免疫血清的制备及效价测定
制备免疫血清的传统方法是将抗原注入动物体内,由动物体内 B 细胞增殖分化成浆细胞产生抗体。由于抗原分子(完全抗原)具有多种抗原决定簇,每一种抗原决定簇可以激活具有相应抗原受体的 B 细胞系产生该决定簇的抗体,因此用抗原免疫机体获得的免疫血清一般均为多克隆抗体。 制备的免疫血清的质量(特异性、亲和力及效价高低)受多种因素的影响,只要包括抗原的性质、免疫动物的种类及状态、免疫剂量、免疫途径及免疫方案(加强免疫次数,间隔时间,佐剂的使用等)等。因此要获得高质量的免疫血清需先通过预实验摸索确定最佳免疫方法。 测定免疫血清中抗体效价的方法很多,如凝集实验,沉淀实验、溶血实验, ELISA 等均可用于对抗体效价的测定,本次实验将采用溶血实验测定所获得的免疫血清的效价。 一、免疫血清(浆)的制备 我们要制备的是抗绵羊红细胞 (SRBC) 的免疫血清,即溶血素。 实验材料 1.......阅读全文
乌司他丁的效价测定方法
照紫外可见分光光度法(通则0401)测定供试品溶液取本品适量,精密称定,加0.2mol/L三乙醇胺缓冲液(pH7.8)使溶解并定量稀释制成每1ml中约含50单位的溶液。胰蛋白酶溶液、底物溶液、标准品溶液与测定法见乌司他丁溶液效价测定中效价项下。
噬菌体的检查及效价测定(一)
一、目的:1. 了解噬菌体效价的含义及其测定原理。2. 学会检查噬菌体的方法。3. 掌握用双层琼脂平板法测定噬菌体效价的操作技能。二、原理:噬菌体是一类专性寄生于细菌和放线菌等微生物的病毒,其个体形态极其微小,用常规微生物计数法无法测得其数量。当烈性噬菌体侵染细菌后会迅速引起敏感细菌裂解,释放出大量
管碟法测定抗生素效价
一、目的和要求 1、了解管碟法的原理。 2、掌握二剂量法测定抗生素效价单位的技术和计算方法。 二、原理 抗生素的生物检定是以抗生素对微生物的抗菌效力作为效价的衡量标准,具有与应用原理相一致、用量少和灵敏度高等优点。管碟法是琼脂 扩散法中的一种,已被各国药典广泛采用,作为法定的抗生素
凝血酶冻干粉的效价测定
效价测定纤维蛋白原溶液取纤维蛋白原,加0.9%氯化钠溶液适量溶解,用0.05mol/L磷酸氢二钠溶液或0.05mol/L磷酸二氢钠溶液调节pH值至7.0~7.4,再用0.9%氯化钠溶液稀释制成含0.1%凝固物的溶液标准品溶液取凝血酶标准品,加0.9%氯化钠溶液溶解并分别定量稀释制成每1ml中含5.0
噬菌体的检查及效价测定(二)
六、结果:1. 噬菌体检查① 离心分离加热法OD650光密度值正常发酵液(对照) 异常发酵液(试验)离心上清液(A1)离心上清液加热煮沸后(A2)A2/A1② 绘出平板上的噬菌斑检测结果,指出噬菌斑和宿主细菌。2. 噬菌体效价测定① 平板上噬菌斑数目噬菌体稀释度10-4、10-5、10-6 对照噬菌
噬菌体的分离、纯化及效价测定
一、目的要求 1、学习分离、纯化噬菌体的基本原理和方法。 2、学习噬菌体效价测定的基本方法。 二、基本原理 因为噬菌体是专性寄生物,所以自然界中凡有细菌分布的地方,均可发现奇特异的噬菌体的存在,亦即噬菌体是伴随着宿主细菌的分布而分布的,例如粪便与阴沟污水中含有大量大肠杆菌,故也能很容
胃蛋白酶颗粒的效价测定
照紫外可见分光光度法(通则0401)测定。供试品溶液取装量差异项下的内容物,混匀,精密称取适量(约相当于胃蛋白酶240单位),加盐酸溶液溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.2~0.4单位的溶液。盐酸溶液、对照品溶液与测定法见胃蛋白酶效价测定项下。
含糖胃蛋白酶的效价测定
照紫外可见分光光度法(通则0401)测定供试品溶液取本品,精密称定,加盐酸溶液溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.2~0.4单位的溶液盐酸溶液、对照品溶液与测定法见胃蛋白酶效价测定项下。
关于胰激肽原酶的效价测定介绍
1、酶活力 照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定。 供试品溶液:取本品适量,精密称定,加纯度项下的磷酸盐缓冲液(pH7.0)适量使溶解并定量稀释制成每1mL 中约含10单位的溶液。 标准品溶液:取胰激肽原酶标准品,按标示单位,加上述磷酸盐缓冲液(pH7.0)适量使溶解并定量稀释制成每
关于抗体效价测定的方法内容介绍
1、抗体效价测定— 取小试管10支,分别标明1-10号,各管加生理盐水0.2ml,用刻度吸管吸取被检者血清0.2ml加入到第1管充分混匀,再用同一吸管从第1试管中吸出0.2ml加入到第2管,充分混匀后再吸取0.2ml加入第3管,以此倍量稀释。取第10管的0.2ml稀释液弃去。使成 1:2、1:4
肝素钙注射液的效价测定方法
取本品,照肝素钙项下的方法测定,即得
硫酸鱼精蛋白注射液的效价测定
效价测定照硫酸鱼精蛋白生物测定法(通则1213)测定,即得。
肝素钠乳膏的效价测定方法
取本品约2g,精密称定,加无水乙醇30ml,置水浴上加热使溶解,放冷,移至100ml量瓶中,用0.9%氯化钠溶液稀释至刻度,摇匀,置4℃冰箱内过夜,取出,滤过,精密量取续滤液50ml,置水浴上蒸发至无乙醇臭,移至50ml量瓶中,用0.9%氯化钠溶液稀释至刻度,摇匀,照肝素钠项下的方法测定,即得。
缩宫素注射液的效价测定
照缩宫素生物测定法(通则1210)测定,即得
胰激肽原酶肠溶片的效价测定
照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定。供试品溶液取本品20片,除去包衣,精密称定,研细精密称取细粉适量(约相当于胰激肽原酶250单位),置研钵中,加少量纯度项下的磷酸盐缓冲液(pH7.0),研磨使胰激肽原酶溶解,定量转移至25ml量瓶中,用上述磷酸盐缓冲液(pH7.0)稀释至刻度,摇匀,滤过,
IgG抗A效价测定的检查过程
采集被检对象静脉血,取血清标本50微升加入等体积的牛血清白蛋白,37度水浴温育30-60分钟,倍比稀释后依次将稀释血清分别加入标记的为主凝胶抗人球蛋白卡中,在所有孔中加入等量A型0.5%红细胞悬液后37度孵育5分钟,用专用离心机离心5分钟并观察结果。
门冬酰胺酶(欧文)的效价测定方法
酶活力照紫外可见分光光度法(通则1)测定。磷酸盐缓冲液取0.1mol/L磷酸氢二钠溶液适量,用0.1mol/L磷酸二氢钠溶液调节pH值至8.0。供试品溶液取本品约0.1g,精密称定,加磷酸盐缓冲液溶解并定量稀释制成每1ml中约含5单位的溶液。对照品溶液取经105℃干燥至恒重的硫酸铵适量,精密称定,加
关于抗体效价测定的基本信息介绍
抗体效价测定是指测定抗体的物理状态及其在体内的滞留时间,以其与抗原反应的多少来表示其免疫效果。 抗体效价测定是根据大分子颗粒抗原与其相应的抗体相结合, 在适量的电解质存在及一定的温度下,经过一定时间可出现肉眼可见的凝集团块,医学称为凝集反应,一般均以标准抗原测定免疫血清或患者血清中抗体的效价
IgG抗A效价测定的临床意义
异常结果:IgG抗A效价≥1:64,患儿可能发生ABO-HDN,表现为胎儿水肿和死胎,如流产、早产、死产或出生后数小时内死亡;患儿出现重度贫血、黄疸、核黄疸等症状。 需要检查的人群:夫妇血型不同或母婴血型不同的孕妇。
注射用尿激酶的效价测定方法
取本品5支,分别加适量巴比妥氯化钠缓冲液(pH7.8)溶解,并全量转移至同一100ml量瓶中,用上述缓冲液稀释至刻度,摇匀。精密量取适量,用上述缓冲液定量稀释制成适宜浓度的溶液(应在标准曲线浓度范围内)。照尿激酶项下的方法测定酶活力,即得
矛头腹蛇血凝酶的效价测定方法
酶活力标准品溶液取1支矛头腹蛇血凝酶标准品(供效价测定用),精密加水lml使溶解并定量稀释制成每1ml中各约含0.2、0.5、1.0、2.0、3.0单位的溶液。供试品溶液精密称取本品适量,加水溶解并定量稀释制成每1m中约含1.0单位的溶液测定法取凝血质控血浆混悬液[凝血质控血浆(MDChemosta
缩宫素注射液的效价测定
照缩宫素生物测定法(通则1210)测定,即得
关于凝血酶的效价测定的介绍
1、纤维蛋白原溶液的制备 取纤维蛋白原,加0.9%氯化钠溶液适量溶解,用0.05 mol/L磷酸氢二钠溶液或0.05mol/L磷酸二氢钠溶液调节pH值至7.0~7.4,再用0.9%氯化钠溶液稀释成含0.1%凝固物的溶液,备用。 2、标准品溶液的制备 取凝血酶标准品,加0.9%氯化钠溶液溶解
垂体后叶注射液的效价测定方法
升压素照升压素生物测定法(通则1205)测定,即得比活取本品,作为游离氨基酸测定用供试品溶液;取本品1ml,加7mo/L盐酸溶液6ml,密封,110℃水解16小时,将水解液转移后,蒸干,精密加水2ml复溶残渣,用0.45pm的滤膜滤过,取续滤液作为水解氨基酸测定用供试品溶液;另取门冬氨酸、谷氨酸、丝
关于糜蛋白酶的效价测定介绍
1、底物溶液的制备 取N-乙酰-L-酪氨酸乙酯23.7mg,置100ml量瓶中,加磷酸盐缓冲液(取0.067mol/L磷酸二氢钾溶液38. 9ml与0.067mol/L磷酸氢二钠溶液61.1ml,混合,pH值为7.0)50ml,温热使溶解,冷却后再稀释至刻度,摇匀。冰冻保存,但不得反复冻融。
胃蛋白酶片的效价测定方法
照紫外可见分光光度法(通则0401)测定。供试品溶液取本品5片,置研钵中,加盐酸溶液适量研磨均匀,全量转移至250m量瓶中,用盐酸溶液稀释至刻度,摇匀,精密量取适量,用盐酸溶液定量稀释制成每1ml中约含0.2~0.4单位的溶液。盐酸溶液、对照品溶液与测定法见胃蛋白酶效价测定项下
双向免疫扩散法测定抗血清效价
实验方法原理 将抗原和相应抗体分别加入同一凝胶板中的相邻小孔中,使两者互相扩散,当扩散到它们的浓度达当量点时(浓度相当)形成沉淀线。如果抗原-抗体的浓度合适时,沉淀线在两孔的中间。如抗体过量,沉淀线靠近抗原孔。如抗原过量,沉淀线靠近抗体孔。此技术可以测定抗血清的效价。此外,根据沉淀融合的情况,还可以
注射用抑肽酶的效价测定方法
取本品5支,分别精密加硼砂-氯化钙缓冲液(pH8.0)2ml溶解后合并,混匀。精密量取适量(约相当于含抑肽酶33.4单位),置20ml量瓶中,用硼砂-氯化钙缓冲液(pH8.0)稀释至刻度,摇匀,精密量取0.5m与胰蛋白酶溶液2ml,置20ml量瓶中,用硼砂-氯化钙缓冲液(pH8.0)稀释至刻度,摇匀
乌司他丁溶液的效价测定方法
效价照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定。胰蛋白酶溶液临用新制,并置冰浴保存。精密称取结晶蛋白酶(每1mg含7500~10000BAEE单位)适量,用冷的氯化钙盐酸溶液(取氯化钙2.94g,加0.001mol/L盐酸溶液o00ml溶解)溶解并稀释制成每1ml中约含0.1mg的溶液底物溶液临用新
效价的概念介绍
效价是指某一物质引起生物反应的功效单位,可用理化方法检测,也可用生物检测方法测定;或生物制品活性(数量)高低的标志,通常采用生物学方法测定。