多克隆抗体的制备、纯化及免疫电泳2
⒊ 注射抗原 ⑴ 准备两只成年兔,将100µg抗原/兔溶入1ml磷酸缓冲溶液中待用。在1ml福氏不完全佐剂中加入分枝杆菌制成完全佐剂,并加入1ml抗原溶液,剧烈震荡使之充分乳化,用3ml注射器抽取该乳化液,接上25G针头,排除注射器中的气泡。从笼中取出兔子放在平坦处,在4个不同的部位进行皮下注射,两处在后背,两处在大腿处。抚去注射处的兔毛并用乙醇消毒暴露的皮肤。捏出皮肤,将针头以相对皮肤15度的角度进针,进针深度为1cm-2cm,小心不要刺入肌肉中,在4个不同部位分别各注射约500µl抗原溶液。注射结束后,将针在注射处放置几秒钟后再轻轻拔出,并用乙醇在注射处消毒。在4个部位重复上述操作。用相同方法免疫另一只家兔。 ⑵ 每4-6周注射抗原,并在注射后的7天-10天按照步骤2收集血液。将收集的血液与注射前收集的血液进行比较,检查是否有抗体产生。待确定产生抗体后可大量收集血液,但每只兔子收集血液不能多于40ml......阅读全文
多克隆抗体的制备、纯化及免疫电泳2
⒊ 注射抗原 ⑴ 准备两只成年兔,将100µg抗原/兔溶入1ml磷酸缓冲溶液中待用。在1ml福氏不完全佐剂中加入分枝杆菌制成完全佐剂,并加入1ml抗原溶液,剧烈震荡使之充分乳化,用3ml注射器抽取该乳化液,接上25G针头,排除注射器中的气泡。从笼中取出兔子放在平坦处,在4个不同的部位进行皮下注射
多克隆抗体的制备、纯化及免疫电泳1
一、多克隆抗体的制备【实验原理】当将抗原注射入实验动物体内时,一系列抗体生成细胞会不同程度的与抗原结合,受抗原刺激后在血液中产生不同类型的抗体,这种由一种抗原刺激产生的抗体称为多克隆抗体。多克隆抗体中不同的抗体分子可以以不同的亲和能力与抗原分子表面不同的部分—抗原决定簇相结合。将抗原导入敏感动物体内
多克隆抗体的免疫电泳
【实验原理】 免疫电泳又称为γ球蛋白电泳或免疫球蛋白电泳技术,这是一种能够判断血液中三种免疫球蛋白IgM, IgG, IgA含量水平的实验方法。在这项实验技术中,首先利用蛋白质的分子量和所带电荷的比值运用水平琼脂糖凝胶电泳技术将蛋白质进行分离,然后将特异性的抗体引入到与电泳方向平行的凹槽中,在抗
多克隆抗体的免疫电泳
【实验原理】 免疫电泳又称为γ球蛋白电泳或免疫球蛋白电泳技术,这是一种能够判断血液中三种免疫球蛋白IgM, IgG, IgA含量水平的实验方法。在这项实验技术中,首先利用蛋白质的分子量和所带电荷的比值运用水平琼脂糖凝胶电泳技术将蛋白质进行分离,然后将特异性的抗体引入到与电泳方向平行的凹槽中,在抗原和
多克隆抗体的免疫电泳
实验概要本文介绍了多克隆抗体免疫电泳(immune electrophoresis)的原理及操作流程。实验原理免疫电泳又称为或免疫球蛋白电泳技术,这是一种能够判断血液中三种免疫球蛋白IgM,IgG,IgA含量水平的实验方法。在这项实验技术中,首先利用蛋白质的分子量和所带电荷的比值运用水平琼脂糖凝胶电
多克隆抗体的免疫电泳实验
【实验原理】免疫电泳又称为γ球蛋白电泳或免疫球蛋白电泳技术,这是一种能够判断血液中三种免疫球蛋白IgM'' IgG'' IgA含量水平的实验方法。在这项实验技术中,首先利用蛋白质的分子量和所带电荷的比值运用水平琼脂糖凝胶电泳技术将蛋白质进行分离,然后将特异性的抗体
多克隆抗体的免疫电泳实验
【实验原理】 免疫电泳又称为γ球蛋白电泳或免疫球蛋白电泳技术,这是一种能够判断血液中三种免疫球蛋白IgM'' IgG'' IgA含量水平的实验方法。在这项实验技术中,首先利用蛋白质的分子量和所带电荷的比值运用水平琼脂糖凝胶电泳技术将蛋白质进行分离,然后将特异性
多克隆抗体纯化实验
实验材料 动物血清样品试剂、试剂盒 正辛酸醋酸缓冲液PBS仪器、耗材 透析袋高速低温离心机实验步骤 一、材料和试剂 1. 正辛酸 2. 60 mmol/L,pH4.0醋酸缓冲液,PBS 3. 透析袋 4. 高速低温离心机 二、操作步骤 1. 将待提取样品用60 mmol/L,pH4.0醋
多克隆抗体的免疫电泳操作流程
实验概要本实验介绍了多克隆抗体的免疫电泳操作流程。实验原理免疫电泳又称为γ球蛋白电泳或免疫球蛋白电泳技术,这是一种能够判断血液中三种免疫球蛋白IgM, IgG, IgA含量水平的实验方法。在这项实验技术中,首先利用蛋白质的分子量和所带电荷的比值运用水平琼脂糖凝胶电泳技术将蛋白质进行分离,然后将特
多克隆抗体的免疫电泳操作流程
(多克隆抗体)的免疫电泳实验原理: 多克隆抗体的免疫电泳又称为γ球蛋白电泳或免疫球蛋白电泳技术,这是一种能够判断血液中三种免疫球蛋白IgM, IgG, IgA含量水平的实验方法。在多克隆抗体的免疫电泳验技术中,首先利用蛋白质的分子量和所带电荷的比值运用水平琼脂糖凝胶电泳技术将蛋白质进行分离
多克隆抗体的免疫电泳操作流程
(多克隆抗体)的免疫电泳实验原理: 多克隆抗体的免疫电泳又称为γ球蛋白电泳或免疫球蛋白电泳技术,这是一种能够判断血液中三种免疫球蛋白IgM, IgG, IgA含量水平的实验方法。在多克隆抗体的免疫电泳验技术中,首先利用蛋白质的分子量和所带电荷的比值运用水平琼脂糖凝胶电泳技术将蛋白质进行分离
多克隆抗体的免疫电泳操作流程
(多克隆抗体)的免疫电泳实验原理:多克隆抗体的免疫电泳又称为γ球蛋白电泳或免疫球蛋白电泳技术,这是一种能够判断血液中三种免疫球蛋白IgM, IgG, IgA含量水平的实验方法。在多克隆抗体的免疫电泳验技术中,首先利用蛋白质的分子量和所带电荷的比值运用水平琼脂糖凝胶电泳技术将蛋白质进行分离,然
多克隆抗体的免疫电泳技术
实验概要本文介绍了多克隆抗体的免疫电泳操作流程。免疫电泳技术不仅可用于血清或尿样中单克隆抗体的鉴定,也可用于其它方面,比如免疫复合物的筛选、各种异常丙种球蛋白血症的识别和鉴定等。免疫电泳技术也是进行蛋白质常规评价的一种可靠,精确的实验方法,可观察蛋白质结构的变化和浓度的改变。实验原理免疫电泳又称为γ
多克隆抗体的免疫电泳操作流程
(多克隆抗体)的免疫电泳实验原理: 多克隆抗体的免疫电泳又称为γ球蛋白电泳或免疫球蛋白电泳技术,这是一种能够判断血液中三种免疫球蛋白IgM, IgG, IgA含量水平的实验方法。在多克隆抗体的免疫电泳验技术中,首先利用蛋白质的分子量和所带电荷的比值运用水平琼脂糖凝胶电泳技术将蛋白质进行分离
多克隆抗体的免疫电泳操作流程
实验原理 免疫电泳又称为γ球蛋白电泳或免疫球蛋白电泳技术,这是一种能够判断血液中三种免疫球蛋白IgM,IgG,IgA含量水平的实验方法。在这项实验技术中,首先利用蛋白质的分子量和所带电荷的比值运用水平琼脂糖凝胶电泳技术将蛋白质进行分离,然后将特异性的抗体引入到与电泳方向平行的凹槽中,在抗原和
多克隆抗体的免疫电泳操作流程
(多克隆抗体)的免疫电泳实验原理: 多克隆抗体的免疫电泳又称为γ球蛋白电泳或免疫球蛋白电泳技术,这是一种能够判断血液中三种免疫球蛋白IgM, IgG, IgA含量水平的实验方法。在多克隆抗体的免疫电泳验技术中,首先利用蛋白质的分子量和所带电荷的比值运用水平琼脂糖凝胶电泳技术将蛋白质进行分离
多克隆抗体的制备
多克隆抗体的制备 1. 器材: 剪刀(剪兔毛用)一把、弯头眼科手术镊子(游离血管用)一把、直头眼科手术剪(剪血管用)一把,手术刀架,手术刀片,注射器(1ml、10ml,25ml)附针头,兔子固定架,灭菌三角烧瓶(200ml)或平皿(直径 18cm)、弯头止血钳四把,直头止血钳两把,手术缝合线,塑
多克隆抗体的制备方法
一、器材 剪刀(剪兔毛用)一把、弯头眼科手术镊子(游离血管用)一把、直头眼科手术剪(剪血管用)一把,手术刀架,手术刀片,注射器(1ml、 10ml,25ml)附针头,兔子固定架,灭菌三角烧瓶(200ml)或平皿(直径18cm)、弯头止血钳四把,直头止血钳两把,手术缝合线,塑料放血管,纱布等
多克隆抗体的制备步骤
实验试剂生理盐水(或PBS)弗氏完全佐剂(Freund’s complete adjuvant,FCA)弗氏不完全佐剂(Freund’s incomplete adjuvant, FIA)二甲苯,酒精棉,脱脂棉,2% NaN3实验设备剪刀(剪兔毛用)一把、弯头眼科手术镊子(游离血管用)一把、直头眼科
多克隆抗体的制备步骤
多克隆抗体的制备一般包括以下几个步骤:1、制备抗原。2、选择实验动物。3、动物免疫。4、试取血进行测试,看看是否成功免疫。5、如果成功免疫,杀死实验动物,采集全部血清。6、纯化出抗体。7、鉴定抗体。包括纯度以及特异性。具体操作与制备原理参见中国免疫学实验网。(一)抗原制备Ig 是免疫球蛋白,对异种动
多克隆抗体的制备步骤
实验概要本实验通过兔免疫制备了多克隆抗体。主要试剂生理盐水(或PBS)弗氏完全佐剂(Freund’s complete adjuvant,FCA)弗氏不完全佐剂(Freund’s incomplete adjuvant, FIA)二甲苯,酒精棉,脱脂棉,2% NaN3主要设备剪刀(剪兔毛用)一把、弯
多克隆抗体制备
1. 免疫动物:两只新西兰兔 2. 佐剂:首先用完全弗氏佐剂(CFA),后用不完全弗氏佐剂(IFA)。 3. 免疫原:蛋白或KLH偶联的多肽。每次免疫100-200μg免疫原。 4. 免疫:用生理盐水稀释免疫原,然后与相应的佐剂进行1:1混合。抗原和佐剂完全混合形成稳定的乳剂,将该乳剂在兔子双肩周围
多克隆抗体的纯化方法都有哪些
纯化抗体的方法较多,建议用蛋白A或蛋白G微球纯化法作为最常用的方法。这种方法效率高,能为常用的实验方法提供足够纯化的抗体,而且随着商品化的蛋白A,和蛋白G基质的出现,能将任何来源的抗体纯化。抗体的纯化也可采用传统的色谱法,在某些情况下非常有用。这些方法包括DEAE离子交换色谱法、硫酸镀沉淀法及其他方
辛酸提取法纯化多克隆抗体
该法可用于分离提取人、兔、小鼠血清中的Ig及杂交瘤诱生的腹水和培养上清液中McAb。 【材料和试剂】 (1)正辛酸。 (2)60mmol/L,pH4.0醋酸缓冲液,PBS。 (3)透析袋。 (4)高速低温离心机。 【操作步骤】 (1)将待提取样品用60mmol/L,pH4.0
Empower-2软件控制制备纯化馏分收集
集Empower 2软件的数据分析能力与纯化馏分收集器III的简易性于一身 纯化型或制备型色谱技术用于分离和收集混合物中的某种组分,以供后续使用。通常,由连接于色谱仪检测器出口后的馏分收集器自动收集这些组分。 沃特世馏分收集器III是一种结构紧凑、功能灵活、使用方便的设备,既适用于小
多克隆抗体纯化实验_辛酸提取法
辛酸提取法可用于分离提取人、兔、小鼠血清中的Ig及杂交瘤诱生的腹水和培养上清液中McAb。实验材料动物血清样品试剂、试剂盒正辛酸醋酸缓冲液PBS仪器、耗材透析袋高速低温离心机实验步骤一、材料和试剂 1. 正辛酸 2. 60 mmol/L,pH4.0醋酸缓冲液,PBS 3. 透析袋 4. 高
多克隆抗体技术概述2
(3)脂质体:是人工制备的类脂质的小球体,由一个或多个酷似细胞膜的类脂双分子层组成,这种结构使其能够携带各种亲水的、疏水的和两性物质,他们被包裹在脂质体内部的水相中,或插入类脂双分子层或吸附、联接在脂质体的表面,起到明显的免疫增强作用。 (4)油佐剂:采用植物油和矿物油均可,包括豆油、花生油、油菜油
大鼠多克隆抗体制备服务
多克隆抗体制备服务内容 百欧泰生物可为客户提供多克隆抗体制备服务,包括抗原生产,抗体制备,抗体纯化,抗体标记,抗体修饰等,客户也可以根据自己的需求选择适合自己的服务方案。 抗原客户提供百欧泰提供(2-4周)多肽合成多肽,偶联BSA/KLH蛋白蛋白表达小分子抗原小分子抗原偶联其他其他免疫动物
小鼠多克隆抗体制备服务
多克隆抗体制备服务内容 百欧泰生物可为客户提供多克隆抗体制备服务,包括抗原生产,抗体制备,抗体纯化,抗体标记,抗体修饰等,客户也可以根据自己的需求选择适合自己的服务方案。 抗原客户提供百欧泰提供(2-4周)多肽合成多肽,偶联BSA/KLH蛋白蛋白表达小分子抗原小分子抗原偶联其他其他免疫
关于多克隆抗体的抗体制备介绍
多克隆抗体的制备一般包括以下几个步骤: 1、制备抗原。 2、选择实验动物。 3、动物免疫。 4、试取血进行测试,看看是否成功免疫。 5、如果成功免疫,杀死实验动物,采集全部血清。 6、纯化出抗体。 7、鉴定抗体。包括纯度以及特异性。 具体操作与制备原理参见中国免疫学实验网。 (