反相离子对色谱分离水溶性维生素
一、目的要求 1.掌握反相离子对色谱分离水溶性纤维素的方法。 2.了解反相离子对色谱分离水溶性纤维素的原理及方法特点。 二、基本原理 水溶性纤维素包括:VB1 (硫胺素),VB2(核黄素),VB5(烟酰胺,烟酸),VB6(吡哆醛、吡哆醇),VB11(叶酸),VB12(钴 维生素)和VC等。在用反相离子对色谱法测定中,阳离子A+(样品离子)和反离子B-(烷基磺酸根离子)先形成离于对,再在 流动相和固定相中分配, 保留时间为: tR=tM (1+ EA,B[B-]水相/β) 式中,β为相比,tM为死时间,EA,B为平衡常数。 可见样品的保留时间受离子对试剂的浓度和可逆过程的总平衡常数的影响。因此,对混合水溶性纤维素分离的影响, 除反离子的浓度外,还有流动相的pH值,甲醇与水的配比,有机添加剂三乙胺(TEA)浓度和柱温。TEA作为流动相的添加 剂,可减少碱性样......阅读全文
水溶性维生素的测定
一、维生素B1的测定 VB1又叫硫胺素 1、食品中VB1的存在形式 ⑴ 常以游离态存在; ⑵复合脂形式存在(磷蛋白); ⑶ 辅羧酶形式存在 VB1在酵母、米糠、麦胚、花生、黄豆以及绿色的蔬菜和牛乳、蛋黄中比较丰富,动物组织不如植物含量丰富。 2、VB1的性质 ⑴ VB1在中性、碱
水溶性维生素概述(二)
(二)维生素B2、维生素PP和维生素B6 维生素B2是由核醇(ribitol)与异咯嗪(isoalloxazine)结合构成的,由于异咯嗪是一种黄色色素,所以维生素B2又称为核黄素。维生素B2为桔黄色针状结晶,溶于水呈绿色荧光,在碱性溶液中受光照射时极易破坏,因此维生素B2应贮于褐色容器,
反相色谱
根据流动相和固定相相对极性不同,液相色谱分为正相色谱和反相色谱。流动相极性大于固定相极性的情况,称为反相色谱。非极性键合相色谱可作反相色谱。在现代液相色谱中应用最广泛,现代液相色谱分析工作的70%以上是在非极性键合固定相上进行的。
根据分类机理的不同高效液相色谱仪分类
根据分离机理的不同,高效液相色谱可分为液-固吸附色谱、液-液分配色谱(正、反相)、离子交换色谱、离子对色谱和分子排阻色谱。1.液固色谱使用固体吸附剂,色谱柱上分离组分的原理是根据固定相对组分的不同吸附力进行分离 分离过程是吸附-解吸平衡过程。 常用的吸附剂是粒径为5-10μ m的硅胶或氧化铝
维生素检测方法五:高效液相色谱法
这种方法是当前被应用最为广泛的一种维生素检测方法,具有操作简便、灵敏度高、检出限低等特点,可用于脂溶性维生素:VA,VD,VE,VK和水溶性维生素:VC、VB、叶酸、泛酸等含量的测定。利用反相色谱柱,根据不同维生素的性质选择相应的流动相和梯度洗脱程序进行有效分离,所得结果重现性好,精密度高,加标回收
反相键合相色谱仪的分离机制
典型的反相键合相色谱仪是采用非极性键合相和极性流动相组成的色谱体系,固定相常用十八烷基(ODS或C18)键合相,流动相常用甲醇-水或乙腈-水。非典型反相键合相色谱仪是采用弱极性或中等极性键合相和极性大于固定相的流动相组成的色谱体系。反相键合相表面具有非极性烷基官能团和未被取代的硅醇基,硅醇基具有吸附
反相色谱分离后如何快速从流动相中得到产品?
可以考虑先在低温下,减压旋蒸除去其中的有机溶剂,然后用萃取的方法(如乙醚、氯仿萃取等)把产品萃取出来,然后再低温再旋蒸,这样,就可以不将温度升得很高而得到产品。如果要直接蒸掉流动相,水泵的真空度要注意(要检查气密性),否则蒸水会很慢。一般比较好的泵在60-70度即可蒸掉水,如果泵的真空度不好,可能需
反相色谱分离极性物质的高水流动相的色谱填料塌陷
在如今的色谱分析应用中,反相色谱无疑是应用的zui为广泛的色谱分离模式.但是当用反相色谱法分离极性化合物时,因为溶解度的因素很多极性化合物更适用于用高水流动相,有的甚至要在非常高的水流动相时色谱柱才具有保留能力,一些非常高极性的化合物甚至要用100%的水作流动相.而反相色谱柱的固定相通常疏水性很强,
反相色谱柱
反相色谱柱
反相色谱介绍
反相液相色谱柱效高、分离能力强、保留机理清楚,是液相色谱分离模式中使用zui为广泛的一种,对于生物大分子、蛋白质及酶的分离分析,反相液相色谱正受到越来越多的关.反相色语法是以表面非极性载体为固定相,面以比固定相极性强的溶剂为流动相的—种液相色谱分离模式.反相色谱固定相大多是硅胶表面键合疏水基团,基于
反相色谱RPC
反相色谱( RPC)是高效液相色谱HPLC最受欢迎的一个应用,尤其对蛋白的表征非常有用。因为样品的洗脱与其增水性有很大关系,一般不可能在洗脱时间(体积)的基础上识别被分离的样品。通常,每一洗脱片段都必须用其它技术进行进一步的分离和分析,才能得到蛋白质分子的分子行为表征。在 HPLC系统的基础
反相色谱RPC
反相色谱( RPC)是高效液相色谱HPLC最受欢迎的一个应用,尤其对蛋白的表征非常有用。因为样品的洗脱与其增水性有很大关系,一般不可能在洗脱时间(体积)的基础上识别被分离的样品。通常,每一洗脱片段都必须用其它技术进行进一步的分离和分析,才能得到蛋白质分子的分子行为表征。 在 HPLC系统
反相色谱RPC
反相色谱( RPC)是高效液相色谱HPLC最受欢迎的一个应用,尤其对蛋白的表征非常有用。因为样品的洗脱与其增水性有很大关系,一般不可能在洗脱时间(体积)的基础上识别被分离的样品。通常,每一洗脱片段都必须用其它技术进行进一步的分离和分析,才能得到蛋白质分子的分子行为表征。 在 HPLC系统
离子色谱仪的分离模式解析
离子色谱仪的分离模式有离子交换色谱、离子排斥色谱和离子对色谱等。一、离子交换色谱:离子交换色谱使用的是低交换容量的离子交换剂,交换剂的表面有离子交换基团。带负电荷的交换基团(如磺酸基和羧酸基)可用于阳离子的分离,带正电荷的交换基团(如季胺盐)可用于阴离子的分离。阴离子的分离过程:由于静电场相互作用,
离子色谱仪的分离模式解析
离子色谱仪的分离模式有离子交换色谱、离子排斥色谱和离子对色谱等。一、离子交换色谱:离子交换色谱使用的是低交换容量的离子交换剂,交换剂的表面有离子交换基团。带负电荷的交换基团(如磺酸基和羧酸基)可用于阳离子的分离,带正电荷的交换基团(如季胺盐)可用于阴离子的分离。阴离子的分离过程:由于静电场相互作用,
离子对色谱(ionpair-chromatography,-IPC)-介绍
无机离子以及离解很强的有机离子通常可以采用离子交换色谱或离子排斥色谱进行分离。有很多大分子或离解较弱的有机离子需要采用通常用于中性有机化合物分离的反相(或正相)色谱。然而,直接采用正相或反相色谱又存在困难,因为大多数可离解的有机化合物在正相色谱的硅胶固定相上吸附太强,致使被测物质保留值太大、出现拖尾
反相色谱的反相介质是什么?
反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据溶质极性(疏水性)的差别进行溶质分离与纯化的洗脱色谱法。与HIC一样,RPC中溶质也通过疏水性相互作用分配于固定相表面,但是,RPC固定相表面完全被非极性基团所覆盖,表现出强烈的疏水性。因此,必须用极性有机溶剂(如
离子对色谱的
对色谱柱伤害较大。离子对试剂会对色谱柱造成不可逆的伤害,离子对试剂和固定相结合产生不可逆吸附,进而影响固定相活性位点。比如十八烷基硅胶键合色谱柱,离子对试剂会影响色谱柱键合,从而达到分析样品的作用。这种反应对色谱柱影响很大,而且离子对试剂很难从色谱柱上冲洗干净,会大大缩短色谱柱的使用寿命。实验条件不
买亲水色谱柱系列套餐就送电子血压计
参加活动的产品 1. Venusil MP C18 2. Venusil ASB C18 3. Venusil HILIC 活动细则 1. AQ-1 系列(订货号:QQ952505-0;特价:7990元) 包括:4.6 × 250mm MP-C18,ASB-C18,HILIC三种色谱
反相键合相色谱仪分离的疏溶剂理论
反相键合相色谱仪分离的疏溶剂理论认为非极性烷基键合相是在硅胶表面蒙覆了一层以Si-C键化学键合的十八烷基(或其它烃基)的分子毛。溶质分子(分析物)有非极性部分和极性官能团部分组成。当溶质分子的非极性部分与极性溶剂接触时,相互间产生斥力,此现象称为疏溶剂。当溶质分子的极性部分与极性溶剂接触时,相互间具
临床化学检查方法水溶性维生素
水溶性维生素介绍: 水溶性维生素能在水中溶解的一组维生素。包括复合维生素B以及一些其他维生素(如维生素C和维生素P)。大多数都能作为辅酶的组成部分发挥作用。水溶性维生素正常值: 维生素B1,硫胺 ,正常情况:血清 0.0-75.4nmol/L 全血 41.5-108.9nmol/L。 维生素B
关于水溶性维生素的苯介绍
水溶性维生素(Water-soluble vitamins)是可溶于水而不溶于非极性有机溶剂的一 类维生素,包括维生素B族和维生素C。这类维生素除碳、氢氧元素外,有的还含有氮硫等元素。与脂溶性维生素不同,水溶性维生素在人体内储存较少,从肠道吸收后进入人体的多余的水溶性维生素大多从尿中排出。水溶性
关于水溶性维生素的基本介绍
水溶性维生素(Water-soluble vitamins)是可溶于水而不溶于非极性有机溶剂的一 类维生素,包括维生素B族和维生素C。这类维生素除碳、氢氧元素外,有的还含有氮硫等元素。与脂溶性维生素不同,水溶性维生素在人体内储存较少,从肠道吸收后进入人体的多余的水溶性维生素大多从尿中排出。水溶性
关于水溶性维生素检查的介绍
水溶性维生素能在水中溶解的一组维生素。包括复合维生素B以及一些其他维生素(如维生素C和维生素P)。大多数都能作为辅酶的组成部分发挥作用。 维生素B1,硫胺 ,正常情况:血清 0.0-75.4nmol/L 全血 41.5-108.9nmol/L。 维生素B6 正常情况:14.6-72.8nmo
东曹参展CPHI-China-2014-推TSKgel系列色谱柱分析应用
2014年6月26日,第十四届世界制药原料展、第九届世界制药机械、包装设备与材料中国展、第二届世界医药合同定制服务中国展在上海新国际博览中心盛大开幕,吸引了汇集20多个国家和地区的2500家参展企业和近45000名海内外专业观众。东曹(上海)生物科技有限公司携TSKgel色谱柱、IC-
反相离子对色谱等离子体质谱测定海产品中溴标准
我们知道溴酸根是一种会对皮肤、眼睛和粘膜有刺激性的物质,误服会发生呕吐、腹泻、肾脏障碍等不良反应。溴酸盐是一种氧化性致癌物,主要导致动物的肾和膀胱组织发生癌变,世界卫生组织、美国现行的饮用水标准、我国的生活饮用水标准都对溴酸盐的含量做出了明确的规定,因此食品中溴酸盐的检测是一件很有意义的工作。
反相键合相色谱仪的分子毛分离机理
反相键合相色谱仪的分子毛分离机理认为反相键合相色谱仪的非极性烷基键合相是一层键合在硅胶表面上的十八烷基的分子毛,这种分子毛有较强疏水特性。当用极性溶剂为流动相分离含有极性官能团的有机化合物时,分子中的非极性部分与固定相表面上的疏水烷基产生缔合作用,使它保留在固定相中;分子中的极性部分受到极性流动相的
反相键合相色谱仪的分子毛分离机理
反相键合相色谱仪的分子毛分离机理认为反相键合相色谱仪的非极性烷基键合相是一层键合在硅胶表面上的十八烷基的分子毛,这种分子毛有较强疏水特性。当用极性溶剂为流动相分离含有极性官能团的有机化合物时,分子中的非极性部分与固定相表面上的疏水烷基产生缔合作用,使它保留在固定相中;分子中的极性部分受到极性流动相的
反相键合固定相色谱仪分离的疏溶剂理论
典型的反相键合固定相色谱仪是采用非极性键合固定相和极性流动相组成的色谱体系,固定相常用十八烷基(ODS或C18)键合固定相,流动相常用甲醇-水或乙腈-水。非典型反相键合固定相色谱仪是采用弱极性或中等极性键合固定相和极性大于固定相的流动相组成的色谱体系。疏溶剂理论把非极性烷基键合固定相看作是在硅胶表面
反相键合相色谱仪的分子毛分离机理
反相键合相色谱仪的分子毛分离机理认为反相键合相色谱仪的非极性烷基键合相是一层键合在硅胶表面上的十八烷基的分子毛,这种分子毛有较强疏水特性。当用极性溶剂为流动相分离含有极性官能团的有机化合物时,分子中的非极性部分与固定相表面上的疏水烷基产生缔合作用,使它保留在固定相中;分子中的极性部分受到极性流动相的