固相载体上的斑点免疫金银染色法
实验概要本实验介绍了硝酸纤维素膜(NC膜)上的斑点免疫金银染色操作流程。实验原理蛋白质抗原通过直接点样或转移电泳吸附在硝酸纤维素膜(NC膜)上，与特异性抗体反应后，在滴加(或浸入)胶体金标记的第二抗体，结果在抗原抗体发生金颗粒聚集，形成肉眼可见的粉红色斑点，称为斑点免疫金染色(dot-IGS)。此反应可再提高银显色液增强，即斑点免疫金银染色法(dot-IGS/IGSS)。主要试剂1. 20mol/L，pH7.6 PBS2. BSA3. 定影液：20%硫代硫酸钠。4. 0.05% NaN35. 一抗(1-2mg/ml，用含0.1%BSA和正常羊或兔血清的TBS稀释)6. 金标二抗溶液(金标抗体用含0.4%明胶和0.1%BSA的TBS适当稀释)7. 0.2mol/L，pH3.5枸橼酸缓冲液8. 银显色液9. 定影液主要设备1. NC膜2. 电泳仪和电转仪3. 微量加样器实验步骤1. 用微量加样器在NC膜上直接点样1-2ml(若抗原含......阅读全文
免疫金银染色双PAG法
实验概要本实验介绍了免疫金银染色双PAG法的操作步骤。实验原理免疫金银染色方法敏感、简便、省时、安全可靠，葡萄球菌A蛋白(SPA)金标记四步法是在此基础上发展起来的更为敏感的一种新方法。SPA和许多哺乳类动物IgG具有亲和性，且它们之间的连接不会干扰抗原—抗体的结合。简单的SPA金标记二步法后，第三
彩色免疫金银法操作指南
1、基本原理 彩色免疫金银法（coloured IGSS, CIGSS）是在IGSS基础上发展起来的一种新方法。其基本原理与彩色显影相似。IGSS染色方法在抗原位点处生成银颗粒经铁氰化钾与溴化钾的作用即被氧化成溴化银，后者与彩色显影剂相接触立即被还原成金属银，而彩色显影剂本
免疫金银法（IGSS）操作指南
一、基本原理免胶体金检测技术是用金属离子和金属蛋白复合物应用免疫组化原理检测组织内抗原抗体的技术，常用胶体金（铁、汞等）重金属离子。由于胶体金容易制成各种大小的颗粒且有很高的电子密度及分辨率，又不影响抗体的活性，因此既可用于免疫组化又适于免疫电镜技术。二、操作步骤1、脱蜡至0.05mol/L TBS
固相萃取正相固相萃取
正相固相萃取所用的吸附剂都是极性的.取决于目标化合物的极性官能团与吸附剂表面的极性官能团之间相互作用，其中包括了氢键，π—π键相互作用，偶极-偶极相互作用和偶极-诱导偶极相互作用以及其他的极性-极性作用。
斑点免疫层析试验原理
原理 斑点免疫层析试验（dotimmunochromatographicassay，DICA）简称免疫层析试验（ICA），也以硝酸纤维素膜为载体，但利用了微孔膜的毛细血管作用，滴加在膜条一端的液体慢慢向另一端渗移，犹如层析一般
酶联免疫斑点实验(ELIspot)——酶联免疫斑点实验(ELIspot)
实验材料血液样品细胞样品试剂、试剂盒70％乙醇PBS脱脂奶粉链霉亲和素检测抗体包被抗体仪器、耗材PVDF膜96孔培养板硝基纤维素底板免疫斑点板酶标板实验步骤一、包被96孔板 用70％乙醇浸润96孔板中的PVDF膜30 s 加入捕获抗体（PBS稀释），4℃过夜 倒空板中包被液，轻轻在纸上拍干，用PBS
固相放射免疫测定的技术特点
中文名称固相放射免疫测定英文名称solid-phase radioimmunoassay定 义将抗原或抗体吸附在固相载体上进行反应和检测的一种放射免疫分析技术。应用学科免疫学（一级学科），应用免疫（二级学科），免疫学检测和诊断（三级学科）
杂交瘤技术基本程序与方法7
⑦Dot-ELISA试验 免疫斑点试验（Dot-ELISA）是以硝酸纤维素膜或醋酸纤维素膜为固相载体，进行抗原抗体反应的免疫检测手段。该法采用不溶性底物（如DAB，或4-氯萘酚或AgNO3等），其与相应标记物（HRP、AP、胶体金）作用形成不溶性产物，呈现斑点状着色，从而易于判定结果。根据所用的标
固相萃取反相固相萃取
反相固相萃取反相固相萃取所用的吸附剂和目标化合物通常是非极性的或极性较弱的，主要是靠非极性-非极性相互作用，是范德华力或色散力。
固相萃取固相萃取仪的分类
固相萃取装置的分类1.正相固相萃取正相固相萃取所用的吸附剂都是极性的.取决于目标化合物的极性官能团与吸附剂表面的极性官能团之间相互作用，其中包括了氢键，π—π键相互作用，偶极-偶极相互作用和偶极-诱导偶极相互作用以及其他的极性-极性作用。2.反相固相萃取反相固相萃取所用的吸附剂和目标化合物通常是非极
固相萃取固相萃取活化的目的
活化的目的是创造一个与样品溶剂相容的环境并去除柱内所有杂质。通常需要两种溶剂来完成上述任务，个溶剂（初溶剂）用于净化固定相，另一个溶剂（终溶剂）用于建立一个合适的固定相环境使样品分析物得到适当的保留。每一活化溶剂用量约为1-2ml/100mg固定相。终溶剂不应强于样品溶剂，若使用太强的溶剂，将降低回
免疫学实验固相酶免疫测定技术介绍
固相酶免疫测定技术介绍： 固相酶免疫测定主要是指ELISA，其基本原理是：使抗原或抗体结合到某种固相载体表面(包被)，并保持其免疫活性；用酶标记(另一种)抗原或抗体，保留其免疫活性和酶活性；在测定时，把待测标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起
抗ENA抗体的检测
1.斑点酶免疫技术(dot-ELISA)。 2.免疫印迹技术(IBT)： 属于膜载体酶免疫技术，其固相载体为吸附有抗原的硝酸纤维膜。不需纯化单个抗原，并可在同一载体上作多项抗原分析。
酶联免疫斑点实验(ELIspot)_酶联免疫斑点实验(ELIspot)2
实验方法原理ELISPOT技术原理，一句话概括就是：用抗体捕获培养中的细胞分泌的细胞因子，并以酶联斑点显色的方式将其表现出来。实验材料细胞试剂、试剂盒PBSPBST乙醇包被抗体封闭液抗体稀释液检测抗体酶联亲和素AEC显色液PHA刺激物U-Cytech无血清培养基仪器、耗材ELISPOT读数仪超净工作
斑点免疫渗滤试验(IFA)的原理
用于检测各种传染病的抗体和肿瘤标记物等，以及用于检测尿液HCG的“金标”早孕诊断试剂。 原理：将抗原或抗体点加在固相载体硝酸纤维素薄膜上，将膜贴于吸水材料上，依次在膜上滴加标本、免疫胶体金及洗涤液等试剂进行抗体或抗原反应，过量试剂很快渗入吸水材料中。 抗原抗体反应后，形成大分子胶体金复合物，
斑点免疫渗滤试验的方法类型
1.双抗体夹心法测抗原：用抗体结合在微孔滤膜中央，滴加待检标本，抗原抗体反应后，滴加金标抗体，加洗涤液洗涤后，阳性者即在膜中央呈红色斑点。 2.间接法测特异性抗体：用抗原包被在微孔滤膜上，滴加待测标本，滴加洗涤液洗涤后，滴加金标抗抗体，加洗涤液洗涤后，阳性者即在膜中央呈红色斑点。该法由于血清标
斑点免疫渗滤试验(IFA)的原理
用于检测各种传染病的抗体和肿瘤标记物等，以及用于检测尿液HCG的“金标”早孕诊断试剂。原理：将抗原或抗体点加在固相载体硝酸纤维素薄膜上，将膜贴于吸水材料上，依次在膜上滴加标本、免疫胶体金及洗涤液等试剂进行抗体或抗原反应，过量试剂很快渗入吸水材料中。抗原抗体反应后，形成大分子胶体金复合物，从而使阳性结
免疫酶染色法
实验概要免疫酶染色法亦称免疫酶标组织化学法。标本制备后，首先将其内源酶抑制，接着即可进行免疫酶染色检查。常规的免疫酶染色法可分为直接法和间接法两种。前者固定标本中的抗原直接与酶标抗体结合，达到酶染色目的；后者是抗原先与其抗体(第一抗体)结合后，再与酶标抗体(第二抗体)结合，而进行酶染色的。免疫酶染色
免疫酶染色法
(一) 原理 免疫酶染色法亦称免疫酶标组织化学法。标本制备后，首先将其内源酶抑制，接着即可进行免疫酶染色检查。常规的免疫酶染色法可分为直接法和间接法两种。前者固定标本中的抗原直接与酶标抗体结合，达到酶染色目的；后者是抗原先与其抗体(第一抗体)结合后，再与酶标抗体(第二抗体)结合，而进
免疫酶染色法
实验概要免疫酶染色法亦称免疫酶标组织化学法。标本制备后，首先将其内源酶抑制，接着即可进行免疫酶染色检查。常规的免疫酶染色法可分为直接法和间接法两种。前者固定标本中的抗原直接与酶标抗体结合，达到酶染色目的；后者是抗原先与其抗体(第一抗体)结合后，再与酶标抗体(第二抗体)结合，而进行酶染色的。免疫酶染色
彩色免疫金银法（CIGSS）操作指南
1、基本原理彩色免疫金银法（coloured IGSS, CIGSS）是在IGSS基础上发展起来的一种新方法。其基本原理与彩色显影相似。IGSS染色方法在抗原位点处生成银颗粒经铁氰化钾与溴化钾的作用即被氧化成溴化银，后者与彩色显影剂相接触立即被还原成金属银，而彩色显影剂本身则被氧化，其氧化产
固相萃取与固相微萃取
固相萃取(Solid Phase Extraction SPE)就是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附，与样品的基体和干扰化合物分离，然后再用洗脱液洗脱或加热解吸附，达到分离和富集目标化合物的目的。 与液－液萃取相比固相萃取有很多优点：固相萃取不需要大量互不相溶的溶剂，处理过程中不会产生
固相萃取固相萃取柱
固相萃取柱（英文, 简称SPE column，或Solid Phase extraction Cartridges，简称SPE cartridges）是从层析柱发展而来的一种用于萃取、分离、浓缩的样品前处理装置。主要应用于各种食品、农畜产品、环境样品以及生物样品中目标化合物的样品前处理。固相萃取技术
斑点免疫渗滤试验（dotymmunogoldfiltrationassay，DIGFA）
斑点免疫渗滤试验的基本原理是：以硝酸纤维素膜为载体，利用微孔滤膜的可滤过性，使抗原抗体反应和洗涤在一特殊的渗滤装置上以液体渗滤过膜的方式迅速完成。斑点免疫渗滤试验最初是从斑点ELISA基础上发展起来建立的，应用的结合物是酶标记的，称为斑点酶免疫渗滤试验。90年代初发展了以胶体金为标记物的斑点免疫渗滤
斑点金免疫渗滤试验原理
斑点免疫渗滤试验的基本原理是：以硝酸纤维素膜为载体，利用微孔滤膜的可滤过性，使抗原抗体反应和洗涤在一特殊的渗滤装置上以液体渗滤过膜的方式迅速完成。斑点免疫渗滤试验最初是从斑点ELISA基础上发展起来建立的，应用的结合物是酶标记的，称为斑点酶免疫渗滤试验。90年代初发展了以胶体金为标记物的斑点免疫渗
固相萃取固相萃取仪的维护知识
固相萃取仪的维护知识： 1、请把本机放置在水平的实验台上或通风橱内使用，请勿让本机接近热源，不要让物品遮盖正面板和底板的通风孔； 2、请保持环境的整洁，灰尘过多、高温高湿环境会影响本机使用寿命； 3、油脂、非极性溶剂等可能对仪器造成损害，应避免其接触； 4、清洁本机前，请从交流电源插座上拔下
固相萃取固相萃取装置的萃取步骤
固相萃取装置的萃取步骤如下： 1、固相萃取柱的预处理 在萃取样品之前，吸附剂经过适当的预处理，一足为了润湿和活化固相萃取填料，以使目标萃取物与固相表面紧密接触，易于发生分子间相互作用；二是为了除去填料中可能存在的杂质．减少污染。采取的方法是用量溶剂冲洗萃取柱。 反相类型的固相萃取硅
固相微萃取和固相萃取的区别
固相微萃取和固相萃取的工作原理区别固相萃取技术基于液相色谱的原理，可近似看作一个简单的色谱过程。吸附剂作为固定相，而流动相是萃取过程中的水样。当流动相与固定相接触时，其中的某些痕量物质（目标物）就保留在固定相中。这时用少量的选择性溶剂洗脱，即可得到富集和纯化的目标物。固相萃取可分为在线萃取和离线萃取
固相萃取与固相微萃取的区别
固相微萃取技术是一项新颖的样品前处理与富集技术,属于非溶剂型选择性萃取法。固相微萃取是近年来国际上兴起的一项试样分析前处理新技术，是在固相萃取基础上发展起来的，它保留了其所有的优点，摒弃了其需要柱填充物和使用溶剂进行解吸的弊病，只要一支类似进样器的固相微萃取装置即可完成全部前处理和进样工作。
固相微萃取和固相萃取的区别
固相微萃取技术是一项新颖的样品前处理与富集技术,属于非溶剂型选择性萃取法。固相微萃取是近年来国际上兴起的一项试样分析前处理新技术，是在固相萃取基础上发展起来的，它保留了其所有的优点，摒弃了其需要柱填充物和使用溶剂进行解吸的弊病，只要一支类似进样器的固相微萃取装置即可完成全部前处理和进样工作。固相萃取