小胶质细胞原代培养实验
实验方法原理利用混合胶质细胞培养物分层生长,以及小胶质细胞半悬浮生长的原理,通过摇床震荡法,将皮层来源的混合胶质细胞培养物最上层的小胶质细胞震摇下来继续培养,达到分离和纯化小胶质细胞的目的。实验材料新生1-3d的仔鼠试剂、试剂盒含10%胎牛血清的DMEM培养基D-PBS液消化液(0.25%胰蛋白酶+0.04%的EDTA)仪器、耗材37℃恒温摇床实验步骤1按照培养少突胶质细胞的方法,待10d后细胞分层生长。显微镜下可见满视野圆形、折光性强的小胶质细胞,附着在贴壁生长、紧密连接在一起、铺满培养瓶的星形胶质细胞层上面,甚至可见许多圆形小胶质细胞飘落在培养液中,此时可以开始纯化。2.将培养瓶固定到37℃恒温摇床上,80-200r/min,振摇2h左右。3收集振摇下来的小胶质细胞,种植到多聚赖氨酸包被的培养皿中,加入新的含10%胎牛血清的DMEM培养基继续培养,每2-3d换液1次。4.小胶质细胞在体外较难进一步分裂增殖,但如果根据实验需要......阅读全文
小胶质细胞原代培养实验
实验方法原理利用混合胶质细胞培养物分层生长,以及小胶质细胞半悬浮生长的原理,通过摇床震荡法,将皮层来源的混合胶质细胞培养物最上层的小胶质细胞震摇下来继续培养,达到分离和纯化小胶质细胞的目的。实验材料新生1-3d的仔鼠试剂、试剂盒含10%胎牛血清的DMEM培养基D-PBS液消化液(0.25%胰蛋白酶+
小胶质细胞原代培养实验
基本方案 实验方法原理 利用混合胶质细胞培养物分层生长,以及小胶质细胞半悬浮生长的原理,通过摇床震荡法,将皮层来源的混合胶质细胞培养物最上层的小胶质细胞震摇下
小胶质细胞原代培养
实验方法原理 利用混合胶质细胞培养物分层生长,以及小胶质细胞半悬浮生长的原理,通过摇床震荡法,将皮层来源的混合胶质细胞培养物最上层的小胶质细胞震摇下来继续培养,达到分离和纯化小胶质细胞的目的。实验材料 新生1-3d的仔鼠试剂、试剂盒 含10%胎牛血清的DMEM培养基D-PBS液消化液(0.25%胰蛋
皮层星形胶质细胞的原代培养实验
贴附差异法 实验方法原理 利用星形胶质细胞、少突胶质细胞和小胶质细胞生长存在时间上的差异、细胞生长方式及细胞对培养层黏附性不同等特性,用37℃恒温摇床从培养的
皮层星形胶质细胞的原代培养实验
贴附差异法 实验方法原理 利用星形胶质细胞、少突胶质细胞和小胶质细胞生长存在时间上的差异、细胞生长方式及细胞对培养层黏附性不同等特性,用37℃恒温摇床从培养的
星形胶质细胞(astrocyte)原代培养
星形胶质细胞来源于2天的大鼠。断头后的大鼠大脑收集在含有11mM 碳酸氢钠,71mM葡萄糖和1%抗菌素的DMEM溶液中。移除脑膜,血管和白质。大脑皮层用机械分裂法进行匀浆,然后将细胞悬液经230μm,104μm 和73.3μm孔的铁丝网依次过滤。然后用700g 速度10分钟离心收集细胞,
少突胶质细胞原代培养
少突胶质细胞来源于1-2 天的大鼠。断头后大鼠大脑收集到Ham’s F-12培养液中,移除脑膜和血管。皮质用机械匀浆进行匀浆然后将细胞悬液依次通过230μm和104μm尼龙网进行过滤。细胞通过1000rpm 7分钟离心进行收集,用添加12.5%胎牛血清的DMEM进行重悬细胞。最后以2.0×1
皮层星形胶质细胞的原代培养
实验方法原理 利用星形胶质细胞、少突胶质细胞和小胶质细胞生长存在时间上的差异、细胞生长方式及细胞对培养层黏附性不同等特性,用37℃恒温摇床从培养的皮层来源的混合胶质细胞中去除少突胶质细胞和小胶质细胞,其中星形胶质细胞的贴附力最强。用这种方法获得的星形胶质细胞纯度很高(95%以上),且细胞具有较好的增
皮层星形胶质细胞的原代培养实验——贴附差异法
皮层星形胶质细胞的原代培养可应用于:(1)细胞保种;(2)皮层星形胶质细胞功能研究。实验方法原理利用星形胶质细胞、少突胶质细胞和小胶质细胞生长存在时间上的差异、细胞生长方式及细胞对培养层黏附性不同等特性,用37℃恒温摇床从培养的皮层来源的混合胶质细胞中去除少突胶质细胞和小胶质细胞,其中星形胶质细胞的
小鼠原代小胶质细胞吞噬功能的分析
实验概要本实验主要介绍从小鼠大脑分离的神经胶质细胞的吞噬功能。实验步骤为了检测小胶质细胞的吞噬功能,利用凋亡的神经祖细胞作为目标,因为在体外环境下它能最模拟自然条件下小胶质细胞的吞噬目标。1. 将神经祖细胞(NPC)置于0.1M PBS 2mg/ml木瓜蛋白酶(Worthington)溶液中进行分离
小鼠原代小胶质细胞吞噬功能的分析
实验概要本实验主要介绍从小鼠大脑分离的神经胶质细胞的吞噬功能。实验步骤为了检测小胶质细胞的吞噬功能,利用凋亡的神经祖细胞作为目标,因为在体外环境下它能最模拟自然条件下小胶质细胞的吞噬目标。1. 将神经祖细胞(NPC)置于0.1M PBS 2mg/ml木瓜蛋白酶(Worthington)溶液中进行分离
正常小鼠原代脑星形胶质细胞培养
一、实验试剂 1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1 × PBS (pH 7.4 )+ 1% P/S4、染色液
正常大鼠小胶质细胞的培养
实验材料:1. 新生大鼠或小鼠;2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2;3. 培养用液:含10%的胎牛血清的MEM培养液,补加5μg/ml牛胰岛素、2%葡萄糖及抗生素;4. CFS-Ⅰ刺激因子:小胶质细胞在体外培养条件下一般不分裂,
细胞原代培养实验
胰酶消化法 组织块直接培养法 实验方法原理 将动物机体的各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理,分散成
细胞原代培养实验
细胞原代培养可以:(1)为研究生物体细胞的生长、代谢、繁殖提供有力的手段;(2)为传代培养创造条件;(3)服务于临床实践,用于药物筛选等。实验方法胰酶消化法组织块直接培养法实验方法原理将动物机体的各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理,分散成单细胞,置合
细胞原代培养实验
胰酶消化法 组织块直接培养法 实验方法原理 将动物机体的各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理,分散成
超实用原代细胞培养小知识
很多老师在设计科研实验的时候都会很迷茫,到底用什么细胞好? 越来越多的老师开始倾向于原代细胞的科研实验,在设计实验中,原代细胞和细胞株到底该怎么选择呢?原代细胞的定义:原代细胞的培养是指直接从机体取下细胞、组织和器官后立即进行培养。因此,较为严格地说是指成功传代之前的培养,此时的细胞保持原有细胞的基
细胞的原代培养实验
实验方法原理原代培养是直接从生物体获取细胞进行培养,由于细胞刚刚从活体组织分离出来,故更接近于生物体内的生活状态。这一方法可为研究生物体细胞的生长、代谢、繁殖提供有力的手段,同时也为以后传代培养创造条件。最常用的原代培养有组织块培养和分散细胞培养。组织块培养是将剪碎的组织块直接移植在培养瓶壁上,加入
肿瘤细胞原代培养实验
组织块法 酶消化法 脱落细胞法 实验方法原理 肿瘤细胞的原代培养与正常细胞的原代培养的条件基本相似。一般常用原代细胞的基础培养基,10%血
细胞的原代培养实验
实验方法原理 原代培养是直接从生物体获取细胞进行培养,由于细胞刚刚从活体组织分离出来,故更接近于生物体内的生活状态。这一方法可为研究生物体细胞的生长、代谢、繁殖提供有力的手段,同时也为以后传代培养创造条件。最常用的原代培养有组织块培养和分散
肿瘤细胞原代培养实验
组织块法 酶消化法 脱落细胞法 实验方法原理 肿瘤细胞的原代培养与正常细胞的原代培养的条件基本相似。一般常用原代细胞的基础培养基,10%血
肿瘤细胞原代培养实验
实验方法原理 肿瘤细胞的原代培养与正常细胞的原代培养的条件基本相似。一般常用原代细胞的基础培养基,10%血清浓度即可,在原代培养时需加入原代细胞培养的特制添加物,或原患者血清(1%-2%)以利细胞生长。用细胞生长因子如胰岛素、氢化可的松、雌激素等等。也可以考虑动物媒介培养。根据细胞种类不同选用
细胞的原代培养实验
实验方法原理 细胞培养(Cell culture)是模拟机体内生理条件,将细胞从机体中取出,在人工条件下使其生存、生长、繁殖和传代,进行细胞生命过程、细胞癌变、细胞工程等问题的研究。近年来,广泛地应用于分子生物学、遗传学、免疫学、肿瘤学、细胞工程等领域,发展成一种重要生物技术,并取得显著成就
细胞的原代培养实验
原代培养 实验方法原理 原代培养是直接从生物体获取细胞进行培养,由于细胞刚刚从活体组织分离出来,故更接近于生物体内的生活状态。这一方法可为研究生物体细胞的生
神经胶质细胞培养实验
酶消化法 胰蛋白酶消化法 实验方法原理 胶质细胞具有复杂多样的结构和表达丰富的分泌产物,它含有大部分神经递质、神经肽、激素及神经营养因子受体、离子通
神经细胞原代培养实验
实验方法原理 神经细胞的原代培养是尽 量 创造最适合于各类神经细胞生长的体外环境,获得状态良好,纯度较高细胞的方法 。 脑部组织来源的各种神经细胞的培养具有相似的取材过程和部分通用的培养条件。
小鼠肝细胞原代培养实验
胰酶消化法 实验方法原理 将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。
小鼠肝细胞原代培养实验
胰酶消化法 实验方法原理 将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。
小鼠肝细胞原代培养实验
小鼠肝细胞原代培养可以:(1)用于细胞保种;(2)用于分子生物学研究;(3)用于基因治疗研究。实验方法胰酶消化法实验方法原理将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料小鼠试剂、试剂盒DMEM 无血清DMEM
神经细胞原代培养实验
实验方法原理 神经细胞的原代培养是尽 量 创造最适合于各类神经细胞生长的体外环境,获得状态良好,纯度较高细胞的方法 。 脑部组织来源的各种神经细胞的培养具有相似的取材过程和部分通用的培养条件。