细胞培养基构成、配置、灭菌和储存2
(8) 在细胞培养过程中,建议不加或加少量的抗生素,如血清的浓度较低则所加抗生素的量也要相应降低一些。(9) 建议用1N HCl或1N NaOH来调节培养基的pH,因为用碳酸氢钠调pH值对培养液的渗透压影响比较大。如下图所示:图2 MEM SLM(SLM120)在相同pH值时所加的碳酸氢钠、氢氧化钠的量及所对应的培养液渗透压图3 199(MD502)在相同pH值所加的碳酸氢钠、氢氧化钠的量及所对应的培养液渗透压4、灭菌方法培养基的灭菌方法主要有两种,高压除菌及0.22um微孔滤膜过滤除菌。与过滤相比,高压灭菌的工作强度小,成本较低,但易造成营养成分的流失,而且在多次加样(无菌谷氨酰胺溶液,无菌碳酸氢钠溶液等)过程中容易造成二次污染。大多数培养基采用0.1~0.2μm孔径的微孔滤膜进行过滤灭菌,并且已成为培养基除菌的发展方向,它可低限度地减少培养基的营养损失。4.1 高压灭菌 某些培养基(如MEM)可进行高压灭菌,例如清大天一......阅读全文
细胞培养基构成、配置、灭菌和储存2
(8) 在细胞培养过程中,建议不加或加少量的抗生素,如血清的浓度较低则所加抗生素的量也要相应降低一些。(9) 建议用1N HCl或1N NaOH来调节培养基的pH,因为用碳酸氢钠调pH值对培养液的渗透压影响比较大。如下图所示:图2 MEM SLM(SLM120)在相同pH值时所加的碳酸氢钠、氢氧化钠
细胞培养基构成、配置、灭菌和储存1
细胞培养基的种类繁多,细胞培养方式也较多,如何正确地使用培养基及最大程度地保持培养基的营养以维持细胞的生长,对每个细胞培养工作者都很重要。培养基的使用依据不同的培养基种类、培养方式、细胞种类的不同而存在差异。1、细胞培养液的构成细胞培养液指细胞生长的液体环境,一般指完全培养液,添加了血清、水解乳蛋白
微生物培养基配置与灭菌方法及步骤
微生物培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。由于微生物具有不同的营养类型,对营养物质的要求也各不相同,加之研究的目的不同,所以培养基的种类很多,使用的原料也各有差异,但从营养角度分析,微生物培养基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、无机盐、生长素以及水分等。另外,培养基还应具有适宜的pH值、一
培养基的制备和灭菌
一、实验目的 了解并掌握培养基的配制、分装方法;2掌握各种实验室灭菌方法及技术。二、实验原理 培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。由于微生物具有不同的营养类型,对营养物质的要求也各不相同,加之实验和研究的目的不同,所以培养基的种类很多,使用的原料也各有差异,但从营养角度分析,培养基中一般含有
培养基配制和灭菌指南
培养基配制好后需要立即灭菌培养基,是指供给微生物、植物或动物(或组织)生长繁殖的,由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质,也是细胞生长和繁殖的生存环境。培养基种类很多,根据配
细胞培养基的灭菌方法
培养基的灭菌方法主要有两种,高压除菌及过滤除菌。与过滤相比,高压灭菌的工作强度小,成本较低,但易造成营养成分的流失,而且在多次加样(无菌谷氨酰胺溶液,无菌碳酸氢钠溶液等)过程中容易造成二次污染。 大多数培养基采用0.1~0.2μm孔径的微孔滤膜进行过滤灭菌,并且已成为培养基除菌的发展方向,它可
培养基的配制及高压蒸汽灭菌2
4.过滤趁热用滤纸或多层纱布过滤,以利于某些实验结果的观察.一般无特殊要求情况下,这一步是可以省去的;5.分装按实验要求,可将配制的培养基分装入试管内或者三角烧瓶内:(1)液体分装分装高度以试管高度的1/4左右为宜。分装三角瓶的量则根据需要而定,一般以不超过三角瓶容积的一半为宜。(2)固体分装分装试
灭菌锅的配置
安全阀:超过额定压力,释放压力; 手 轮:旋转罗盘式开启盖门,简单方便(适合于40升以上产品); 压力表:指示压力显示; 密封圈:自涨式密封圈;底部活动轮; 蒸汽收集瓶:3L,聚乙烯材质;(适合于内排式和带干燥型)具备产品医疗器械注册证,每台经过技术监督局严格检测(每台设备配一套检测证书
细胞的构成和分类
生物界由两种细胞构成:原核细胞和真核细胞。生命最先演化成原核细胞;地球上存在生命的最初的15亿年间,原核细胞是唯一的生存形式。化石证据可推断出生命演化成真核细胞是在大约21亿年以前。真核细胞最大的特点是其内部包含了以膜封围的细胞核来存储DNA。真核(eukaryotic)一词源自希腊语,其中前缀“e
灭菌器产品配置
安全阀:超过额定压力,释放压力; 手 轮:旋转罗盘式开启盖门,简单方便(适合于40升以上产品); 压力表:指示压力显示; 密封圈:自涨式密封圈;底部活动轮; 蒸汽收集瓶:3L,聚乙烯材质;(适合于内排式和带干燥型)具备产品医疗器械注册证,每台经过技术监督局严格检测(每台设备配一套检测证书
高压灭菌锅产品配置
安全阀:超过额定压力,释放压力;手 轮:旋转罗盘式开启盖门,简单方便(适合于40升以上产品);压力表:指示压力显示;密封圈:自涨式密封圈;底部活动轮;蒸汽收集瓶:3L,聚乙烯材质;(适合于内排式和带干燥型)具备产品医疗器械注册证,每台经过技术监督局严格检测(每台设备配一套检测证书)
培养基怎么配置
(1)配制母液。把培养基m的必需元素按原配方量的50倍/100倍或1000倍称量后制成一种浓溶液,这种浓溶液叫母液在配制培养基时按比例分别量取母液稀释到所需的浓度即可母液配好后贴上标签,放在0~4℃的冰箱中可使用半年到1年,这样傲可节省许多时间可能产生化学反应的或溶解后产生沉淀的不能放在同一个容器m
培养基怎么配置
(1)配制母液。把培养基m的必需元素按原配方量的50倍/100倍或1000倍称量后制成一种浓溶液,这种浓溶液叫母液在配制培养基时按比例分别量取母液稀释到所需的浓度即可母液配好后贴上标签,放在0~4℃的冰箱中可使用半年到1年,这样傲可节省许多时间可能产生化学反应的或溶解后产生沉淀的不能放在同一个容器m
培养基灭菌方法
培养基的灭菌方法1、高压蒸汽灭菌:高压蒸汽灭菌适合于耐高温培养基、接种器械和蒸馏水的灭菌。培养基在爱制备过程中混入各种杂菌,分装后应立即灭菌,至少应在24h内完成灭菌工作。灭菌时一般是在0.105MPa压力下,温度121℃时,灭菌15~30min即可。消毒时间不宜过长,也不能超过规定的压力范围,否则
培养基灭菌方法
1.灼烧灭菌将微生物的接种工具,如接种环、接种针或其他金属用具,直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧,可以迅速彻底地灭菌。此外,在接种过程中,试管口或瓶口等容易被污染的部位,也可以通过火焰灼烧来灭菌。2.干热灭菌将灭菌物品放入干热灭菌箱内,在160~170℃加热1~2h可达到灭菌的目的。能耐高温的、需要
培养基的灭菌
一般培养基可采用121°C高压蒸汽灭菌15分钟的方法。在各种培养基制备方法中,如无特殊规定,即可用此法灭菌。 某些畏热成分,如糖类,应另行配成20%或更高的浓液,以过滤或间歇灭菌法消毒,以后再用无菌操作技术、定量加于培养基。明胶培养基亦应用较低温度灭菌。血液、体液和抗生素等则应以无菌操作技术抽
培养基灭菌方法
培养基的灭菌方法1、高压蒸汽灭菌:高压蒸汽灭菌适合于耐高温培养基、接种器械和蒸馏水的灭菌。培养基在爱制备过程中混入各种杂菌,分装后应立即灭菌,至少应在24h内完成灭菌工作。灭菌时一般是在0.105MPa压力下,温度121℃时,灭菌15~30min即可。消毒时间不宜过长,也不能超过规定的压力范围,否则
配制培养基的方法和灭菌小知识
培养基,是指供给微生物、植物或动物(或组织)生长繁殖的,由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质,也是细胞生长和繁殖的生存环境。 培养基种类很多,根据配制原料的来源可分为自然培
高压灭菌锅产品配置介绍
产品配置安全阀:超过额定压力,释放压力;手 轮:旋转罗盘式开启盖门,简单方便(适合于40升以上产品);压力表:指示压力显示;密封圈:自涨式密封圈;底部活动轮;蒸汽收集瓶:3L,聚乙烯材质;(适合于内排式和带干燥型)具备产品医疗器械注册证,每台经过技术监督局严格检测(每台设备配一套检测证书)
培养基的配置原则
1、选择适宜的营养物质 总体而言,所有微生物生长繁殖均需要培养基含有碳源、氮源、无机盐、生长因子、水及能源,但由于微生物营养类型复杂,不同微生物对营养物质的需求是不一样的,因此首先要根据不同微生物的营养需求配制针对性强的培养基。自养型微生物能从简单的无机物合成自身需要的糖类、脂类、蛋白质、核酸
培养基的配置原则
1、选择适宜的营养物质总体而言,所有微生物生长繁殖均需要培养基含有碳源、氮源、无机盐、生长因子、水及能源,但由于微生物营养类型复杂,不同微生物对营养物质的需求是不一样的,因此首先要根据不同微生物的营养需求配制针对性强的培养基。自养型微生物能从简单的无机物合成自身需要的糖类、脂类、蛋白质、核酸、维生素
培养基的湿热灭菌
灭菌原理培养基在制备后的24h内完成灭菌工序。高压灭菌的原理是:在密闭的蒸锅内,其中的蒸气不能外溢,压力不断上升,使水的沸点不断提高,从而锅内温度也随之增加。在0.1MPa的压力下,锅内温度达121℃。在此蒸气温度下,可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。注意完全排除锅内空气,使锅内全部是水蒸气,
培养基灭菌技术应用
培养基灭菌技术应用1、种子罐、发酵罐、计量罐、补料罐等的空罐灭菌及管道灭菌从有关管道通入蒸汽,使罐内蒸汽压力达0.147 MPa,维持45 min,灭菌过程中,羊源性成分核酸检测PCR-荧光探针试剂盒从所有液位以上的阀门、边阀排出空气,并使蒸汽通过这些阀门以防止出现死角。灭菌完毕后,关闭蒸汽,待罐内
培养基的灭菌流程
原理培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。由于微生物具有不同的营养类型,对营养物质的要求也各不相同,加之实验和研究的目的不同,所以培养基的种类很多,使用的原料也各有差异,但从营养角度分析,培养基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、无机盐、生长素以及水分等。另外,培养基还应具有适宜的pH值、一定
血清培养基如何灭菌
1、未加血清的培养基叫做"基础培养基",先把基础培养基灭菌,凉至45-50度(可以放在水浴锅内,温度可以按培养基的说明掌握),备用。2、你所加的血清要保证是无菌的,如果你是直接购买成品血清那一般不会有问题,如果是自己找来的血清需要滤过除菌,或者采血及分离血清全程严格的无菌操作,不过这些操作都太麻烦了
储存培养基注意事项
培养基的配置以及生产都是经过层层把关才得到的心血,对于专业、一流的科研人员来说,培养基的贮存对于诸如培养基的服务怎么样之类的评估有着不言而喻的意义。倘若有口碑的培养基因为未能得到妥善的保管而功亏一篑,势必是十分痛心疾首的一件事。以下是结合权威的实验人员的实战经验,总结出的培养基的贮存注意事项。贮存培
培养基的制备及储存
1、常用玻璃仪器的准备 制备培养基所用的吸管、锥形瓶、毛细吸管、平皿等玻璃仪器用前要用肥皂水洗刷后用清水冲洗干净,晾干后备用。 (1)试管管口用棉花塞或硅氟塑料试管塞塞好,再用布或报纸包扎好,121℃高压蒸汽灭菌20℃后烘干,备用。(2)吸管及滴管先用少许棉花塞于吸口端(防止污染物吸出,或橡皮帽内的
细胞结构成分的离心分离技术2
3、等密度离心法等密度离心法(isodensity centrifugation)根据Stokes公式,当颗粒密度(ρp)等于介质密度(ρM)时,离心时颗粒悬浮于介质中不移动。等密度离心法就是根据这一原理进行的。采用包括各种颗粒密度范围的梯度介质,把要分离的样品放在密度梯度液表面或者混悬于梯度液
灭菌器的配置结构介绍
安全阀:超过额定压力,释放压力; 手 轮:旋转罗盘式开启盖门,简单方便(适合于40升以上产品); 压力表:指示压力显示; 密封圈:自涨式密封圈;底部活动轮; 蒸汽收集瓶:3L,聚乙烯材质;(适合于内排式和带干燥型)具备产品医疗器械注册证,每台经过技术监督局严格检测(每台设备配一套检测证书
灭菌器配置及如何使用
灭菌器配置 安全阀:超过额定压力,释放压力; 手 轮:旋转罗盘式开启盖门,简单方便(适合于40升以上产品); 压力表:指示压力显示; 密封圈:自涨式密封圈;底部活动轮; 蒸汽收集瓶:3L,聚乙烯材质;(适合于内排式和带干燥型)具备产品医疗器械注册证,每台经过技术监督局严格检测(每台设备