细胞培养基构成、配置、灭菌和储存2

(8) 在细胞培养过程中,建议不加或加少量的抗生素,如血清的浓度较低则所加抗生素的量也要相应降低一些。(9) 建议用1N HCl或1N NaOH来调节培养基的pH,因为用碳酸氢钠调pH值对培养液的渗透压影响比较大。如下图所示:图2 MEM SLM(SLM120)在相同pH值时所加的碳酸氢钠、氢氧化钠的量及所对应的培养液渗透压图3 199(MD502)在相同pH值所加的碳酸氢钠、氢氧化钠的量及所对应的培养液渗透压4、灭菌方法培养基的灭菌方法主要有两种,高压除菌及0.22um微孔滤膜过滤除菌。与过滤相比,高压灭菌的工作强度小,成本较低,但易造成营养成分的流失,而且在多次加样(无菌谷氨酰胺溶液,无菌碳酸氢钠溶液等)过程中容易造成二次污染。大多数培养基采用0.1~0.2μm孔径的微孔滤膜进行过滤灭菌,并且已成为培养基除菌的发展方向,它可低限度地减少培养基的营养损失。4.1 高压灭菌 某些培养基(如MEM)可进行高压灭菌,例如清大天一......阅读全文

灭菌器控制方式及配置

  灭菌器控制方式  采用微电脑智能化全自动控制,控制灭菌压力,温度,时间;  超温自动保护置:超过设定温度,自动切断加热电源;  门安全连锁装置:内腔有压力,门盖无法打开,ZL装置;  低水位报警:缺水时能自动切断电源,声光报警,进口断水检测装置;  漏电保护:配置漏电保护装置;  温度动态数字显

灭菌器控制方式及配置

  灭菌器控制方式  采用微电脑智能化全自动控制,控制灭菌压力,温度,时间;  超温自动保护置:超过设定温度,自动切断加热电源;  门安全连锁装置:内腔有压力,门盖无法打开,ZL装置;  低水位报警:缺水时能自动切断电源,声光报警,进口断水检测装置;  漏电保护:配置漏电保护装置;  温度动态数字显

细胞结构成分的离心分离技术2

3、等密度离心法等密度离心法(isodensity centrifugation)根据Stokes公式,当颗粒密度(ρp)等于介质密度(ρM)时,离心时颗粒悬浮于介质中不移动。等密度离心法就是根据这一原理进行的。采用包括各种颗粒密度范围的梯度介质,把要分离的样品放在密度梯度液表面或者混悬于梯度液

细胞培养基废液抽吸系统的灭菌操作介绍

实验室使用的细胞培养基废液抽吸系统是生物实验室常备的一款仪器,由于受使用环境和用途的影响,该产品在使用时必须对盛装培养基废液的瓶体、接触废液的吸头和管路等部件进行灭菌消毒。如果不进行符合是要求的灭菌操作,或者灭菌不彻底,很有可能会污染实验样品,造成更大的损失。首先在进行前期选购时,客户就应当了解清楚

跑电泳时缓冲液和培养基配置方法

(1)将缓冲液配方中的成分分别以10-100倍配成母液储存,需要的时候只需将相应的母液混合,补加水稀释即可;(2)配培养基时通常会忘记各成分的量,如配LB时的三个成分不记得到底哪个是5 g,哪个要10个,因此可以在常用的试剂瓶的标签上注明所需的量,如配LB时,在NaCl瓶外注明10 g/L, y

四大酵母培养基的配置原理和方法

一、目的要求 了解合成培养基、半合成培养基和天然培养基的配制原理。   学习和掌握麦芽汁培养基、马铃薯葡萄糖培养基、豆芽汁葡萄糖培养基和察氏培养基的配制方法。 二、基本原理 麦芽汁培养基和马铃薯葡萄糖培养基被广泛用于培养酵母菌和霉菌。马铃薯葡萄糖培养基有时也可用于培养放线菌。豆芽汁葡萄糖培养基也

四大酵母培养基的配置原理和方法

实验概要了解合成培养基、半合成培养基和天然培养基的配制原理。学习和掌握麦芽汁培养基、马铃薯葡萄糖培养基、豆芽汁葡萄糖培养基和察氏培养基的配制方法。实验原理麦芽汁培养基和马铃薯葡萄糖培养基被广泛用于培养酵母菌和霉菌。马铃薯葡萄糖培养基有时也可用于培养放线菌。豆芽汁葡萄糖培养基也是培养酵母菌及霉菌的一种

常用培养基配置的配方

LB培养基将下列组分溶解在0.9L水中:蛋白胨10g酵母提取物5g氯化钠10g如果需要用1NNaOH(~1ml)调整pH至7.0,再补足水至1L。注:琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。SOB培养基将下列组分溶解在0.9L水中:蛋白胨20g酵母提取物5g氯化钠0.5g1m

关于培养基的配置介绍

  1.配料  配方换算→在容器中加入少量水(蒸馏水,自然水)→按照配方称取各种药品(依次加入)→加足所需水量(一药一勺,取药后立即盖上瓶盖)。  2.溶解  淀粉溶解:少量冷水调成糊状  加热溶解,特别是加有琼脂的培养基,一定要煮沸,琼脂的熔解温度95-97℃ ,且需要边加热边搅拌以防止烧焦。  

配置培养基的基本步骤

  1、配制溶液  向容器内加入所需水量的一部分,按照培养基的配方,称取各种原料,依次加入使其溶bai解,最后补足所需水分。对蛋白胨、肉膏等物质,需加热溶解,加热过程所蒸发的水分,应在全部原料溶解后加水补足。  配制固体培养基时,先将上述已配好的液体培养基煮沸,再将称好的琼脂加入,继续加热至完全融化

灭菌锅培养基灭菌不彻底的原因分析

培养基灭菌不彻底的原因判断(1)如果发生污染的菌种是耐热菌,说明灭菌时因灭菌强度不够而导致发生污染, 如果是接种操作、菌袋破损或封口问题,则应该是耐热和不耐热菌均有。(2)如果发生污染的时间较早,通常是培养基灭菌不彻底或接种所带来的污染。

神经细胞培养基总结2

许多PNS类型的神经元在离体状态时表现出简单的营养需求,只需提供单一的营养因子就足以使其在低密度时增殖。例如,大鼠交感神经元仅需NGF即能存活,在其生存期间,这些神经元可在严格局限条件下生长好几个月(即在无血清培养基中、或缺乏胶质细胞、或在化学限定基质上)。有证据表明NGF是活体中交感神经元存活的生

关于培养基的灭菌处理

  要获得微生物纯培养,必须避免杂菌污染,因此对所用器材及工作场所进行消毒与灭菌。对培养基而言,更是要进行严格的灭菌。对培养基一般采取高压蒸汽灭菌,一般培养基用1.05kg/cm2,121.3℃条件下维持15-30min可达到灭菌目的。在高压蒸汽灭菌过程中,长时间高温会使某些不耐热物质遭到破坏,如使

培养基用湿热灭菌方法

培养基在制备后的24小时内完成灭菌工序。高压灭菌的原理是:在密闭的蒸锅内,其中的蒸汽不能外溢,压力不断上升,使水的沸点不断提高,从而锅内温度也随之增加。在0.1MPa的压力下,锅内温度达121℃。在此蒸汽温度下,可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。注意完全排除锅内空气,使锅内全部是水蒸气,灭菌才

灭菌后培养基保存时间

一般情况会人为规定一个周期,常见的是7天。另外关于灭菌后培养基的效期,应该是用验证来证明。看你打算规定几天,用验证的数据来说话。比如说是定的7天,那么在7天后做无菌和培养基灵敏度的实验就可以了。

培养基的制备及灭菌

一 、实验目的1、明确培养基配制的原理及方法,了解培养基中各成分的作用;2、掌握高压蒸汽灭菌的原理和方法;3、学会包扎吸管、培养皿,制作棉塞。 二、基本原理(一)培养基的制备原理培养基是按照微生物生长发育的需要,用不同组分的营养物质调制而成的营养基质。人工制备培养基的目的,在于给微生物创造一个良好的

用1×储存液配制培养基

实验方法原理检査配方设计:如果配方完全,在加完血清之后可直接使用;如果配方不全(例如,缺少谷氨酰胺),则加人相应的浓缩液。实验材料培养基储存液谷氨酰胺血清抗生素青霉素链霉素试剂、试剂盒吸液管实验步骤1. 检查培养基的配方,并决定需要添加何种添加剂,例如谷氨酰胺。2. 将培养基放在超净台内,如果需要可

用1×储存液配制培养基

方案11.1 玻璃器皿的准备和灭菌实验方法原理检査配方设计:如果配方完全,在加完血清之后可直接使用;如果配方不全(例如,缺少谷氨酰胺),则加人相应的浓缩液。实验材料培养基储存液                                                              

用1×储存液配制培养基

实验方法原理 检査配方设计:如果配方完全,在加完血清之后可直接使用;如果配方不全(例如,缺少谷氨酰胺),则加人相应的浓缩液。实验材料 培养基储存液谷氨酰胺血清抗生素青霉素链霉素试剂、试剂盒 吸液管实验步骤 1. 检查培养基的配方,并决定需要添加何种添加剂,例如谷氨酰胺。2. 将培养基放在超净台内,如

用1×储存液配制培养基

方案11.1 玻璃器皿的准备和灭菌             实验方法原理 检査配方设计:如果配方完全,在加完血清之后可直接使用;如果配方不全(例如,缺少谷氨酰胺),则加人相

“血液增菌培养基”储存问题

“血液增菌培养基”储存问题不当应怎样处理呢“血液增菌培养基”储存问题不当应怎样处理呢?将“血液增菌培养基”购买回来之后若因储存等问题不当发霉后要怎样去处理呢?对此,上海乔羽生物技术顾问建议您来看以下几个解决方法供您参考,希望会对您的实验有帮助。由于霉菌孢子漂浮于培养瓶的整个空间,包括果蝇身上,如将此

细胞的构成

生物界由两种细胞构成:原核细胞和真核细胞。生命最先演化成原核细胞;地球上存在生命的最初的15亿年间,原核细胞是唯一的生存形式。化石证据可推断出生命演化成真核细胞是在大约21亿年以前。真核细胞最大的特点是其内部包含了以膜封围的细胞核来存储DNA。真核(eukaryotic)一词源自希腊语,其中前缀“e

细胞培养培养基(基础培养基、血清、无血清培养基、...2

基础培养基绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上,添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。最广泛应用的培养基是 Eearle`s MEM 的混合物,其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸,维生素的范围亦很广,另外常规含有无机盐和

灭菌锅的配置及使用方法

  产品配置  安全阀:超过额定压力,释放压力;  手 轮:旋转罗盘式开启盖门,简单方便(适合于40升以上产品);  压力表:指示压力显示;  密封圈:自涨式密封圈;底部活动轮;  蒸汽收集瓶:3L,聚乙烯材质;(适合于内排式和带干燥型)具备产品医疗器械注册证,每台经过技术监督局严格检测(每台设备配

固体培养基的配置有哪些

  一、极限培养基平板  800 ml水加入15 g琼脂,高压灭菌15 min。然后加人200 ml无菌的5 X 极限培养液和碳源。待冷却至50°C,加人补充成分。每个10 cm平板倒入32~40 ml培养基(每升培养基可制作25〜30个平板)。于室温干燥2〜3天,或将平板的上盖稍 微打开,于37°

培养基的配制及配置原则

  培养基的配制  1.配料  配方换算→在容器中加入少量水(蒸馏水,自然水)→按照配方称取各种药品(依次加入)→加足所需水量(一药一勺,取药后立即盖上瓶盖)。  2.溶解  淀粉溶解:少量冷水调成糊状  加热溶解,特别是加有琼脂的培养基,一定要煮沸,琼脂的熔解温度95-97℃ ,且需要边加热边搅拌

细胞实验技术及细胞培养基本知识2

(二)人类淋巴母细胞建株方法1、4ml肝素抗凝血于离心管中,加入2ml RPMI 1640。  2、混匀后沿管壁缓慢加到预置有4ml淋巴细胞分离液的液面上静置30min。  3、1500rpm,15min,吸取白细胞层(第二层)于另一离心管中。  4、加RPMI 1640 5ml洗涤白细胞两次。  

植物组培所需的仪器和培养基灭菌的简介

  仪器设备:  培养室,高压灭菌锅,水浴锅,解剖刀,三角烧瓶( 100mL ),烧杯,量筒,组培瓶,组培盖或封口膜,棉线,接种箱或超净工作台,分析天平,长镊子,剪刀,容量瓶,移液管,牛皮纸。  培养基灭菌:  将配好的培养基加入琼脂加热溶解,调至 pH 5.8 ,趁热分装于 100 mL组培瓶中,

培养皿和培养基的灭菌方法有什么不同

  培养皿灭菌方法有干热灭菌和湿热灭菌,干热灭菌方法:包在铁质容器内,进行高温烘烤。湿热用牛皮纸包起来放在高压锅中进行高压灭菌。  培养基灭菌方法有湿热灭菌、煮沸灭菌和过滤除菌,煮沸灭菌在电磁炉或者微波炉内进行煮沸即可,过滤除菌适用于不能高温处理的培养。

细胞培养培养基(基础培养基、血清、无血清培养基、抗...2

基础培养基绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上,添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。最广泛应用的培养基是 Eearle`s MEM 的混合物,其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸,维生素的范围亦很广,另外常规含有无机盐和