。正磷酸单酯+H2O → 醇+Pi这个酶可以从各种渠道得来,如细菌和哺乳动物肠黏膜。每个酶分子有两个 Zn2+离子键。碱性的磷酸酶频繁地与抗体配位,例如在 Westernblots 中及酶联免疫鉴定(ELISA)中。细菌酶的最适 pH 是 8.0,哺乳动物的要较高一点