体外抗体形成细胞检查法(溶血空斑实验PFC)

PFC测定技术又称溶血空斑试验。是一种体外检测单个抗体形成细胞(浆细胞)的方法。自从1963年 Jerne和Nordin首先建立PFC测定技术以来,使免疫学方法得到很大的发展。特别是间接溶血空斑测定法的建立,更扩大了本实验的应用范围。它不仅可以测定产生 IgM 类的抗体产生细胞,而且还可以检测产生其他各类免疫蛋白及其亚类的抗体形成细胞。它不仅可以作为免疫基本理论研究的有力工具,而且还可以作为临床筛检抗肿瘤新药以及研究中药对机体免疫功能的影响(免疫增强剂和免疫抑制剂)的特异指标。溶血空斑试验分直接溶血空斑试验和间接溶血空斑试验。前者是为测定产生 IgM 型抗体的细胞。因为活化补体的能力强,可以不必另加抗 Ig 试剂(显斑剂),也就是只加细胞和补体即可出现空斑,故称直接溶血空斑测定。至于产生其他类型抗体的(如 IgG 或 IgA 等)细胞检测,就需要在试验系统中另加显斑剂(因为这些类别的抗体活化补体的能力弱)也就......阅读全文

关于溶血空斑实验的操作方法介绍

  常用的为SPA-SRBC溶血空斑试验。SPA能与人及多数哺乳动物IgG的Fc段呈非特异性结合,利用这一特征,首先将SPA包被SRBC,然后进行溶血空斑测定,可提高敏感度和应用范围。  在该测试系统中,加入抗人Ig抗体,可与受检细胞产生的免疫球蛋白结合形成复合物,复合物上的Fc段可与连接在SRBC

溶血空斑试验的基本介绍

  溶血空斑试验又称体外抗体形成细胞测定技术。是一种体外检测单个抗体形成细胞(浆细胞)的方法。其基本 原理是将经绵羊红细胞免疫小鼠的脾细胞与一定量的绵羊红细胞混合,在补体参与下, 使抗体形成细胞周围那些受到抗体分子致敏 的绵羊红细胞溶解,形成肉眼可见的溶血空 斑。根据所操作的方法不同可分为直接溶血空

关于溶血空斑试验的基本介绍

  溶血空斑试验又称体外抗体形成细胞测定技术。是一种体外检测单个抗体形成细胞(浆细胞)的方法。其基本 原理是将经绵羊红细胞免疫小鼠的脾细胞与一定量的绵羊红细胞混合,在补体参与下, 使抗体形成细胞周围那些受到抗体分子致敏 的绵羊红细胞溶解,形成肉眼可见的溶血空 斑。根据所操作的方法不同可分为直接溶血空

关于溶血空斑试验的基本信息介绍

  溶血空斑试验又称体外抗体形成细胞测定技术。是一种体外检测单个抗体形成细胞(浆细胞)的方法。其基本 原理是将经绵羊红细胞免疫小鼠的脾细胞与一定量的绵羊红细胞混合,在补体参与下, 使抗体形成细胞周围那些受到抗体分子致敏 的绵羊红细胞溶解,形成肉眼可见的溶血空 斑。根据所操作的方法不同可分为直接溶血空

关于抗原–抗体反应的类型—补体参与的抗原–抗体反应的介绍

  补体一旦被抗原抗体复合物结合后,即不再游离,故可利用这个特性进行免疫反应的研究。补体的溶血、溶菌作用有赖于抗体的存在。当红细胞抗原与相应的红细胞抗体(又称溶血素)作用,有补体参与时,可发生溶血,这称为免疫溶血;体外抗体形成细胞检查法又称溶血空斑试验。如图5所示:在产生抗体的淋巴细胞周围,出现一个

溶血空斑试验的定义和原理

中文名称溶血空斑试验英文名称hemolytic plaque assay定  义一种定量检测特异性抗体生成细胞的试验。即将抗体生成细胞和红细胞混合于凝胶薄层中,抗体生成细胞所释出的抗体与周围红细胞结合,在补体作用下形成溶血空斑,从而进行定量计数。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫

B细胞功能检测

(一)B细胞增殖试验 原理与T细胞增殖试验相同,但刺激物不同,小鼠B细胞可用细菌脂多糖(LPS)作为刺激物,人则用含SPA的金黄色葡萄球菌菌体及抗IgM抗体等刺激。(二)溶血空斑试验 原理:将SRBC免疫的小鼠脾脏(或家兔淋巴结)制成单个细胞悬液,与SRBC在琼脂糖凝胶内混合后倾注于小平皿或玻片上。

B细胞功能检测介绍

一、体内试验 B细胞受抗原或促有丝分裂原刺激后,可行分裂增殖并分化成熟为抗体生成细胞,且分泌相应的Ig。B细胞功能减低或缺陷,可表现为体内Ig和血型抗体量下降或缺如,患者对外源性抗原的应答能力减弱或缺如,仅产生极低或不能产生特异性抗体,故临床定量测定受检者血清中各种Ig量和相应血型抗体,可判断B细胞

B细胞功能的检测

一、体内试验   B细胞受抗原或促有丝分裂原刺激后,可行分裂增殖并分化成熟为抗体生成细胞,且分泌相应的Ig。B细胞功能减低或缺陷,可表现为体内Ig和血型抗体量下降或缺如,患者对外源性抗原的应答能力减弱或缺如,仅产生极低或不能产生特异性抗体,故临床定量测定受检者血清中各种Ig量和相应血型抗体,可判断B

空斑的概念

空斑( lacuna)在将产生大肠杆菌素的细菌和对该种大肠杆菌素敏感的指示菌与软琼脂混合涂在琼脂面上培养时,即可见到单个细胞产生的大肠杆菌素对指示菌起生长抑制作用的小形抑制斑,这就是空斑。初看似如细菌噬菌体形成的噬菌斑,但它没有感染性,为了与噬菌斑相区别,H.Ozeki(1959)将之命名为空斑。

免疫细胞的检测方法

用体外或体内试验对机体的各种参与免疫应答的细胞进行鉴定、计数和功能测定,藉以了解机体的免疫状态,并对某些临床疾病的诊断,预后及疗效观察等也具有一定意义。 一、免疫细胞的分离 体外测定免疫细胞首先要从外周血或淋巴组织中分离所需的细胞。其主要方法是根据细胞的表面标记、理化

免疫细胞的检测方法

用体外或体内试验对机体的各种参与免疫应答的细胞进行鉴定、计数和功能测定,藉以了解机体的免疫状态,并对某些临床疾病的诊断,预后及疗效观察等也具有一定意义。一、免疫细胞的分离体外测定免疫细胞首先要从外周血或淋巴组织中分离所需的细胞。其主要方法是根据细胞的表面标记、理化性状及功能等方面的差别进行设计。

北沙参的药理作用

  1、对小鼠脾脏溶血空斑形成细胞(PFC)的抑制作用:BALB/c小鼠30只等分为5组,每组腹腔注射3×10(2)绵羊红血球(SRBC)致敏。致敏前2天,各用药组分别给予北沙参多糖(GLP)5,50,200和800mg/kg。致敏后第4天颈椎脱臼处死小鼠,参照改良Jernes方法。剖取脾脏制备脾细

关于免疫脾空斑试验的基本信息介绍

  免疫脾空斑试验是测定机体体液免疫(即产生抗体细胞的数量和功能)的一种方法。  通常是以绵羊红细胞免疫小鼠,一定时间后,取脾脏制成匀浆(含有已致敏的抗体形成细胞),与绵羊红细胞混合于软琼脂中制成平板,孵育后,加入补体,再保温一定时间,即可出现肉眼可见的溶血空斑。通过计数每一平板的空斑数,计算出每百

体液免疫的B细胞的基本内容

  原发性免疫缺陷和继发性免疫缺陷均可导致体液免疫功能下降。原发性体液免疫功能缺陷可能由于B细胞分化障碍,细胞内合成Ig功能紊乱或由于抑制性细胞功能过强。继发性体液免疫功能降低可能由于蛋白质大量丢失,蛋白质吸收障碍、营养不良、免疫抑制治疗的副作用,病毒感染(艾滋病)等。在诊断原发性体液免疫功能缺损中

关于B细胞数目及功能的检测的介绍

  原发性免疫缺陷和继发性免疫缺陷均可导致体液免疫功能下降。原发性体液免疫功能缺陷可能由于B细胞分化障碍,细胞内合成Ig功能紊乱或由于抑制性细胞功能过强。继发性体液免疫功能降低可能由于蛋白质大量丢失,蛋白质吸收障碍、营养不良、免疫抑制治疗的副作用,病毒感染(艾滋病)等。在诊断原发性体液免疫功能缺损中

体液免疫功能检查B细胞数目及功能的检测

  原发性免疫缺陷和继发性免疫缺陷均可导致体液免疫功能下降。原发性体液免疫功能缺陷可能由于B细胞分化障碍,细胞内合成Ig功能紊乱或由于抑制性细胞功能过强。继发性体液免疫功能降低可能由于蛋白质大量丢失,蛋白质吸收障碍、营养不良、免疫抑制治疗的副作用,病毒感染(艾滋病)等。在诊断原发性体液免疫功能缺损中

肉苁蓉的免疫系统的作用

  肉苁蓉水提取液50mg/kg、100mg/kg给小鼠灌胃,能显著增加脾脏和胸腺的重量,并能明显增强腹腔巨噬细胞的吞噬能力,增加溶血素和PFC值,提高淋巴细胞转化率和迟发性超敏反应指数,亦可升高cAMP水平,降低 cGMP水平,使cAMP/cGMP比值升高,这可能是其增强腹腔巨噬细胞吞噬功能的原因

溶血实验

  溶血试验是对人体内的红细胞进行红细胞破裂溶解检测。主要用于溶血性贫血的病因诊断。溶血是指红细胞破裂溶解现象。很多理化因素都可以引起溶血。

蚀斑减少中和实验

选择国内外具有代表性的毒株10株,其中HTN型6株(76-118、A9、A16、A537、陈株和LR1)和SEO型4株(UR、沟3、R22和湖北-1),沟3株病毒免疫家兔,采血分离血清,分别与上述病毒株进行PRNT,测定血清中和抗体滴度。

复方红景天对大强度训练大鼠免疫功能的调节作用

摘 要 目的:探讨中医药提高运动成绩、减轻过度训练引致的机体免疫力下降的作用机制。方法:50只大鼠随机分成3组,进行相应的跑台训练和测试。结果:大强度训练大鼠脾细胞抗体形成能力下降、白细胞移动抑制指数升高,且其血浆ACTH和β-EP的含量低于非训练对照组动物。而进行大强度训练的同时服用复方红景天的中

杆状病毒表达系统的空斑纯化法介绍

  由于在重组病毒中多角体基因被外源基因所取代,因此形成的子代病毒不含有包含体,为包含体阴性病毒。包含体阴性病毒与包含体阳性病毒(由野生型病毒形成)在平板中形成的空斑形态是不同的。因此,可在光学显微镜下,利用这一特征筛选出含外源基因的重组病毒并加以纯化[12]。这正是目前使用最普遍的有效方法。  1

主动式PFC与被动式PFC电源有什么不同?(一)

  在早些年主动式PFC电源刚刚步入主流的时候,商家们一度大肆宣传“主动式就是比被动式好”,现在主动式PFC电源已经成为主流,虽然不再需要像当年那样疯狂地推广,但是我们仍然可以在不少电源产品的包装上看到强调主动式PFC的字眼,可见这个观点早已深入人心。那么主动式PFC相比被动式PFC好在哪里

动式PFC与被动式PFC电源有什么不同?(二)

  此外被动式PFC电源对输入电压的稳定性有一定的要求,基本上电压波动的允许范围不会太广。而且由于被动式PFC适合在比较高的电压下使用,因此采用110V输入设计的被动式PFC电源还需要添加一个倍压器,将输入电压从110V增加至220V,以保证PFC电路工作的正常。  什么是主动式PFC?  

ABO新生儿溶血病放散试验异常结果原因的体外模拟实验

   探讨A(或B)型新生儿在新生儿溶血病放散试验中放散出抗-B(或抗-A)的原因.方法 采用体外模拟实验:取O型孕妇血浆2 mL经2-Me破坏后分别与A(或B)型红细胞2mL 37℃孵育lh,分离红细胞和血浆,分离出的血浆再用2 mL A(或B)型红细胞完成2次吸收,检测红细胞吸收前后血浆的IgG

溶血反应实验

实验方法原理 溶菌反应只在某些细菌中出现(如霍乱弧菌)。应用溶血反应是补体结合反应中不可少的因素。溶血反应是由于抗原(红血球)和抗体(溶血素)进行特异性的结合,并吸着了补体,而使红血球在补体的作用下被溶解,于是产生了溶血现象。实验材料 绵羊红血球试剂、试剂盒 溶血素豚鼠血清生理盐水仪器、耗材 小试管

溶血反应实验

免疫血清与其相应的抗原细胞,血球、细菌及其组织细胞相遇,并在补体的参与下可出现溶细胞反应。依抗原、抗体的种类不同可有溶血反应、溶菌反应等。实验方法原理溶菌反应只在某些细菌中出现(如霍乱弧菌)。应用溶血反应是补体结合反应中不可少的因素。溶血反应是由于抗原(红血球)和抗体(溶血素)进行特异性的结合,并吸

江苏大学-检验医学专业实验临床免疫学检验

  抗血清的制备  【原理】:用抗原刺激机体可以产生抗体,抗原的性质、纯度和活性影响其免疫动物后获得的抗体的的特异性和效价。在体外有目的的制备抗原,经初次、再次免疫的过程可以获得高质量的抗体。  【注意事项】  ①制备佐剂时,一定要顺着同一方向用劲磨。  ②检查油包水的方法:培养皿内加水,滴入混匀液

关于抗体形成细胞的简介

  抗体形成细胞antibody-forming cell 是淋巴系细胞有B细胞和T细胞两个系列,其中B细胞是抗体形成细胞前体(antibody-forming cellprecursor),在胞膜表面具有以单一特异性抗体作为抗原受体,一旦与抗原结合就直接或借助于T细胞进行增殖分化,结果成为高速度合

免疫学实验皮肤斑贴实验介绍

  皮肤斑贴实验介绍:  皮肤斑贴实验是研究毒物对皮肤毒性的实验方法之一。把数层纱布折叠成一定大小(方形每边1cm,圆形直径1cm),将受试物原液或稀释液沾湿纱布后紧贴于皮肤上,外盖一层油纸或塑料薄膜,用绷带固定。一般12小时或24小后解开,观察局部反应。  皮肤斑贴实验正常值:  正常人为阴性(-