免疫细胞化学(ICC)
实验概要免疫组织化学又称免疫细胞化学，是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来，借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用，在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物质(如蛋白质、多肽、酶、激素、病原体以及受体等)。 免疫组化技术近年来得到迅速发展。50年代还仅限于免疫荧光技术，50年代以后逐渐发展建立起高度敏感，且更为实用的免疫酶技术。实验步骤1. 固定1) 冷甲醇、丙酮固定样品 1-10 分钟，或含 3-4% 多聚甲醛 pH 7.4 的 PBS 室温固定 15 分钟。2) 冷 PBS 冲洗样品 2 次。2. 通透1) 将样品在含 0.25% ......阅读全文
免疫细胞化学－(ICC)
实验概要免疫组织化学又称免疫细胞化学，是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来，借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用，在细胞、亚细胞水平检测
免疫细胞化学－(ICC)
实验概要免疫组织化学又称免疫细胞化学，是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来，借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用，在细胞、亚细胞水平检测
免疫组化(ICC)原理和IHC/ICC实验方法1
一、免疫组化（Immunohistochemistry,IHC/ Immunocytochemistry, ICC）原理免疫组化是应用免疫学基本原理--抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂 （荧光素、酶、金属离子、同位素） 显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋
免疫组化(ICC)原理和IHC/ICC实验方法2
3、操作流程（1）脱蜡和水化脱蜡前，应将组织芯片在室温中放置60分钟或60℃恒温箱中烘烤20分钟。1）组织芯片置于二甲苯中浸泡10分钟，更换二甲苯后再浸泡10分钟；2）无水乙醇中浸泡5分钟；3）95%乙醇中浸泡5分钟；4）70%乙醇中浸泡5分钟；（2）抗原修复用于福尔马林固定的石蜡包埋组织芯片。1）
ICC用细胞抗原的制备
一、材料和试剂1、0.01M PBS(pH7.4)： NaCl 8.0g； KCl 0.2g； Na2HPO4 1.44g； KH2PO4 0.24g； ddH2O至1000ml ； 高压灭菌,分装。2、0.25%胰酶：称取EDTA 0.02g NaCl 0.8g KCl 0.04g
图说鲜肉IHC/ICC晋级攻略
西土有一名寺，昂迪·赛司腾姆寺，有大师。一日，来了一位东土小鲜肉。鲜肉问大师：“学业有惑，可解？”大师反问：“你术业可是生物？”鲜肉惊奇：“是，大师神奇，何以得知？”大师指鲜肉鞋履：“鞋上两块蓝斑，乃考马斯亮蓝，其渍尚新，你近来必在捣弄蛋白，对否？”鲜肉羞赧：“正是近日检测蛋白，跑胶无数，不慎滴上。
免疫细胞化学
Introduction to Immunocytochemistry (House Ear Institute)A brief overview of common available methods. BrDU Immunocytochemistry using peroxidase and
免疫细胞化学法
免疫细胞化学是将免疫学基本原理与细胞化学技术相结合所建立起来的新技术，根据抗原与抗体特异性结合的特点，检测细胞内某种多肽、蛋白质及膜表面抗原和受体等大分子物质的存在与分布。
免疫细胞化学方法
1、细胞爬片；2、PBS洗3次×5min；3、4%多聚甲醛固定30min（4度冰箱中）；4、3%H2O2 封闭内源性过氧化物酶，室温下10min；5、PBS洗3次×5min；6、10%动物血清封闭，室温下10min；7、甩去血清（不洗），一抗4℃ ；细胞8、PBS洗3次×5min；9、二抗室温下1h
免疫细胞化学法
①直接法：用标记抗体与抗体中的相应抗原直接结合，操作方法简便，特异性高，但敏感性较差，此法可用于检定未知抗原；②间接法：先用未标记的具有特异性的第一抗体与样品中的相应抗原结合，然后再以标记的第二抗体与特异性的第一抗体结合；第二抗体是用第一抗体作为抗原注入另一动物体内诱导产生的抗体，然后再结合以标记物
免疫细胞化学术
免疫细胞化学（immunocytochemistry），是将免疫学基本原理与细胞化学技术相结合所建立起来的新技术，根据抗原与抗体特异性结合的点，检测细胞内某种多肽、蛋白质及膜表面抗原和受体等大分子物质的存在与分布。肽类与蛋白质种类繁多，均具有抗原性，当将人或动物的某种肽或蛋白质作为抗原注入另一种
免疫细胞化学常用试剂
一、固定剂大多数神经激素、肽类物质为水溶性，在用于免疫细胞化学研究之前，常需固定。但肽类和蛋白质的物理、化学性质不同，因而对不同的固定方法或固定剂的反应也不尽相同。某些固定剂甚至可同时破坏和/或保护同一抗原的不同抗原决定簇。因此，在进行免疫细胞化学研究之前，很有必要了解所要研究的物质（蛋白质或肽类）
免疫细胞化学常用试剂
一、固定剂 1、4%多聚甲醛-0.1mol/L磷酸缓冲液（pH7.3） 2、4%多聚甲醛-磷酸二氢钠/氢氧化钠 3、Bouin's液及改良Bouin’s液 4、Zamboni’s（Stefanini‘s）液 5、PLP液 6、Karnovsky's液（pH7.3） 7、0
IHC/ICC/IF实验前需要知道的几个要点
IHC/ICC/IF ,傻傻分不清楚？它们都是用于定位检测抗原表达的免疫检测技术，由于技术相对简单且直观，在科研和临床上都得到了大量使用。但是影响最终检测效果的变量非常多；每一个具体的检测都会遇到多个需要调整的变量。具体到选择何种方法来保存组织样本；固定标本该用醇还是醛；如何选择最合适的一抗；抗原修
IHC/ICC/IF实验前需要知道的几个要点~！
IHC/ICC/IF ,傻傻分不清楚？它们都是用于定位检测抗原表达的免疫检测技术，由于技术相对简单且直观，在科研和临床上都得到了大量使用。但是影响最终检测效果的变量非常多；每一个具体的检测都会遇到多个需要调整的变量。具体到选择何种方法来保存组织样本；固定标本该用醇还是醛；如何选择最合适的一抗；抗
免疫细胞化学法的简介
肽类与蛋白质种类繁多，均具有抗原性，当将人或动物的某种肽或蛋白质作为抗原注入另一种动物体内，则产生与该抗原相应的特异性抗体（免疫球蛋白）；将抗体从血清中提出后，结合上某种标记物，即成为标记抗体。用标记抗体与组织切片标本孵育，抗体则与细胞中相应抗原发生特异性结合，结合部位被标记物显示，则在显微镜下
免疫细胞化学法的分类
①直接法：用标记抗体与抗体中的相应抗原直接结合，操作方法简便，特异性高，但敏感性较差，此法可用于检定未知抗原；②间接法：先用未标记的具有特异性的第一抗体与样品中的相应抗原结合，然后再以标记的第二抗体与特异性的第一抗体结合；第二抗体是用第一抗体作为抗原注入另一动物体内诱导产生的抗体，然后再结合以标
免疫细胞化学与图像分析
在细胞生物学中，一个常见的问题是如何获取与细胞功能相关的各种定量测量信息。在免疫细胞化学中也存在同样的问题。制作免疫细胞化学标本环节 较多，只要有一个环节 失误就会影响实验结果，除了需要精制的药品外，还需要熟练的技术。那么，做成了理想的标本后，如何进行观察，才能获得尽量多的的各种定量信息，而且使这些
分泌肿瘤免疫细胞化学(3)
三、甲状腺髓样癌 由甲状腺滤泡旁细胞（C细胞）产生的恶性肿瘤。此瘤在光镜下与甲状腺非典型腺瘤、未分化癌及转移癌有时难以鉴别。免疫细胞化学染色可见瘤细胞降钙素阳性反应，降钙素免疫反应物常聚积于瘤细胞核周胞浆中，此项检查具有诊断意义。电镜下，瘤细胞中可见二种分泌颗粒，I型颗粒直径约280nm，含有
免疫细胞化学常用试剂介绍
一、固定剂 大多数神经激素、肽类物质为水溶性，在用于免疫细胞化学研究之前，常需固定。但肽类和蛋白质的物理、化学性质不同，因而对不同的固定方法或固定剂的反应也不尽相同。某些固定剂甚至可同时破坏和/或保护同一抗原的不同抗原决定簇。因此，在进行免疫细胞化学研究之前，很有必要了解所要研究的物质（蛋白质或肽
免疫细胞化学常用试剂介绍
一、固定剂 大多数神经激素、肽类物质为水溶性，在用于免疫细胞化学研究之前，常需固定。但肽类和蛋白质的物理、化学性质不同，因而对不同的固定方法或固定剂的反应也不尽相同。某些固定剂甚至可同时破坏和/或保护同一抗原的不同抗原决定簇。因此，在进行免疫细胞化学研究之前，很有必要了解所要研究的物质（蛋白质或肽
免疫细胞化学与图像分析
在细胞生物学中，一个常见的问题是如何获取与细胞功能相关的各种定量测量信息。在免疫细胞化学中也存在同样的问题。制作免疫细胞化学标本环节 较多，只要有一个环节 失误就会影响实验结果，除了需要精制的药品外，还需要熟练的技术。那么，做成了理想的标本后，如何进行观察，才能获得尽量多的的各种定量信息，而且使这些
荧光信号放大TSA优秀替代品—PSA技术（三）
灵活的工作流程：与IHC，ICC，ISH和流式细胞仪兼容： PSA™成像技术可适用于能在其检测方案中添加HRP的任何应用，并且与免疫学应用中常用的样品类型和荧光成像平台兼容。与传统的IHC，ICC，ISH和FC应用程序结合使用时，PSA™成像可显著提高检测灵敏度，而不会降
哪些方法可以用于检测细胞周期蛋白的表达水平？
常见的用于检测细胞周期蛋白表达水平的方法：免疫印迹法（Western Blot）：通过特异性抗体检测细胞裂解液中细胞周期蛋白的含量。实时定量聚合酶链式反应（qPCR）：测定细胞周期蛋白的 mRNA 水平，间接反映其表达。免疫组织化学（IHC）/免疫细胞化学（ICC）：用于检测组织切片或细胞中的细胞周
免疫细胞化学法的技术特点
免疫细胞化学是将免疫学基本原理与细胞化学技术相结合所建立起来的新技术，根据抗原与抗体特异性结合的特点，检测细胞内某种多肽、蛋白质及膜表面抗原和受体等大分子物质的存在与分布。
免疫细胞化学法的技术分类
①直接法：用标记抗体与抗体中的相应抗原直接结合，操作方法简便，特异性高，但敏感性较差，此法可用于检定未知抗原；②间接法：先用未标记的具有特异性的第一抗体与样品中的相应抗原结合，然后再以标记的第二抗体与特异性的第一抗体结合；第二抗体是用第一抗体作为抗原注入另一动物体内诱导产生的抗体，然后再结合以标记物
免疫细胞化学（immunocytochemistry）技术的分类
1）按标记物质的种类，如荧光染料、放射性同位素、酶（主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶）、铁蛋白、胶体金等，可分为免疫荧光法、放射免疫法、免疫酶标法和免疫金银法等。 2）按染色步骤可分为直接法（又称一步法）和间接法（二步、三步或多步法）。与直接法相比，间接法的灵敏度提高了许多。 3）按结合方式
免疫细胞化学与图像分析2
六、实例介绍 因为将免疫细胞化学方法与图像分析结合起来进行研究的论文在国内国外都还不多。在第六届国际学术会议上发表的90多篇论文中只有1篇，因此在实例介绍中，包括一部分不是免疫细胞化学方法，而是用其他组织学方法与图像分析结合起来研究，但这种方法对研究免疫细胞化学标本也可借鉴，从中可得到一些启发的
免疫细胞化学染色操作规程
一、材料和试剂1、玻片：须用免疫组化专用玻片，或用2%多聚赖氨酸包被处理玻片。2、5-10%正常山羊血清封闭液，用PBS配。3、3%牛血清白蛋白（BSA），用PBS配。4、0.01M PH7.4 PBS5、1% BSA-PBS（含0.05% Tween20）6、AEC底物（1）底物缓冲液（20X
免疫细胞化学常用试剂介绍2
三、显色液 免疫细胞化学中，由于抗原-抗体反应所形成的复合物本身无色，无法直接观察，因而需借助于某些化学基团的呈色作用，使其得以显示，以利于在显微镜下观察。常用的显色液有： 1．DAB（Diaminobenzidine）显色液 DAB即3，3-二氨基苯联胺 试剂：DAB（常用四盐酸盐） 50