PC12细胞培养方法步骤

PC12细胞是大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞株,具神经内分泌细胞的一般特征,因其具可传代特点,广泛应用于神经生理和神经药理学研究。1. PC12细胞有两种:未分化型和分化型。其中未分化型的PC12细胞贴壁能力强,传代时需要胰酶消化,形状不规则。分化型PC12细胞传代时不需要胰酶,直接可以吹下来,形状规则。这两种细胞没有很大的区别,但我在实验中发现,未分化型的PC12细胞对药物的敏感性较之分化型的要差一些。2. 由于PC12细胞是一种肿瘤细胞,在传代次数较多后,它的形状和性状会发生改变。这些改变尤见于未分化型PC12细胞。主要是细胞形状变得更加不规则,对药物的敏感性愈加下降。因此,建议长期用PC12细胞作实验的战友最好严格控制细胞的传代次数。3.在复苏细胞时动作一定要迅速,放入温水中1~2min后要马上加入培养液中,培养12~24小时后更换一次培养液,这样不仅可以把DMSO吸掉,而且可以将死亡的细胞也吸掉。细胞一天一看即可,经常......阅读全文

外泌体中评估mTBI患者神经退行性病变和细胞毒性标志物

  创伤性脑损伤(TBI)是全球性的公共卫生问题。由于缺乏良好的诊断工具和干预手段,TBI患者数量被严重低估,尤其是在体育运动员和军人群体中。目前TBI的诊断方式只有昂贵的神经影像技术和脑脊液(CSF)检测。轻度创伤性脑损伤(mTBI)更是难以诊断,目前还没有一种可以基于血液诊断的生物标志物。因此迫

新型纳米酶可全周期促糖尿病伤口愈合

  近日,西安交通大学金属材料强度全国重点实验室最新成果发表于《生物材料》。该成果针对糖尿病感染伤口提出了一种具有应用潜力的“全阶段”管理策略,集成感染控制、免疫调节以及促进神经血管生成与细胞外基质重塑于一体,为糖尿病感染伤口的治疗提供了新思路。  糖尿病伤口长期难以愈合,主要归因于其病理性微环境,

液氮罐冻存样品的方法与注意事项

液氮罐冻存样品的方法 :(以独立样品pc12为例)  1、选择处于对数生长期的细胞。一般长约为70%-80%即可冻存,细胞数目过少或过多都不宜冻存,因为复苏后细胞生存率会降低;收集细胞24小时前换液一次。  2、用培养液直接将细胞消化下来,离心,1000转, 5min;  3、吸去上清,在离心管中加

PLoS-ONE:利用外来体来拦截细胞交流

  利用干细胞的再生医学疗法是治疗多种损伤非常有前途的方法,移植的干细胞可以分化成为任何类型的机体细胞,包括神经元细胞等,神经元则可以同已分隔开的骨髓进行重新连接来修复机体瘫痪。  有研究证明多种类型的因子可以有效诱导移植的干细胞分化成为神经元,而近日刊登在国际杂志PLOS ONE上的一项研究中,塔

新疆理化所研究发现草花总黄酮可用于治疗阿尔茨海默病

  阿尔茨海默病(Alzheimer’S disease,AD)是一种多发于中老年期的中枢神经系统退行性疾病,也是我们常说的老年痴呆症,患者典型的临床症状为进行性的记忆障碍和认知功能不断恶化,日常生活能力进行性减退,并具有各种神经症状和行为障碍。伴随社会老龄化的进程,AD的发病率逐年上升,已经成

营养所研究发现RNA编辑酶在细胞分泌过程中的调控功能

  最近,美国《实验生物学联合会会刊》 (The FASEB Journal)发表了中科院上海生命科学研究院营养所刘勇研究组在RNA编辑与细胞分泌功能研究方面所取得的最新进展——Deficiency in RNA editing enzyme ADAR2 impairs regula

浅谈细胞成像

许多科学研究人员通过加入特定化合物刺激细胞后继而来观察细胞的 2D 或 3D 结构变化,借此来阐释复杂的细胞内信号通路变化。科学研究者利用新的细胞成像和分析技术,大大提升了他们对未知领域的理解水平。 拥有一台低成本、高效率、高通量检测分析仪器,例如 ImageXpress® 细胞成像分析系统

浅谈细胞成像

2018082457566652.JPG 许多科学研究人员通过加入特定化合物刺激细胞后继而来观察细胞的 2D 或 3D 结构变化,借此来阐释复杂的细胞内信号通路变化。科学研究者利用新的细胞成像和分析技术,大大提升了他们对未知领域的理解水平。 拥有一台低成本、高效率、高通量检测分

遗传发育所TrkB受体囊泡运输机制研究取得进展

  神经营养因子家族成员BDNF是调控高等动物中枢神经系统发育与稳态的重要信号分子,通过结合神经元细胞膜表面受体TrkB调节神经元的发育、分化、功能维持以及突触可塑性。BDNF结合诱导TrkB形成二聚体并发生自体磷酸化,其磷酸化位点将募集下游效应因子,从而激活下游信号通路。BDNF-TrkB信号复合

用新型自动细胞成像系统和细胞分析软件进行基...(一)

用新型自动细胞成像系统和细胞分析软件进行基于细胞实验的表型分析简介当需要持续获得高质量、高精确的数据时,那么迫切需要一台全自动基于细胞检测实验的多参数分析系统。一台紧凑的,全自动微孔板图像分析系统可用于多参数实验,如利用诱导多功能干细胞 (iPSC) 分化为心肌细胞,神经细胞和肝细胞研究中。

关于细胞凋亡的讨论

细胞调亡与坏死鉴别的简便方法 midas1、PI和Hoechst33342双标:PI、Hoechst33342均可与细胞核DNA(或RNA)结合。但是PI不能通过正常的细胞膜,Hoechst则为膜通透性的荧光染料,故细胞在处于坏死或晚期调亡时细胞膜被破坏,这时可为PI着红色。正常细胞和中早期调亡细胞

DNA转染

DNA转染·         Transfection of Mammalian Cells Using Lipofectamine (LTI)·         Guide to Eukaryotic Transfections with Cationic Lipid Reagents (PDF)

吖啶橙/溴化乙锭双荧光染色

AO / EB原理与流程zhongyisheng:1、原理:吖啶橙(AO)能透过胞膜完整的细胞,嵌入细胞核DNA,使之发出明亮的绿色荧光。溴乙锭(E仅能透过胞膜受损的细胞,嵌入核DNA,发橘红色荧光。凋亡的细胞呈现为染色增强,荧光更为明亮,均匀一致的圆状或固缩状、团块状结构。非凋亡细胞核呈现荧光深浅

假人参的化学成分

  假人参叶草酸含量较高,富含钙、磷、铁、抗坏血酸、胡萝卜素、尼克酸、核黄素、硫胺素等成分,含钙、铁、核黄素等含量较丰富”。假人参根含环烯醚菇,类似人参,含三菇皂昔,尚含香豆素类、挥发油和糖类等。[5]  挥发油类  陈建伟采用气相色谱-质谱分析技术对假人参挥发油的化学成分进行了研究,得出其化学成分

EB病毒感染的人外周淋巴细胞-JVM2细胞

EB病毒感染的人外周淋巴细胞 JVM-2细胞 新皮层的发生过程是胚胎发育期神经发生、迁移和分化各个过程精妙调控的结果。新皮层中神经干细胞分化和子代细胞命运决定的分子机制(Molecular Mechanisms)是神经生物学领域目前研究的热点及难点。该领域的研究主要集中在转录因子、微环境结构和信号通

细胞,大鼠胰岛细胞瘤细胞

INS-1细胞大鼠胰岛细胞瘤细胞1) 来源:传秋生物细胞库2) 形态:贴壁 多角形3) 含量:>1x106 个/mL4) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性5) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装6) 运输:顺丰发货培养条件:培养基:RPMI1640+10%FBS+0.05mM 2-巯D基D乙

细胞免疫细胞免疫

  几乎所有的细胞表面都有MHC-I,CD8+T细胞能识别细胞表面的MHCI+抗原复合物,识别后进行攻击。  根据功能不同T细胞可分为三类,其表面均有相应的受体,具有抗原特异性:细胞毒性T细胞(Cytotoxic T cells,Tc)、辅助性T细胞(helper T cells,TH)、抑制性T细

关于多聚赖氨酸的配制、保存、使用总结与问题1

因为自己做PC12细胞培养,想在接种前将培育皿用多聚赖氨酸包被,到论坛里搜索了下,关于多聚赖氨酸的帖子不少,看了一些帖子,将大部分收集在此。个人觉得关于多聚赖氨酸的配置、保存、使用各方面问题,这些帖子里面都解释了。注:我只是摘了一个帖子里某段或某句话。一般一段话来自某一位朋友。一、常用的多聚赖氨酸包

自然杀伤细胞NK细胞的细胞表型

与T细胞、B细胞相比,NK细胞表面标志的特异性是相对的。人NK细胞mIg-,部分NK细胞CD2、CD3和CD8阳性,表达IL-2受体β链 (P75,CD122),CD11b/CD18阳性。常用检测NK细胞的标记有CD16、CD56、CD57、CD59、CD11b、CD94和LAK-1。一种稳定表达在

细胞毒性T细胞的细胞试验

  该试验测定被特定抗原攻击后抗原特异性CD8+T淋巴细胞的裂解或者引起的炎症反应。用细胞毒性T淋巴细胞(CTL)测试细胞介导免疫需要成功的抗原呈递,以及随之产生的细胞因子、细胞接触依赖的信号转导来产生记忆T淋巴细胞,这是T细胞应答的基础。CTL试验曾用于小鼠和大鼠,也用于大型动物模型,但标准的临床

自然杀伤细胞NK细胞的细胞功能

自然杀伤活性由于NK细胞的杀伤活性无MHC限制,不依赖抗体,因此称为自然杀伤活性。NK细胞胞浆丰富,含有较大的嗜天青颗粒,颗粒的含量与NK细胞的杀伤活性呈正相关。NK细胞作用于靶细胞后杀伤作用出现早,在体外1小时、体内4小时即可见到杀伤效应。NK细胞的靶细胞主要有某些肿瘤细胞(包括部分细胞系)、病毒

细胞培养——细胞生长和细胞毒性

Articles posted in the Method Froum  Cell Viability AssayDye exclusion method  Viable Cell Counts Using Trypan Blue (Gibco)   Soft Agar Assay For Colo

细胞组分和细胞器——细胞骨架

Fixation and Immunofluorescence of the Cytoskeleton (Mitchison Lab)  Recycling Tubulin (Mitchison Lab)  Labeling Tubulin and Quantifying Labeling Stoi

稀有细胞和少量细胞的单细胞分离

 对于单细胞转录组学,单细胞蛋白组学和单细胞基因组学而言,高效的单细胞获取方式至关重要。传统的流式细胞分选仪是一种常用的细胞分离工具,但是在实际操作过程中一些技术壁垒。除了操作难度高之外,细胞在传统流式中分离时需要经过相当长度的共用管路,从而产生了大量的死体积。为了弥补这些损失,就往往需要用到大量的

《细胞—干细胞》推出“神经干细胞”专题

  最新一期《细胞—干细胞》(Cell Stem Cell)杂志推出了神经干细胞专题“Neural Stem Cells”。这一专题收集了神经干细胞研究方面的综述和最新进展文章,就这一领域的发展进行了探讨。     神经干细胞(neuralstemcell,NSCs)是一类具有分裂潜能和自更新能力的

细胞组分和细胞器——细胞膜

Isoelectric Focussing of Membrane Protein by Slab Gel Method (Hancock Lab)  Isolation of Outer Membrane Protein from P.Aeruginosa with Octyl-Poe (Hanc

稀有细胞和少量细胞的单细胞分离

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细胞活化与细胞复苏

1. 收到细胞株包裹时, 请检查细胞株冷冻管是否有解冻情形, 若有请立即通知。细胞株请尽速开始培养, 或立即冷冻保存(置于–70 °C, 隔夜后, 移到liq N2)。细胞复苏的原则-快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细

细胞培养——细胞保藏

Working Cell Bank (Contributed by Nanci Donacki)Provides detailed protocol for establishing a working cell bank    Master Cell Bank (Contributed by Na

Treg细胞是什么细胞

调节性T细胞(Regulatory cells,简称Tregs )是一类控制体内自身免疫反应性的T细胞亚群,早期亦称做suppressor T cells。调节性T细胞可分为天然产生的自然调节性T细胞(n T-regs)和诱导产生的适应性调节性T细胞(a T-regs或i T-regs),如Th3、