胶质细胞培养

取材及胶质细胞的混合培养1、P2 SD大鼠经低温麻醉后以碘酒和75%乙醇消毒,无菌操作下,断头放入预冷的D-Hanks液中,在解剖显微镜下取大脑皮层并除去脑膜。2、剪碎组织成1mm3大小,加入胰酶-EDTA消化液并放入37℃孵箱内消化20min,中间摇晃一次。3、随后用滴管吸出组织转移到装有预冷的MEM+10%FBS(Glial Medium,GM)的离心管内终止消化液作用5min。4、吸出组织转移到另一支装有冷的GM的离心管内,用火焰抛光的巴斯德滴管吹打数次,静置后取上清并吸到另一支离心管内。重复上述步骤2~3次。5、所得上清于800r/min离心5min,弃上清,管内加入新鲜GM并吹打成单细胞悬液。细胞计数,调整细胞密度按1.5×105/cm2种入 25cm2培养瓶,放入孵箱培养。以后每隔2~3d进行全量换液。摇床振摇分离星形胶质细胞和寡突胶质细胞培养至7~10天,换液后放入孵箱继续培养24h,取出拧紧培养瓶盖,于37℃恒温......阅读全文

胶质细胞培养

取材及胶质细胞的混合培养1、P2 SD大鼠经低温麻醉后以碘酒和75%乙醇消毒,无菌操作下,断头放入预冷的D-Hanks液中,在解剖显微镜下取大脑皮层并除去脑膜。2、剪碎组织成1mm3大小,加入胰酶-EDTA消化液并放入37℃孵箱内消化20min,中间摇晃一次。3、随后用滴管吸出组织转移到装有预冷的M

神经胶质细胞的培养

  (一)雪旺细胞       雪旺细胞(Schwann cell,SC)是外周神经系统最主要的胶质细胞,也是外周神经的成髓鞘细胞;它形成髓鞘,或包裹轴突而不形成髓鞘。雪旺细胞的功能极其活跃,一旦神经受损,它能反应性分裂增殖,分泌神经营养因子,产生细胞外基质和细胞粘附分子,对神经元及其轴突起营养和修

小胶质细胞原代培养

实验方法原理 利用混合胶质细胞培养物分层生长,以及小胶质细胞半悬浮生长的原理,通过摇床震荡法,将皮层来源的混合胶质细胞培养物最上层的小胶质细胞震摇下来继续培养,达到分离和纯化小胶质细胞的目的。实验材料 新生1-3d的仔鼠试剂、试剂盒 含10%胎牛血清的DMEM培养基D-PBS液消化液(0.25%胰蛋

神经胶质细胞培养实验

酶消化法 胰蛋白酶消化法             实验方法原理 胶质细胞具有复杂多样的结构和表达丰富的分泌产物,它含有大部分神经递质、神经肽、激素及神经营养因子受体、离子通

神经胶质细胞培养方法

神经细胞(神经元)不易培养,只有在适宜情况下,如接种在胶原底层上,或加入神经生长因子和胶质细胞因子时,可出现一定程度的分化,长出突起等现象,但很难使之增殖。而神经胶质细胞是神经组织中比较容易培养的成分。人、鼠等脑组织即可用于神经胶质细胞培养,不仅能获得生长的胶质细胞,也可形成能传代的二倍体细胞系。一

神经胶质细胞培养方法

神经细胞(神经元)不易培养,只有在适宜情况下,如接种在胶原底层上,或加入神经生长因子和胶质细胞因子时,可出现一定程度的分化,长出突起等现象,但很难使之增殖。而神经胶质细胞是神经组织中比较容易培养的成分。人、鼠等脑组织即可用于神经胶质细胞培养,不仅能获得生长的胶质细胞,也可形成能传代的二倍体细胞系。一

培养基神经胶质细胞培养方法

 神经细胞(神经元〕不易培养基,只有在适宜情况下,如接种在胶原底层上,或加入神经生长因子和胶质细胞因子时,可出现一定程度的分化,长出突起等现象,但很难使之增值。而神经胶质细胞是神经组织中比较容易培养的成分。培养方法如下:1、从手术室无菌取脑髓灰质或白质后,仔细剥除脑膜、血管和纤维成分,置Hanks液

正常大鼠小胶质细胞的培养

实验材料:1. 新生大鼠或小鼠;2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2;3. 培养用液:含10%的胎牛血清的MEM培养液,补加5μg/ml牛胰岛素、2%葡萄糖及抗生素;4. CFS-Ⅰ刺激因子:小胶质细胞在体外培养条件下一般不分裂,

小胶质细胞原代培养实验

实验方法原理利用混合胶质细胞培养物分层生长,以及小胶质细胞半悬浮生长的原理,通过摇床震荡法,将皮层来源的混合胶质细胞培养物最上层的小胶质细胞震摇下来继续培养,达到分离和纯化小胶质细胞的目的。实验材料新生1-3d的仔鼠试剂、试剂盒含10%胎牛血清的DMEM培养基D-PBS液消化液(0.25%胰蛋白酶+

小胶质细胞原代培养实验

基本方案             实验方法原理 利用混合胶质细胞培养物分层生长,以及小胶质细胞半悬浮生长的原理,通过摇床震荡法,将皮层来源的混合胶质细胞培养物最上层的小胶质细胞震摇下

胶质瘤干细胞培养

胶质瘤是颅内最常见的肿瘤,病因不清。切除后容易复发,放射治疗和化疗效果不理想。近年来从成年的脑组织中可以培养出神经干细胞,传统的观点认为,胶质瘤中只含有胶质细胞,没有神经元。近期的研究证明,胶质瘤在体外分化为神经元和星形胶质细胞,证明了胶质瘤中存在干细胞的可能性。这种细胞能够同时表达神经元和星形胶质

星形胶质细胞(astrocyte)原代培养

星形胶质细胞来源于2天的大鼠。断头后的大鼠大脑收集在含有11mM 碳酸氢钠,71mM葡萄糖和1%抗菌素的DMEM溶液中。移除脑膜,血管和白质。大脑皮层用机械分裂法进行匀浆,然后将细胞悬液经230μm,104μm 和73.3μm孔的铁丝网依次过滤。然后用700g 速度10分钟离心收集细胞,

少突胶质细胞原代培养

少突胶质细胞来源于1-2 天的大鼠。断头后大鼠大脑收集到Ham’s F-12培养液中,移除脑膜和血管。皮质用机械匀浆进行匀浆然后将细胞悬液依次通过230μm和104μm尼龙网进行过滤。细胞通过1000rpm 7分钟离心进行收集,用添加12.5%胎牛血清的DMEM进行重悬细胞。最后以2.0×1

大鼠星型胶质细胞培养实验

酶消化法 胰酶消化法 胰蛋白酶消化法             实验方法原理 大鼠星形胶质细胞原代培养后,作胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫细胞化学染色鉴定,应用缺

皮层星形胶质细胞的原代培养

实验方法原理 利用星形胶质细胞、少突胶质细胞和小胶质细胞生长存在时间上的差异、细胞生长方式及细胞对培养层黏附性不同等特性,用37℃恒温摇床从培养的皮层来源的混合胶质细胞中去除少突胶质细胞和小胶质细胞,其中星形胶质细胞的贴附力最强。用这种方法获得的星形胶质细胞纯度很高(95%以上),且细胞具有较好的增

大鼠星型胶质细胞培养实验

酶消化法 胰酶消化法 胰蛋白酶消化法             实验方法原理 大鼠星形胶质细胞原代培养后,作胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫细胞化学染色鉴定,应用缺

细胞技术专题:大鼠星型胶质细胞培养实验

大鼠星型胶质细胞培养可以:(1)用于神经系统发育、分化及再生等基础研究;(2)脑缺血预处理上调神经保护蛋白的机制研究;(3)脑损伤和脑疼痛的研究;(4)新蛋白的功能研究。  实验方法酶消化法 胰酶消化法 胰蛋白酶消化法 实验材料大鼠胚胎 试剂、试剂盒L-15培养基 胶原酶 Dnase D-MEM-B

神经胶质细胞培养实验_酶消化法

神经胶质细胞培养可以:(1)获得神经胶质细胞;(2)用于神经胶质细胞电生理特性,如膜电位、去极化等;(3)用于免疫应答研究。实验方法原理胶质细胞具有复杂多样的结构和表达丰富的分泌产物,它含有大部分神经递质、神经肽、激素及神经营养因子受体、离子通道、神经活性氨基酸亲和载体、细胞识别分子,并能分泌多种神

大鼠视神经少突胶质细胞培养

实验方法原理 采用视神经,DMEM/F12条件培养基培养,观察细胞形态及生长,并进行免疫组织化学鉴定。实验材料 Wistar大鼠试剂、试剂盒 亚硒酸钠腐胺转铁蛋白胰岛素甲状腺素黄体酮谷氨酰胺小牛血清兔抗鼠GC抗体仪器、耗材 眼科剪滴管离心机培养皿 CO2培养箱实验步骤 一、实验步骤1.  取新生2

皮层星形胶质细胞的原代培养实验

贴附差异法             实验方法原理 利用星形胶质细胞、少突胶质细胞和小胶质细胞生长存在时间上的差异、细胞生长方式及细胞对培养层黏附性不同等特性,用37℃恒温摇床从培养的

神经胶质细胞培养实验_酶消化法

神经胶质细胞培养可以:(1)获得神经胶质细胞;(2)用于神经胶质细胞电生理特性,如膜电位、去极化等;(3)用于免疫应答研究。实验方法原理胶质细胞具有复杂多样的结构和表达丰富的分泌产物,它含有大部分神经递质、神经肽、激素及神经营养因子受体、离子通道、神经活性氨基酸亲和载体、细胞识别分子,并能分泌多种神

正常小鼠原代脑星形胶质细胞培养

一、实验试剂 1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1 × PBS (pH 7.4 )+ 1% P/S4、染色液

皮层星形胶质细胞的原代培养实验

贴附差异法             实验方法原理 利用星形胶质细胞、少突胶质细胞和小胶质细胞生长存在时间上的差异、细胞生长方式及细胞对培养层黏附性不同等特性,用37℃恒温摇床从培养的

培养小胶质细胞用哪种细胞株比较好

培养小胶质细胞用哪种细胞株比较好小胶质细胞在脑缺血缺氧等中枢神经系统病变中发挥着既保护又损伤的“双刃剑”作用。不同损伤刺激条件下,其功能状态不同,造成这种变化的机制目前不清

大鼠视神经少突胶质细胞培养实验

牛血清培养法             实验方法原理 采用视神经,DMEM/F12条件培养基培养,观察细胞形态及生长,并进行免疫组织化学鉴定。

振荡摇床法纯化培养少突胶质细胞实验

实验方法原理利用少突胶质细胞、星形胶质细胞和小胶质细胞生长存存时间上的差异,以及细胞生长方式、细胞对培养层黏附性不同等特性,用37℃恒温摇床从培养的混合胶质细胞中分离少突胶质前休细胞,然后再利用差速贴壁的原理用塑料培养皿或培养瓶除去纯化后污染的星形胶质细胞以获得高纯度的少突胶质细胞,并在体外诱导分化

振荡摇床法纯化培养少突胶质细胞实验

基本方案             实验方法原理 利用少突胶质细胞、星形胶质细胞和小胶质细胞生长存存时间上的差异,以及细胞生长方式、细胞对培养层黏附性不同等特性,用37℃恒温摇床从培养

大鼠视神经少突胶质细胞培养实验

牛血清培养法             实验方法原理 采用视神经,DMEM/F12条件培养基培养,观察细胞形态及生长,并进行免疫组织化学鉴定。

小胶质细胞和星形胶质细胞的区别

小胶质细胞(microglia)是神经胶质细胞的一种,相当于脑和脊髓中的巨噬细胞,是中枢神经系统(CNS)中的第一道也是最主要的一道免疫防线。小胶质细胞大约占大脑中的神经胶质细胞的20%。小胶质细胞不停地清除着中枢神经系统中的损坏的神经,斑块及感染性物质。无数临床上和神经病理学研究表明激活的小胶质细

大鼠视神经少突胶质细胞培养实验——牛血清培养法

大鼠视神经少突胶质细胞培养可以:(1)获得大鼠视神经少突胶质细胞;(2)用于视神经损伤修复研究;(3)用于少突胶质细胞相关课题研究。实验方法原理采用视神经,DMEM/F12条件培养基培养,观察细胞形态及生长,并进行免疫组织化学鉴定。实验材料Wistar大鼠试剂、试剂盒亚硒酸钠腐胺转铁蛋白胰岛素甲状腺