筛选到的靶分子结合肽的ELISA检测
实验概要本实验对筛选到的靶分子结合肽进行了ELISA检测。主要试剂1. LB培养基2. PEG/NaCl3. TBS4. 0.1M NaHCO3（pH8.6）5. HRP底物缓冲液6. ABTS贮存液：在100ml 50mM的柠檬酸钠溶液（pH4.0）中溶解22mgABTS，过滤除菌贮存在4℃。主要设备1. 酶标板，酶标仪2. 湿盒3. 吸水纸实验步骤1. 噬斑扩增上清部分用于DNA序列测定，其余保存于4℃。2. 将ER2537接种至20ml LB培养基中，37℃孵育至轻微混浊，或将过夜培养的ER2537按1：100稀释至20ml。3. 加入5ml噬菌体上清，37℃剧烈通气培养4.5h。4. 将培养物转入离心管，10，000转离心10min。取上清转入新的离心管，再次离心。5. 吸取上层80%的上清转入新离心管中，加入1/6体积的PEG/NaCl，4℃沉淀1h或过夜。6. 4℃，10，000转离心PEG沉淀物15min。倾去上清......阅读全文
ELISA检测筛选到的靶分子结合肽
【材料和试剂】 （1）酶标板，酶标仪 （2）湿盒 （3）吸水纸 （4）LB培养基 （5）PEG/NaCl （6）T （7）0.1M NaHCO3（pH 8.6） （8）HRP底物缓冲液 ABTS贮存液：在100ml 50mM的柠檬酸钠溶液（pH 4.0）中溶解22
筛选到的靶分子结合肽的ELISA检测
实验概要本实验对筛选到的靶分子结合肽进行了ELISA检测。主要试剂1. LB培养基2. PEG/NaCl3. TBS4. 0.1M NaHCO3（pH8.6）5. HRP底物缓冲液6. ABTS贮存液：在100ml 50mM的柠檬酸钠溶液（pH4.0）中溶解22mgABTS，过滤除菌贮存在4℃。主要
筛选到的靶分子结合肽的ELISA检测
实验概要本实验对筛选到的靶分子结合肽进行了ELISA检测。主要试剂1. LB培养基2. PEG/NaCl3. TBS4. 0.1M NaHCO3（pH8.6）5. HRP底物缓冲液6. ABTS贮存液：在100ml 50mM的柠檬酸钠溶液（pH4.0）中溶解22mgABTS，过滤除菌贮存在4℃。主要
通过噬菌体ELISA鉴定得到的噬菌体克隆
经过3～4轮的筛选后，应该能够富集到能与受体特异性结合的噬菌体群体。通常而言，在后几轮的筛选中，每次获得的噬菌体总量都会增加，但是单就这个现象并不一定能说明已经筛选到了受体特异性结合的肽段。能与靶分子非特异性结合或者能与筛选基质的噬菌体克隆也会造成这一现象。噬菌体ELISA可以说是最灵敏的鉴定所获取
大鼠脑钠肽(BNP)ELISA检测法
大鼠脑钠肽(BNP)ELISA试剂盒 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 BNP 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 BNP与单抗结合，加入生物素化的抗大鼠BNP，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，加入底物工作液显蓝色，最后加
狗脑钠肽(BNP)ELISA检测法
狗脑钠肽(BNP)ELISA试剂盒 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗狗 BNP 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的BNP与单抗结合，加入生物素化的抗狗BNP，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，加入底物工作液显蓝色，最后加终止液硫
关于矿物元素结合肽的相关介绍
多数矿物元素结合肽中心位置含有磷酸化的丝氨酸基团和谷氨酰残基，与矿物元素结合的位点存在于这些氨基酸带负电荷的侧链一侧，其最明显的特征是含有磷酸基团。与钙结合需要含丝氨酸的磷酸基团以及谷氨酸的自由羧基基团，这种结合可增强矿物质-肽复合物的可溶性。酪蛋白磷酸肽（简称CPP）是目前研究最多的矿物元素结
抑制细菌转录终止检测技术筛选RNA结合蛋白实验
实验方法原理 一种通过筛选重组 cDNA 文库研究多肽与 RNA 相互作用的细菌抗转录终止检测系统。 实验材料 N-表达质粒 E.coi
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一种通过筛选重组 cDNA 文库研究多肽与 RNA 相互作用的细菌抗转录终止检测系统。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编：郑晓飞。实验方法原理一种通过筛选重组 cDNA 文库研究多肽与 RNA 相互作用的细菌抗转录终止检测系统。实验材料N-表达质粒E.coil N567 感受态细菌试剂、试剂盒储
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实验方法原理 一种通过筛选重组 cDNA 文库研究多肽与 RNA 相互作用的细菌抗转录终止检测系统。实验材料 N-表达质粒E.coil N567 感受态细菌试剂、试剂盒 储存液缓冲液仪器、耗材 蛋白胨培养基蛋白胨平板N-表达质粒组合文库培养板实验步骤 ―、材料与设备1. 通过比较 β-半乳糖苷酶表达
大鼠神经肽Y(NPY)ELISA检测法
大鼠神经肽Y(NPY)ELISA试剂盒 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 NPY 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 NPY与单抗结合，加入生物素化的抗大鼠NPY，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，加入底物工作液显蓝色，最后
大鼠血管活性肠肽(VIP)ELISA检测法
大鼠血管活性肠肽(VIP)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 VIP 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的VIP与单抗结合，加入生物素化的抗大鼠VIP，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Strept
PDGFRA靶点药物细胞筛选模型
胃肠道间质瘤(Gastrointestinal Stromal Tumors,GIST)是一类起源于胃肠道间叶细胞的肿瘤，约占胃肠道恶性肿瘤的1～3%，年发病率约为10－20/100万。它是一种软组织肉瘤、对化疗不敏感，其中约78.5%的GIST有KIT激活变异，约7.5%的GIST有PDGFRA变
大鼠雷帕霉素靶蛋白(mTOR)ELISA检测法
大鼠雷帕霉素靶蛋白(mTOR)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 mTOR 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 mTOR与单抗结合，加入生物素化的抗大鼠mTOR，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记
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筛选或验证RNA修饰直接靶点，研究RNA修饰靶基因的调控机制技术简介用体外转录法标记生物素RNA探针，然后与胞浆蛋白提取液孵育，形成RNA-蛋白质复合物。该复合物可与链霉亲和素标记的磁珠结合，从而与孵育液中的其他成分分离。复合物洗脱后，通过Western Blot检测特定的RNA结合蛋白是否与R
合成肽疫苗的分子组成
合成肽疫苗分子是由多个B细胞抗原表位和T细胞抗原表位共同组成的，大多需与一个载体骨架分子相耦联。合成肽疫苗的研究最早始于口蹄疫病毒（FMDV）合成肽疫苗，主要集中在FMDV 的单独B细胞抗原表位（VPI 环）或与T 细胞抗原表位结合而制备的合成肽疫苗研究。虽然取得了一定的进展，但仍未获得一种具有理想
分子疏水性的结合过程
在药物分子中大都会有非极性部分，即只由碳氢原子组成的部分，在受体分子中含有非极性氨基酸残基，如苯丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸，这些氨基酸残基的侧链在形成蛋白质的立体结构时，可能遇到一起形成活性部位的非极性区，称为疏水袋（hy-drophobic pocket）。在体内，药物的非极性部分和受体的非
大鼠C肽(Cpeptide)ELISA检测法
大鼠C-肽(C-peptide)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 C-peptide 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 C-peptide与单抗结合，加入生物素化的抗大鼠C-peptide，形成免疫复合物连
大鼠降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA检测法
大鼠降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA试剂盒 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 CGRP 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 CGRP与单抗结合，加入生物素化的抗大鼠CGRP，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，加入底物工
ELISA中的试剂（2）－结合物
3.2 结合物 结合物即酶标记的抗体（或抗原），是ELISA中最关键的试剂。良好的结合物应该是既保有酶的催化活性，也保持了抗体（或抗原）的免疫活性。结合物中酶与抗体（或抗原）之间有恰当的分子比例，在结合试剂中应尽量不含有或少含有游离的（未结合的）酶或游离的抗体（或抗原）。此外，结合物尚要有良好的稳
ELISA(EIA)酶结合物的制备
免疫酶技术(immunoenzymatic technique)又称酶免疫测定法(enzyme immunoaay,EIA),是继免疫荧光技术和放射免疫技术之后发展起来的又一种免疫标记技术。它是把抗原抗体的特异性反应和酶的高效催化作用相结合而建立的。该技术通过化学方法将酶与抗体或抗抗体结合
大鼠视黄醇结合蛋白(RBP)ELISA检测法
大鼠视黄醇结合蛋白(RBP)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 RBP 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 RBP与单抗结合，加入生物素化的抗大鼠RBP，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Stre
大鼠性激素结合球蛋白(SHBG)ELISA检测法
大鼠性激素结合球蛋白(SHBG)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 SHBG 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 SHBG与单抗结合，加入生物素化的抗大鼠SHBG，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记
CETSAWes检测细胞内药物与靶蛋白结合效率
大多数药物是通过结合一个或多个蛋白质来影响其功能，这就产生了药物开发中的两个常规瓶颈：识别正确的靶蛋白，设计药物能够有效的寻找到并结合该蛋白。但是现在还没有方法能够有效且直接的测量药物分子到达并结合靶蛋白的方法。卡罗林斯卡研究中心科学家开发出一种称之为细胞热转移（CETSA，Cellular T
药物作用靶点筛选与基因敲除技术的关系
2018年一对双胞胎婴儿的CCR5基因敲除的事件在社会上引起了轩然大波，抛开这次事件而言，作为一项生物研究技术，基因敲除在药物研发领域应用也很广泛，今天我们来看一下它在药物作用靶点筛选上的作用吧！ 通过药物作用的靶点来设计开发创新药物是目前创新药制剂开发的一条重要线索，每年都会有作用于新靶
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全细胞靶点筛选抗生素新药的方法
A target-specific whole cell assay for antibacterial drug discoveryLorraine HernandezSrinivas KodaliDoris CullySheo SinghJun Wang , jun_wang2@merck.co
SELEX技术——抗体工程的新纪元1
回顾20世纪，分子生物学及其相关学科的发展给科学研究和人类生活带来了日新月异的变化，同时也更新了一些传统概念。比如，自20世纪30年代以来，人们一直认为"所有的酶都是蛋白质"。1986年，Lerner等首次研制成功催化水解羧酸酯的抗体，称之为抗体酶（Abzyme）。1987 年，Cech等发
大鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA检测法
大鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和尿液生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 TAP 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的TAP与单抗结合，加入生物素化的抗大鼠TAP，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Stre
生物芯片技术用于药物筛选
利用基因芯片分析用药前后机体的不同组织、器官基因表达的差异。如果再cDNA表达文库得到的肽库制作肽芯片，则可以从众多的药物成分中筛选到起作用的部分物质。还有，利用RNA、单链DNA有很大的柔性，能形成复杂的空间结构，更有利与靶分子相结合，可将核酸库中的RNA或单链DNA固定在芯片上，然后与靶蛋白孵育