ELISA(EIA)酶结合物的制备

ELISA(EIA)酶结合物的制备

免疫酶技术(immunoenzymatic technique)又称酶免疫测定法(enzyme immunoaay,EIA),是继免疫荧光技术和放射免疫技术之后发展起来的又一种免疫标记技术。它是把抗原抗体的特异性反应和酶的高效催化作用相结合而建立的。该技术通过化学方法将酶与抗体或抗抗体结合

ELISA试剂盒酶结合物怎样正确使用

1、正确稀释酶结合物 合适工作浓度需要通过预实验来确定，浓度过高易导致本底偏高，浓度过低则会导致阳性信号的减弱。在使用前稀释，稀释后的酶结合物不宜长期保存，因为低浓度的酶结合物极易失活。2、酶结合物的稀释液 在稀释液中常加入高浓度的无关蛋白质，通过竞争抑制酶结合物在固相载体上的非特异性吸附。一般还加

elisa试剂盒酶结合物怎样正确的使用

1、正确稀释酶结合物 合适工作浓度需要通过预实验来确定，浓度过高易导致本底偏高，浓度过低则会导致阳性信号的减弱。在使用前稀释，稀释后的酶结合物不宜长期保存，因为低浓度的酶结合物极易失活。2、酶结合物的稀释液 在稀释液中常加入高浓度的无关蛋白质，通过竞争抑制酶结合物在固相载体上的非特异性吸附。一般还加

ELISA中的试剂（2）－结合物

3.2 　结合物 结合物即酶标记的抗体（或抗原），是ELISA中最关键的试剂。良好的结合物应该是既保有酶的催化活性，也保持了抗体（或抗原）的免疫活性。结合物中酶与抗体（或抗原）之间有恰当的分子比例，在结合试剂中应尽量不含有或少含有游离的（未结合的）酶或游离的抗体（或抗原）。此外，结合物尚要有良好的稳

酶标抗体结合物的纯化

在酶标记的溶液中，出现的是各种交联物的混合物，有酶-抗体、酶-抗体-酶、抗体-抗体、酶-酶，甚至还有游离的酶和抗体。在这中间，除了抗体-酶和酶-抗体-酶外，其它都应该给予除去。1、50%饱和硫酸铵沉淀法。此法只能除去游离的酶及酶-酶聚合体。而不能除去其它不需要者。但是此法对酶标抗体的损耗少。2、过S

酶和抗体活性、结合物中酶含量及结合率的测定

  ⑴ 酶与抗体的活性　常用琼脂扩散或免疫电泳法，使抗原与抗体形成沉淀线，经PBS漂洗1天，再以蒸馏水浸泡1小时，将琼脂凝胶片浸于酶底物溶液中着色，如果出现应有的颜色反应，再用生理盐水浸泡，颜色仍然不褪，表示结合物既有酶的活性，也有抗体活性。良好的结合物在显色后，琼扩滴度应在1:16以上。另一个测定

酶标仪使用注意事项及酶标（ELISA，EIA）诊断试剂盒操作

　　酶标仪使用注意事项 　　1、 工作环境 　　酶标仪是一种精密的光学仪器，因此良好的工作环境不仅能确保其准确性和稳定性，还能够延长其使用寿命。 　　A. 仪器应放置在无强磁场和干扰电压的位置。 　　B. 仪器应放置在噪音低于40分贝的环境下。 　　C. 为延缓光学部件的老化，应避免阳光直

人结合珠蛋白(HP)酶联免疫分析（ELISA）

本试剂仅供研究使用       目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中结合珠蛋白(HP)的含量。实验原理：  本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人结合珠蛋白(HP)水平。用纯化的人结合珠蛋白(HP)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入结合珠蛋白(HP)，再与HRP标记

人CREB结合蛋白(CBP)酶联免疫分析（ELISA）

人CREB结合蛋白(CBP)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中CREB结合蛋白(CBP)的含量。实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人CREB结合蛋白(CBP)水平。用纯化的人CREB结合蛋白(CBP)

酶免蛋白(及酶)—小分子半抗原结合物的制备

在临床实验室中，我们常常会遇到有关小分子物质如激素、治疗药物和毒品等的测定问题，而这些小分子通常分子量小于1 000，只是半抗原，仅有反应原性，没有免疫原性，如像蛋白大分子一样，将其直接免疫动物，不能得到小分子的抗体，只有将其先与载体蛋白相连接，组成完全抗原免疫动物，才能得到特异的抗小分子抗体，

良好的酶结合物取决于哪些条件？

  良好的酶结合物取决于两个条件：即高效价的抗体和高活性的酶。

人性激素结合球蛋白（SHBG）酶联免疫分析（ELISA）

人性激素结合球蛋白（SHBG）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的：本试剂盒用于测定人血清，细胞上清及相关液体样本中性激素结合球蛋白（SHBG）的含量。实验原理：  本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人性激素结合球蛋白（SHBG）水平。用纯化的性激素结合球蛋

人视黄醇结合蛋白(RBP)酶联免疫分析（ELISA）

人视黄醇结合蛋白(RBP)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中视黄醇结合蛋白(RBP)的含量。实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人视黄醇结合蛋白(RBP)水平。用纯化的人视黄醇结合蛋白(RBP)抗体包被

酶免疫测定的酶—大分子蛋白结合物的制备

酶结合物可以说是酶免疫测定试剂盒的核心组成部分。通常酶免疫测定试剂盒的有效使用期限即是根据酶结合物的稳定性而定的。因为在酶免疫测定试剂盒中，最易受外环境影响的组成试剂即是酶结合物。此外，酶结合物的质量亦是影响试剂盒质量的很重要的因素之一，可见酶结合物的制备对于酶免疫测定来说，是非常关键的一个环节。

酶标抗体和酶-抗酶复合物的应用于斑点ELISA（dot-ELISA）

操作简便，不需要特殊仪器（酶联检测仪）。【试剂及配制】(1) 稀释液：为1%A的0.01mol/L pH7.4的。(2) 封闭液：为2% A的0.01mol/L pH7.4的。(3) 洗涤液：为0.5% Tween 20的0.01mol/L pH7.4的。(4) 底物溶液：见附录。【操作方法】(1)

结合DNA的酶

核酸酶和连接酶：核酸酶是能够切割DNA链的酶，因为它们催化磷酸二酯键的水解。从位于DNA链末端的核苷酸开始水解DNA的核酸酶称为核酸外切酶。另一方面，直接切入DNA链的那些是内切核酸酶。分子生物学中使用最广泛的核酸酶，称为限制性内切酶，以切割特定序列的DNA。在自然界中，这种酶通过在进入细菌细胞时消

酶标抗体和酶-抗酶复合物的应用于细胞ELISA

应用酶标抗体进行免疫测定的方法较多，非均相酶免疫测定是目前应用最广泛的一类酶免疫检测技术，其中以酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent aay，ELISA）最常用，它可用于测定抗体，也可测定可溶性抗原及细胞抗原。而酶-抗酶复合物多用于免疫组织化学。以下

什么是泛素结合酶？

泛素结合酶，也称为E2酶，极少数情况下也称为泛素载体酶 (ubiquitin-carrier enzymes)，执行泛素化反应的第二步，该反应可以通过蛋白酶体降解靶蛋白  。

人视黄醇结合蛋白4(RBP-4)酶联免疫分析（ELISA）

人视黄醇结合蛋白4(RBP-4)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中视黄醇结合蛋白4(RBP-4)的含量。实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人视黄醇结合蛋白4(RBP-4)水平。用纯化的人视黄醇结合蛋白

植物超氧化物歧化酶（SOD）酶联免疫分析（ELISA）

植物超氧化物歧化酶（SOD）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的：本试剂盒用于测定植物组织，细胞及相关液体样本中超氧化物歧化酶（SOD）的活性。实验原理：  本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中植物超氧化物歧化酶（SOD）水平。用纯化的SOD抗体包被微孔板，制

藻类的超氧化物岐化酶（SOD）酶联免疫分析（ELISA）

藻类的超氧化物岐化酶（SOD）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的：本试剂盒用于测定藻类组织，细胞及其它相关样本中超氧化物岐化酶（SOD）含量。实验原理：   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本超氧化物岐化酶（SOD）含量。用纯化的植物糖蛋白抗体包被微孔板，制

酶联免疫检测技术的应用现状和发展前景

酶联免疫检测技术的应用 真菌毒素的检测：黄曲霉毒素 B 1 、 M 1 以及 T-2 毒素，脱氧雪腐镰刀菌烯醇（呕吐毒素 DON ），二乙酰草镰刀菌烯醇（ DAS ），玉米赤霉烯酮，赫曲霉毒素 A （ OA ）。 农药的检测：主要有除草剂与杀虫剂两大类，例如杀暝松（ FN ）、甲氟磷酸异已酶（ SO

可以DNA结合的酶--聚合酶

聚合酶：聚合酶是从核苷三磷酸合成多核苷酸链的酶。它们通过向链上存在的先前核苷酸的3'-OH添加核苷酸起作用。因此，所有聚合酶都以5' - 3'方向起作用。DNA复制需要DNA依赖的DNA聚合酶，实现DNA序列的完美拷贝。有些DNA聚合酶具有校对功能，能够检测含氮碱基之间的错配

可以DNA结合的酶--核酸酶

免疫分析技术测定农残的原理

基本原理常用于农药残留分析的免疫分析的技术有放射免疫分析(radioimmunoassay,RA)和酶免疫分析(enzyme immunoassay,EA)两种。RIA创立于20世纪60年代,EIA是继RIA之后,于20世纪70年代发展起来的一项新的免疫学技术。RIA与EIA技术一样,由反应系统和检

酶免疫分析技术进展与自动化

郝繁运   综述 中国误诊学杂志  2007年 第一期  第五次全国中青年检验医学学术会议论文汇编 摘要：本文主要介绍了酶免疫分析的发展现状，从酶免疫分析标记技术若干环节的技术进步、在方法学上与现代化技术的融合与发展、酶免疫分析技术在仪器自动化方面的进展与现状以及酶免技术的局限等方面进行了论述，特别

人组织因子途径抑制物(TFPI)酶联免疫分析(ELISA)

人组织因子途径抑制物(TFPI)酶联免疫分析(ELISA) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用       目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中组织因子途径抑制物(TFPI)的含量。 实验原理：     本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人组织因子途径抑制物(TFPI)水平

人胰岛素样生长因子结合蛋白 1酶联免疫分析（ELISA）

  人胰岛素样生长因子结合蛋白 1(IGFBP-1)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中胰岛素样生长因子结合蛋白 1(IGFBP-1)的含量。实验原理：  本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人胰岛素样生长因子结合

人胰岛素样生长因子结合蛋白-3酶联免疫分析（ELISA）

人胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)的含量。实验原理：  本试剂盒应用夹心法测定标本中人胰岛素样生长因子结合蛋白-3(

人纤溶酶-抗纤溶酶复合物(PAP)ELISA试剂盒

人纤溶酶-抗纤溶酶复合物(PAP)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人 PAP 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 PAP与单抗结合，加入生物素化的抗人PAP，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Str