PC12细胞培养方法步骤
PC12细胞是大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞株,具神经内分泌细胞的一般特征,因其具可传代特点,广泛应用于神经生理和神经药理学研究。1. PC12细胞有两种:未分化型和分化型。其中未分化型的PC12细胞贴壁能力强,传代时需要胰酶消化,形状不规则。分化型PC12细胞传代时不需要胰酶,直接可以吹下来,形状规则。这两种细胞没有很大的区别,但我在实验中发现,未分化型的PC12细胞对药物的敏感性较之分化型的要差一些。2. 由于PC12细胞是一种肿瘤细胞,在传代次数较多后,它的形状和性状会发生改变。这些改变尤见于未分化型PC12细胞。主要是细胞形状变得更加不规则,对药物的敏感性愈加下降。因此,建议长期用PC12细胞作实验的战友最好严格控制细胞的传代次数。3.在复苏细胞时动作一定要迅速,放入温水中1~2min后要马上加入培养液中,培养12~24小时后更换一次培养液,这样不仅可以把DMSO吸掉,而且可以将死亡的细胞也吸掉。细胞一天一看即可,经常......阅读全文
细胞疗法的细胞分类
【DC细胞】 即树突状细胞,发现于1973年。它是机体中功能最强的专职抗原递呈细胞,它能高效地摄取、加工处理和递呈抗原。DC细胞与肿瘤的发生、发展有着密切关系,是激活机体免疫系统、激发抵御癌症侵袭最有效的途径之一。通过大量体外活化培养负载肿瘤抗原的DC细胞,在细胞数量达到规模化后回输给病人,
血细胞分析白细胞
白细胞有五种,按照体积从小到大是:淋巴细胞(人体自身产生的抗体),嗜碱粒细胞,中性粒细胞,单核细胞和嗜酸细胞。 白细胞计数增多见于急性感染、尿毒症、严重烧伤急性出血、组织损伤、大手术后白血病等。 白细胞计数减少见于伤寒及副伤寒、疟疾、再生障碍性贫血急性粒细胞缺乏症、脾功能亢进,X线放射性核素
Treg细胞是什么细胞
调节性T细胞(Regulatory cells,简称Tregs )是一类控制体内自身免疫反应性的T细胞亚群,早期亦称做suppressor T cells。调节性T细胞可分为天然产生的自然调节性T细胞(n T-regs)和诱导产生的适应性调节性T细胞(a T-regs或i T-regs),如Th3、
血细胞分析红细胞
红细胞也称红血球,在常规化验英文常缩写成RBC,是血液中数量最多的一种血细胞,同时也是脊椎动物体内通过血液运送氧气的最主要的媒介,同时还具有免疫功能。成熟的红细胞是无核的,这意味着它们失去了DNA。红细胞也没有线粒体,它们通过葡萄糖合成能量。 形状呈双凹圆盘状,中央较薄。周缘较厚,故在血涂片标
干细胞污染常见细胞
细胞污染是一件非常令人头痛的事情,很多同学平时实验过程中只知道细胞污染了但是并不知道到底是什么污染了细胞,当然处理方法也只有丢掉了,可怕的是有的时候丢掉细胞并不是一种完全的方法,只有清楚的了解污染的种类才能有的放矢的解决污染问题,下面小编就和大家分享一下常见的细胞污染。 1、细菌:细菌在普通
细胞活化与细胞复苏
1. 收到细胞株包裹时, 请检查细胞株冷冻管是否有解冻情形, 若有请立即通知。细胞株请尽速开始培养, 或立即冷冻保存(置于–70 °C, 隔夜后, 移到liq N2)。细胞复苏的原则-快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细
免疫细胞:抗原递呈细胞
1.抗原递呈细胞的概念 在机体的免疫应答过程中,能摄取、加工、处理抗原并将抗原信息提呈给T淋巴细胞的辅佐细胞,称为 抗原提呈细胞(APC)。 2.抗原递呈细胞的种类 抗原提呈细胞分专职性递呈细胞和非专职性递呈细胞两类。单核/巨噬细胞、树突状细胞(DC)和B淋巴细胞等能表达MHC Ⅱ类分子的
ctl细胞是什么细胞
CTL(CytotoxicTLymphocyte,Tc细胞)是细胞毒性T淋巴细胞,也称杀伤性T细胞,是在效应阶段的效应T细胞。它能特异性杀伤带抗原的靶细胞,如移植细胞、肿瘤细胞及受微生物感染的细胞等。Tc细胞的杀伤力较强,可反复杀伤靶细胞,而且在杀伤靶细胞的过程中本身不受损伤。
什么是原代细胞、细胞株、细胞系?
原代细胞(primary cell)是指从机体的组织(如人组织、小鼠组织、大鼠组织和兔组织等)经蛋白酶或其它的方法获得单个细胞并在体外进行模拟机体培养的细胞,称为原代细胞。一般认为,培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。在人工条件下使其原代细胞生存、生长、繁殖和传代,进
STAP细胞丑闻:STAP细胞或为胚胎干细胞
今年4月,调查委员会宣布STAP细胞丑闻初步结论。 虽然一个长时间运行的干细胞研究惨败,但日本理化学研究所(RIKEN)另一个调查委员会近日在东京发布了新报告。报告称,所谓的刺激触发采集功能(STAP)干细胞以及可能衍生自这些细胞的嵌合体小鼠和畸胎瘤,“都来源于受污染的(胚胎干)细胞培养,这个真相
细胞株、细胞系、原代细胞的概念
细胞株(cell strain)是通过选择法或克隆形成法从原代培养细胞中获得具有特殊性质或标志物的细胞称为细胞株。一般认为,细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。细胞系(cell line)是原代细胞经首次传代成功后即为
细胞毒性T细胞杀伤靶细胞的过程
CTL杀伤靶细胞是一个连续过程,可分为三个阶段,主要研究内容如下: 1、效应靶细胞结合:CTL是通过其膜上的受体TCR,即Ti-CD3分子与靶细胞结合,此时膜上的淋巴细胞功能相关抗原Ⅰ与靶细胞膜上的配基Ⅰ,又称细胞内粘附分子相互作用,即靶细胞与效应细胞初步接触。此时亲和力低,为非特异性的,但可
细胞组分和细胞器——细胞器分离
Labeling Microtubules (Molecular Dynamics Inc. )Microtubules are involved in many aspects of cell motion including propulsion, mitosis, growth, and o
什么是浆细胞?浆细胞是B细胞吗?
浆细胞又称效应B细胞。浆细胞大多见于消化管和呼吸道固有膜的结缔组织内。细胞较小,圆形或卵圆形,核圆但偏于细胞一侧,染色质粗,沿核膜呈辐射状排列成车轮状。细胞质呈嗜碱性,染为蓝色。在靠近核处,有一着色浅的区域。近细胞核处有一色较浅而透明的区域。电镜下可见细胞质内含大量密集的粗面内质网,浅染区是高尔
细胞凋亡、细胞坏死和细胞焦亡如何鉴别?
细胞凋亡的检测方法有很多,下面给大家介绍常用的形态学检测方法。光学显微镜和倒置显微镜凋亡细胞的主要特征为核染色质致密深染,形成致密质块,有时可碎裂。在HE染色的组织切片中细胞体积缩小,胞质致密、嗜酸性染色增强,并可形成凋亡小体。在组织中凋亡细胞常以分散单个形式存在,凋亡细胞与周围细胞分离,不引起炎症
Th细胞和Tc细胞到底是什么细胞
(1)Th细胞全称辅助性T细胞(外文名helper T cell),能分泌多种细胞因子。Th均表达CD4,通常所称的CD4+T细胞即指Th。HIV能特异性地破坏Th细胞,导致患者免疫系统瘫痪。(2)Tc 亦称杀伤T细胞(killer T cell,TK),具有杀伤靶细胞活性的T细胞亚群。其表面标志为
脑力智宝对实验性脑缺血大鼠学习记忆与神经细胞凋亡...
脑力智宝对实验性脑缺血大鼠学习记忆与神经细胞凋亡的影响【摘要】 目的研究脑力智宝对实验性脑缺血大鼠学习记忆功能与神经细胞凋亡的影响。方法结扎实验大鼠双侧颈总动脉制作脑缺血模型,Morris水迷宫法测试其学习记忆功能,HE染色法观察其神经细胞形态学改变,TUNEL法检测凋亡细胞。结果脑力智宝能显著缩
设计“杀手细胞”消灭癌细胞
最近,康奈尔大学的生物医学工程师,开发出一种专门的白细胞——被称为“超级自然杀伤细胞”,能够在淋巴结中找到癌细胞,并只有一个目的:摧毁它们。这一突破可停止癌症转移的发生,相关研究结果发表在本月的《Biomaterials》。本文资深作者、生物医学工程教授Michael R. King说:“我们希
关于宿主细胞的细胞介绍
受体细胞也叫宿主细胞。受体细胞有原核受体细胞(最主要是大肠杆菌)、真核受体细胞(最主要是酵母菌)、动物细胞和昆虫细胞(其实也是真核受体细胞)。原核受体细胞中,最常用的宿主细胞是大肠杆菌。
CHL细胞,正常仓鼠肺细胞
污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室 环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养 基配制是减低污染之方法。2.如果细胞发生微生物污染时,应如何处理?直接灭菌后丢弃之。3.购买之细胞冷冻管经解冻后
关于干细胞的细胞简介
干细胞(stem cell,SC)的“干”,译自英文“stem”,意为“茎干”、“干”和“起源”。干细胞群的功能即为控制和维持细胞的再生。一般来说,在干细胞和其终末分化的子代细胞之间存在着被称为“定向祖细胞”的中间祖细胞群,它们具有有限的扩增能力和限制性分化潜能。这些细胞群的功能是增加干细胞每次
裸细胞的细胞功能简介
NK细胞能通过ADCC效应定向杀伤与IgG抗体结合的靶细胞,在机体的抗病毒感染和抗肿瘤免疫方面起着较重要的作用。在病毒感染的早期就能杀伤被病毒感染的靶细胞,在抗原特异性Tc细胞尚未形成前就能清除病毒。已发现T细胞和B细胞正常而NK细胞缺陷的个体,对病毒感染特别敏感,易患威胁生命的病毒感染。已知体
细胞诊断、肿瘤细胞分类要诀
细胞诊断要诀 镜下观察要周到,每个视野不漏掉; 看完背景看细胞,低倍高倍仔细瞧; 先看形态和大小,核浆比例有多少; 核的结构最重要,核质又多又粗糙; 核膜核仁均异常,病理分裂偶见到; 单个细胞不能断,足量细胞方有效; 只有成堆无分散,重复检查再报告。
按细胞比重分离B细胞
按细胞比重分离B细胞1.将2~3ml含3×107纯化的B细胞(B细胞>90%)的细胞悬液加到3ml Percoll溶液(比重1.074)上,水平离心1000×g 20分钟。2.吸去无细胞上清液,交界面的低密度B细胞和大部分Percoll溶液。由于此时细胞沉淀非常松散,需留下约0.2ml Percol
细胞生长检测——直接计数细胞
1、如果靶细胞是帖壁细胞,在细胞因子作用适当时间后,用生理盐水洗去死亡细胞,用0.25%胰蛋白酶液消化细胞。加适量生理盐水吹打,使细胞分散成单个细胞。直接在血细胞计数板上计数细胞。2、如果靶细胞是悬浮细胞,则需要用染色剂区分死细胞和活细胞然后再计数。通常用台盼蓝染色细胞,活细胞可以排除进入细胞的台盼
细胞活性检测Orangu™细胞计数
Orangu™计数法Orangu™ solution(Cell Guidance,货号:OR01-500)是一种无细胞毒性、高灵敏度、比色法,用于测定细胞增殖和细胞毒性的细胞活性试剂。利用WST-8(细胞代谢的一种水溶性的四唑盐)在细胞内线粒体脱氢酶作为电子介质的情况下,它被还原为橙色的甲瓒染料,且
自然杀伤细胞的细胞来源
NK细胞确切的来源还不十分清楚,一般认为直接从骨髓中衍生,其发育成熟依赖于骨髓的微环境。小鼠和人的体外实验表明,胸腺细胞在体外IL-2等细胞因子存在条件下培养也可诱导出NK细胞。小鼠脾脏在体内IL-3诱导下可促进NK细胞的分化。NK细胞主要分布于外周血中,占PBMC5~10%,淋巴结和骨髓中也有NK
《细胞》:细胞坏死能够被控制
美国科学家近日研究发现,破坏一种蠕虫的SRP-6蛋白能加速其细胞的坏死过程。这一发现有助于科学家更好地理解坏死(necrosis)——细胞死亡的方式之一,并找到对抗相关疾病的方法。相关论文发表在9月21日的《细胞》上。 细胞死亡的方式有多种,细胞凋亡(apoptosis)和坏死是比较典型的两种。细胞
细胞因子活化免疫细胞
细胞因子肿瘤治疗中的另一种方法是通过体外与免疫细胞共育,以使这些细胞活化,然后再回输入患者体内,进行过继免疫细胞疗法。在这方面研究得最多的是淋巴细胞激活的杀伤细胞(lymphokine activated killercell,LAK)和肿瘤浸润淋巴细胞(tumor infiltrating l
免疫细胞的免疫细胞种类
T淋巴细胞即胸腺依赖淋巴细胞(thymus dependent lymphocyte)。亦可简称T细胞。来源于骨髓的多能干细胞(胚胎期则来源于卵黄囊和肝)。目前认为,在人体胚胎期和初生期,骨髓中的一部分多能干细胞或前T细胞迁移到胸腺内,在胸腺激素的诱导下分化成熟,成为具有免疫活性的T细胞。成熟的T细