免疫染色法检定蛋白质
实验概要转印到纸上的蛋白质抗原,可与其专一性抗体结合,再以二次抗体-酶结合体(2nd Ab-HRP) 或Protein A-HRP 呈色;可在一群转印色带中,专一性地挑出目标蛋白质,是最有用的检定工具。主要试剂1. 抗体溶液:可用传统抗血清或单株抗体,其最适使用浓度,随抗体效价不同而异,以下为一般适用范围的参考,均以明胶-NET 稀释的。 1) 传统抗血清:1:100 到1:1,000 2) IgG (冷冻干燥品):10~50 μg/mL 3) 单株抗体 (小白鼠腹水) :1:200到1:5,000 4) 单株抗体 (细胞培养液):原液或1:10明胶-NET:用来稀释抗体溶液或酶联体明胶gelatin (Merck 4070,0.25%) 5.0 gm;NaCl (0.15 M) 17.5 gm;EDTA (5 mM) 3.6 g......阅读全文
细菌芽孢染色法
一、基本原理芽孢染色法是利用细菌的芽孢和菌体对染料的亲合力不同的原理,用不同染料进行着色,使芽孢和菌体呈不同的颜色而便于区别。芽孢壁厚、透性低,着色、脱色均较困难,因此,当先用一弱碱性染料,如孔雀绿(malachite green)或碱性品红(basicfuchsin)在加热条件下进行染色时
细菌抗酸染色法
细菌抗酸染色可以应用于(1)不易于其他染色料的细菌进行染色(2)细菌的形态分析。实验方法原理结核分枝杆菌对苯胺染料一般不易着色,若加温或延长染色时间使其着色后,再用3%盐酸酒精处理也不易脱色,经此染色后,结核分枝杆菌及其他分枝杆菌呈红色,而非抗酸菌和细胞杂质等呈蓝色。实验材料结核病人痰试剂、试剂盒抗
吉姆萨染色法
吉姆萨染液由天青,伊红组成。染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。但本法对细胞核和寄生虫着色较好,结构显示更不清晰,而胞质和中性颗粒则着色较差。为兼顾二者之长,可用复合染色法。即以稀释吉姆萨液代替缓冲液,按瑞特染色法染10min.或先用瑞特染色法染色后,再用稀释吉姆萨复染。
细菌抗酸染色法
1、原理与应用结核分枝杆菌对苯胺染料一般不易着色,若加温或延长染色时间使其着色后,再用3%盐酸酒精处理也不易脱色,经此染色后,结核分枝杆菌及其他分枝杆菌呈红色,而非抗酸菌和细胞杂质等呈蓝色。 2、材料(1)结核病人痰(2)抗酸染色液(3)玻片、片夹、滤纸片、竹签、空平皿、污物盆。 3、方法(1)取洁
细菌抗酸染色法
1、原理与应用结核分枝杆菌对苯胺染料一般不易着色,若加温或延长染色时间使其着色后,再用3%盐酸酒精处理也不易脱色,经此染色后,结核分枝杆菌及其他分枝杆菌呈红色,而非抗酸菌和细胞杂质等呈蓝色。2、材料(1)结核病人痰(2)抗酸染色液(3)玻片、片夹、滤纸片、竹签、空平皿、污物盆。3、方法(1)取洁净的
DAPI染色法的步骤
原来用dapi是用做原位杂交的配置的时候用灭菌水配置就可以了,以前用的浓度时1ml里面加2ul就可以了配置好的溶液保存在4℃就行,尽量避光,原液要用黑色的或锡箔纸包好放到-20℃为好原来是染载玻片上的染色体,直接滴到载玻片上就好了,之后用缓冲液洗净注意事项就是别沾到手上了,那个东西还是很毒的,染色的
瑞特染色法简介
(1)瑞特染料是由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝组成有复合染料。亚甲蓝为四甲基硫堇染料,有对醌型和邻醌型两种结构。通常为氯盐,即氯化美蓝。美蓝容易氧化为一、二、三甲基硫堇等次级染料。市售美蓝中部分已被氧化为天青。伊红通常为钠盐。即伊红和伊混合后,产生一种憎液性胶体伊红美蓝中性沉淀,即瑞特染料。 (2
细菌的荚膜染色法
一、目的要求学习并掌握荚膜染色法 二、基本原理 荚膜是包围在细菌 细胞外的一层粘液状或胶质状物质。 由于荚膜与染料的亲和力弱,不容易着色;而且可溶于水,易在用水冲洗时被除去。 所以通常用衬托染色法(负染色法)染色,使菌体和背景着色,而荚膜不着色,从而在菌体周围形成一透明圈。 由于
细菌奈瑟染色法
1、材料(1)染液甲 第一液:美兰1g,95%酒精30ml,冰醋酸50ml,蒸馏水100ml。 第二液:结晶紫1g, 95%酒精10ml, 蒸馏水300ml。 以上第一液二份,与第二液一份混合之。 (2)染液乙,黄叱精1或2g,热蒸馏水300ml,待溶解后过滤。 2、染色法 (1)涂片按常规法固定后
DNA的Feulgen染色法
1.目的与原理实验目的:学习DNA的Feulgen染色方法,观察染色结果,了解反应原理。实验原理:DNA经弱酸(1mol/L HCl)水解,其上的嘌呤碱和脱氧核糖之间的键打开,使脱氧核糖的一端形成游离的醛基,这些醛基在原位与Schiff试剂(无色品红亚硫酸溶液)反应,形成紫红色的化合物,使细胞内含有
台盼蓝染色法
材料:1. 显微镜、玻片、盖玻片、滴管;2. 试剂:0.4%台盼蓝染液;3. 台盼蓝(Trypan blue):0.4g;4. 生理盐水:100ml;操作步骤:1. 用Hanks液配制0.1%台盼蓝溶液;2. 用0.5%胰蛋白酶:0.2%EDTA=1:1混合液来消化培养的贴壁细胞;3. 再加入适量H
细菌奈瑟染色法
1、材料(1)染液甲第一液:美兰1g,95%酒精30ml,冰醋酸50ml,蒸馏水100ml。第二液:结晶紫1g, 95%酒精10ml, 蒸馏水300ml。以上第一液二份,与第二液一份混合之。(2)染液乙,黄叱精1或2g,热蒸馏水300ml,待溶解后过滤。2、染色法(1)涂片按常规法固定后,滴加奈瑟染
有丝分裂(Feulgen染色法)
实验原理:细胞中的DNA受1NHC1,60℃水解作用以后,核酸中的嘌呤碱很快完全被除掉,使脱氧核糖中潜在的醛基获得自由状态。水解后,组织要经水洗再移至希夫(Schiff)试剂中,希夫试剂即同露出来的醛基发生反应,呈现紫红色。这个反应是Feulgen在1942年提出来的,是DNA的一个特异性检查法。
细菌的荚膜染色法
一、目的要求 学习并掌握荚膜染色法 二、基本原理 荚膜是包围在细菌 细胞外的一层粘液状或胶质状物质。 由于荚膜与染料的亲和力弱,不容易着色;而且可溶于水,易在用水冲洗时被除去。 所以通常用衬托染色法(负染色法)染色,使菌体和背景着色,而荚膜不着色,从而在菌体周围形成一透明圈。
革兰氏染色液染色法
1.葡萄球菌和大肠杆菌混合菌液。 2.结晶紫染色液。 3.革兰氏碘液。 4.95%酒精。 5.番红染液。 6.载玻片。方 法 一、涂片标本的制备(见实验一) 二、革兰氏染色法 1.初染:在上述已固定的涂片上,滴加结晶紫染液,染色1分钟,水洗
革兰氏染色法的意义
革兰氏染色法的意义就在于鉴别细菌,把众多的细菌分为两大类,革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。 [2] 在治疗上,大多数革兰氏阳性菌都对青霉素敏感(结核杆菌对青霉素不敏感):大多数化脓性球菌都属于革兰氏阳性菌,它们能产生外毒素使人致病,可以选择青霉素族,头孢曲松钠等。
革兰氏染色法的概念
革兰氏染色法,是指细菌学中广泛使用的一种重要的鉴别染色法,属于复染法。这种染色法是由丹麦医生革兰于1884年所发明,最初是用来鉴别肺炎球菌与克雷伯肺炎菌。革兰染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤。未经染色的细菌,由于其与周围环境折光率差别甚小,故在显微镜下极难区别。经染色后,阳性菌呈紫色,
简单染色法-flash演示
简单染色法是利用单一染料对细菌进行染色的一种方法。此法操作简便,适用于菌体一般形状和细菌排列的观察。常用碱性染料进行简单染色,这是因为在中性、碱性或弱酸性溶液中,细菌细胞通常带负电荷,而碱性染料在电离时,其分子的染色部分带正电荷(酸性染料电离时,其分子的染色部分带正电荷),因此碱性染料的染色部分很容
瑞氏染色法简述
(1)血涂片干透后固定,否则细胞在染色过程中容易脱落。(2)冲洗时应以流水冲洗,不能先倒掉染液,以医。学教。育网整。防染料沉着在血涂片上。冲洗时间不能过久,以防脱色。如血涂片上有染料颗粒沉积,可滴加甲醇,然后立即用流水冲洗。(3)染色过淡可以复染,复染时应先加缓冲液,然后加染液。染色过深可用流水冲洗
DNA的Feulgen染色法
1.目的与原理 实验目的: 学习DNA的Feulgen染色方法,观察染色结果,了解反应原理。 实验原理: DNA经弱酸(1mol/L HCl)水解,其上的嘌呤碱和脱氧核糖之间的键打开,使脱氧核糖的一端形成游离的醛基,这些醛基在原位与Schiff试剂(无色品红亚
细菌奈瑟染色法
细菌奈瑟染色法可以用于芽孢染色(1)细胞的观测(2)细胞形态的检测与分类。实验方法原理芽胞具有高度的折光性,外膜致密,渗透性低,故普通染色法不易使其着色,芽胞染色法是根据芽胞既难以着色,而一旦着色又难以脱色的特点设计的,所有芽胞染色法都基于同一个原则:采用着色力强的染料,并加热以促进标本着色,然后使
细菌奈瑟染色法
1、材料(1)染液甲 第一液:美兰1g,95%酒精30ml,冰醋酸50ml,蒸馏水100ml。 第二液:结晶紫1g, 95%酒精10ml, 蒸馏水300ml。 以上第一液二份,与第二液一份混合之。 (2)染液乙,黄叱精1或2g,热蒸馏水300ml,待溶解后过滤。 2、染色法 (1)涂片按常规法固定后
什么是抗酸染色法?
抗酸染色法acid-fast staining method 1882年由埃利希(F.Ehrlich)首创并经F.齐尔(Ziehl)改进而创造出的细菌染色法。 其中最具代表性的为对结核菌的齐尔-尼尔森(Ziehl-Neelsen)染色法和齐尔-加贝特(Ziehl-Gabbet)染色法。用石炭酸
台盼蓝染色法
材料: 1. 显微镜、玻片、盖玻片、滴管; 2. 试剂:0.4%台盼蓝染液; 3. 台盼蓝(Trypan blue):0.4g; 4. 生理盐水:100ml; 操作步骤: 1. 用Hanks液配制0.1%台盼蓝溶液; 2. 用0.5%胰蛋白酶:0.2%EDTA=1:1混合液来消化培养的贴
什么是荧光染色法
用各种可以发荧光的物质来染色微生物样品,如利用荧光染色剂将人的染色体染色,可以通过染色不同,看到显微镜下染色体上的基因
瑞特(Wright)染色法
瑞特(Wright)染色法:为发观察细胞内部结构,识别各种细胞及其异常变化,血涂片必须嘲行染色。血涂片的各种染色方法大多是罗氏染色法衍变来的。目前常用瑞特染色法。 (1)瑞特染料是由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝组成有复合染料。亚甲蓝为四甲基硫堇染料,有对醌型和邻醌型两种结构。通常为
DNA的Feulgen染色法
1.目的与原理实验目的: 学习DNA的Feulgen染色方法,观察染色结果,了解反应原理。实验原理: DNA经弱酸(1mol/L HCl)水解,其上的嘌呤碱和脱氧核糖之间的键打开,使脱氧核糖的一端形成游离的醛基,这些醛基在原位与Schiff试剂(无色品红亚硫酸溶液)反应,形成紫红色的化合物,
瑞氏(Wright)染色法
(一)染色原理 瑞氏染液是由酸性染料伊红钠盐和碱性染料亚甲蓝组成的复合染料溶于甲醇而成。 1﹒亚甲蓝 又称美蓝(methylene blue),为四甲基硫堇染料,有色部分为亚甲蓝阳离子,呈碱性。亚甲蓝易被氧化为一、二、三甲基硫堇等次级染料,即天青,因此为多色性亚甲蓝。 2﹒伊红
关于鞭毛染色法—Bailey氏鞭毛染色法的基本信息介绍
鞭毛染色法—Bailey氏鞭毛染色法适用于对土壤和水中无芽孢杆菌或植物病原细菌等易脱落鞭毛的染色(因它们长有的荚膜易使鞭毛脱落)。媒染剂配制:A液10%鞣酸18ml,6%FeCl3·6H2O 6ml;B液:A液3.5ml,0.5%碱性复红(乙醇溶液)0.5ml,浓HCl 0.5ml,福尔马林2.
血液细胞染色法有哪些?
一、瑞氏染色瑞氏染色是血涂片最常用、最经典的染色方法,对细胞质和颗粒染色效果好。1.染液组成:碱性亚甲蓝、酸性伊红、甲醇(作为溶剂及固定细胞形态)。2.原理:物理吸附和化学亲和作用。3.染色效果:最适pH为6.4~6.8。若缓冲液偏酸,则红细胞和嗜酸性粒细胞偏红,细胞核呈淡蓝色或不着色。若缓冲液偏碱