台盼蓝染色法
材料: 1. 显微镜、玻片、盖玻片、滴管; 2. 试剂:0.4%台盼蓝染液; 3. 台盼蓝(Trypan blue):0.4g; 4. 生理盐水:100ml; 操作步骤: 1. 用Hanks液配制0.1%台盼蓝溶液; 2. 用0.5%胰蛋白酶:0.2%EDTA=1:1混合液来消化培养的贴壁细胞; 3. 再加入适量Hanks液制成细胞悬液; 4. 将待染色细胞稀释至所需浓度(方法及浓度范围与细胞计数相同); 5. 每0.1ml细胞悬液约加新鲜配制的染液一小滴,室温下染3—5min; 6. 染色过的细胞材料,取一滴细胞悬液置玻片上,加盖玻片后放高倍镜下观察; 7. 死亡的细胞着浅蓝色并膨大,无光泽。活细胞不着色并保持正常形态,有光泽; 8. 计数1000个细胞中的活细胞和死细胞数目; 9. 统计未染色细胞。可按公式计算出细胞活率。 细胞活率(%)=未染色的细胞数/观察的细胞总数×100。 ......阅读全文
台盼蓝染色法
材料: 1. 显微镜、玻片、盖玻片、滴管; 2. 试剂:0.4%台盼蓝染液; 3. 台盼蓝(Trypan blue):0.4g; 4. 生理盐水:100ml; 操作步骤: 1. 用Hanks液配制0.1%台盼蓝溶液; 2. 用0.5%胰蛋白酶:0.2%EDTA=1:1混合液来消化培养的贴
【实验技巧】台盼蓝染色
台盼蓝是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性,检测细胞是否存活。活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。机理 正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡,
台盼蓝染色法
材料:1. 显微镜、玻片、盖玻片、滴管;2. 试剂:0.4%台盼蓝染液;3. 台盼蓝(Trypan blue):0.4g;4. 生理盐水:100ml;操作步骤:1. 用Hanks液配制0.1%台盼蓝溶液;2. 用0.5%胰蛋白酶:0.2%EDTA=1:1混合液来消化培养的贴壁细胞;3. 再加入适量H
台盼蓝(trypan-blue)排斥实验
实验方法原理 台盼蓝染料不能透过活细胞正常完整的细胞膜,故活细胞不着色,但死亡细胞的细胞膜通透性增加,可使染料通过细胞膜进入细胞内,使死细胞着色呈蓝色。是最常用的检测细胞活率的方法。实验材料 细胞试剂、试剂盒 台盼蓝生理盐水仪器、耗材 显微镜玻片盖玻片滴管实验步骤 1. 将待染色细胞稀释至所需浓
台盼蓝(trypan-blue)排斥实验
实验方法原理台盼蓝染料不能透过活细胞正常完整的细胞膜,故活细胞不着色,但死亡细胞的细胞膜通透性增加,可使染料通过细胞膜进入细胞内,使死细胞着色呈蓝色。是最常用的检测细胞活率的方法。实验材料细胞试剂、试剂盒台盼蓝生理盐水仪器、耗材显微镜玻片盖玻片滴管实验步骤1. 将待染色细胞稀释至所需浓度。(方法及
细胞活性检测台盼蓝细胞计数
台盼蓝(Trypan Blue)计数法台盼蓝(BI,货号:03-102-1B)是一种蓝色细胞活性染料,无法通过结构完整的细胞膜进入细胞内部;但细胞死后,丧失细胞膜稳定性,台盼蓝会进入细胞将细胞染成蓝色,因此在细胞实验中,常规地搭配自动细胞计数仪或血球计数板,应用于分辨活细胞和死细胞、及检测细胞膜的完
活性染料-台盼蓝染色的原理和步骤
在高中生物中,用血细胞计数板对酵母菌的计数不能专门计数活细胞,但也有染色试剂专门染色活细胞的,结合计数就可以知道活细胞的数目,如台盼蓝就是一种细胞活性染料。 台盼蓝是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性,检测细胞是否存活。分子式:C34H24N6O14S4Na4。 一、台盼蓝染色的原理
台盼蓝(Trypan-Blue)染色法技术要点(一)
台盼蓝 (Trypan Blue) 染色法是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,细胞不被染色;而死细胞的胞膜不完整,通透性增加,可使台盼蓝渗入将细胞染成蓝色。因此,借助台盼蓝染色可以简单、快速地区分活细胞和死细胞。想当年小编还是初入实验室的
台盼蓝(Trypan-Blue)染色法技术要点(二)
在下面的小视频中,台盼蓝染料被缓缓加入在室温培养了168小时的Jurkat细胞。大家可以清楚地看到部分细胞被染成蓝色后迅速膨胀和破裂,染色随即变浅,细胞失去形态变成“气球“。整个过程仅几秒钟。 有视频为证,这些“气球“状物体就是死细胞的残骸。但当我们在显微镜下计数时,这些“气球”由于颜色太浅通常不会
台盼蓝(Trypan-Blue)染色法技术要点(三)
台盼蓝浓度不同的台盼蓝浓度对细胞染色会有不同影响吗?Nexcelom的科学家们将同一Jurkat细胞样本与0.4%,0.2%,0.1%,0.05%和0.025%的台盼蓝以1:1比例混合,以下是部分浓度染色后的细胞图片: 下面的直方图统计了不同浓度台盼蓝检测到的死细胞(较深着色)和“气球”状细胞的浓度
细胞凋亡的形态:生化性质实验——台盼蓝染色
实验方法原理实验材料细胞试剂、试剂盒染料混合物:0.01%台盼蓝l00μg ml吖啶橙或 100μg ml吖啶橙+100 μg ml溴化乙锭所有试剂都在PBS中制备约5×105〜5×106细胞 ml的细胞悬浮液在完全的RMPI 1640培养基仪器、耗材12 mm×75 mm的玻璃试管显微镜载玻片和2
细胞培养细胞计数时为什么要用台盼蓝染色?
参加台盼蓝后,活细胞不上色,台盼蓝上色的细胞呈深蓝色,是不健康或已逝世的细胞,不能计数。
如何解决台盼蓝染色PBMCs进行细胞计数的问题?
“为什么很难用台盼蓝染色剂来计数PBMC!有大的,小的,成团的……;你能告诉我怎么在未染色的细胞中挑出有核细胞?”小编经常被问到各种各样关于如何计数PBMC的问题,今天就借此机会跟大家分享一下。 首先,了解下人类PBMCs的组成 外周血单核细胞(Peripheral blood monoc
关于脂肪干细胞油红-O-和台盼蓝复合染色介绍
用 0.5%油红O,对成脂诱导后的各组样本进行染色。具体操作方法是:先用D-hanks将样本细胞冲洗充分,然后加入油红稀释染色10~15 min,(油红O 稀释液配制方法:0.5%饱和油红O 原液按3:2(油红O:蒸馏水)加入蒸馏水,然后过滤,待用),接下来用75%的乙醇溶液将样本分化至间质清晰
新青胜蓝惟所盼:陆婉珍传
新青胜蓝惟所盼:陆婉珍传 褚小立著 【书评推荐】 《新青胜蓝惟所盼(陆婉珍传)》由褚小立所著,陆婉珍院士一生经历了不少挫折和坎坷,但她都能泰然处之,安然度过。她之所以能如此,是因为她颇懂得科学精神:“一旦有了科学精神的武装,必然会更自觉地学习科学知识,树立科学观念,掌握科学方法;一个有着科学精神
如何用台盼兰计数活细胞?
将样品适当稀释后,用稀释后的样品和0.4%的台盼兰溶液按1:1混合后,用移液枪点样到血球计数板,置于倒置显微镜下观察、计数,其中蓝色细胞是死细胞,因活细胞排斥台盼兰,不被染色。
如何用台盼兰计数活细胞?
用无血清培养基把细胞悬液稀释到200~2000个/毫升,在0.1毫升细胞悬液中加0.1毫升0.4%的台盼兰溶液。轻轻混匀,数分钟后,用血球计数板计数细胞。活细胞排斥台盼兰,因而染成蓝色细胞是死细胞。
重型火箭推力室“落灰”-院长苦盼试车台
“最关键的燃烧装置推力室已经出来了,却没有地方试车。”两会期间,全国人大代表、中国航天科技集团第六研究院院长刘志让向科技日报记者表示,我国500吨级液氧煤油发动机的研制工作正在稳步推进,但是由于基础设施的规划没有跟上,推力室目前无法测试。 “发展航天、动力先行,规划建设应该有科学性。”刘志让
细胞计数及活力测定实验——台盼兰染色法
实验方法原理培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。 在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞,总细胞中活细胞所占的百分比叫做细胞活力,由组织中分离细胞一般也要检查活力,以了解分离的过程对细胞是否有损
锥虫蓝的作用机理
正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡,这与中性红作用相反。因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞
锥虫蓝染色剂的染色原理
正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡,这与中性红作用相反。因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞
细胞复苏注意事项
1、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例,配置相应的完全培养基,确保细胞培养条件与说明书一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由客户自行承担。每株细胞2支冻存管复苏时建议先只复苏一支,若首次复苏出现问题请及时与我们取得联系。2、取出冻存管,浸入37℃温水
手把手教您给细胞染色
细胞凋亡、细胞计数都会用到细胞染色今天我们就聊聊:新手入门如何轻松搞定细胞染色,给你的细胞一个精致瑞丽的妆容?细胞骨架的荧光染色台 盼 蓝 染 色台盼蓝染色是细胞培养常见的实验,用于细胞计数,检测细胞活性。健康的正常细胞能够排斥台盼蓝,而死亡的细胞,膜的完整性丧失,通透性增加,细胞可被台盼蓝染成蓝色
活细胞与死细胞在细胞膜通透性的差异
活细胞的细胞膜是一种选择性膜,对细胞起保护和屏障作用,只允许物质选择性的通过;而细胞死亡之后,细胞膜受损,通透性增加,常用的以台盼蓝鉴别细胞死活的方法就是利用了这一性质。台盼蓝,又称锥蓝,是一种阴离子型染料,不能透过完整的细胞膜。所以经台盼蓝染色后只能使死细胞着色,而活细胞不被着色,甲基蓝有类似
死活细胞细胞膜通透性的差异
活细胞的细胞膜是一种选择性膜,对细胞起保护和屏障作用,只允许物质选择性的通过;而细胞死亡之后,细胞膜受损,通透性增加,常用的以台盼蓝鉴别细胞死活的方法就是利用了这一性质。台盼蓝,又称锥蓝,是一种阴离子型染料,不能透过完整的细胞膜。所以经台盼蓝染色后只能使死细胞着色,而活细胞不被着色,甲基蓝有类似
细胞染色方法归纳
Hoechst染色hoechst可以穿过活细胞膜与细胞核结合 (主要为凋亡活细胞)在紫外光下将核染为蓝色. Hoechst染细胞核会影响共聚焦显微镜对该样本其他荧光的观察效果.hoechst有hoechest33342和hoechst33258两种 hoechsts33258,hoechs
锥虫蓝的基本性质
中英文名称:台盼蓝(Trypan Blue)或称台盼兰、锥虫蓝、曲利苯蓝分子式:C34H24N6O14S4Na4分子量: 960.82可溶于水(10mg/ml)是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性。还常用于检测细胞是否存活。活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。台盼蓝可被巨噬细胞吞噬,故
锥虫蓝染色剂的基本性质
中英文名称:台盼蓝(Trypan Blue)或称台盼兰、锥虫蓝、曲利苯蓝分子式:C34H24N6O14S4Na4分子量: 960.82可溶于水(10mg/ml)是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性。还常用于检测细胞是否存活。活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。台盼蓝可被巨噬细胞吞噬,故
无需染色的细胞活力检测
细胞活力是总细胞中活细胞所占的百分比,其中台盼蓝染色方法最常见。台盼蓝可穿透变性的细胞膜,与解体的DNA结合,使其着色,而活细胞能阻止染料进入细胞内,故可以鉴别死细胞与活细胞。激光全息细胞成像及分析系统可以实时监测细胞死亡过程,以及通过图像进行记录。 全息技术无需荧光和染料标记就可以得到细胞形态学数
细胞凋亡的染色观察
细胞凋亡 1、HE染色、光镜观察:凋亡细胞呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象。 2、丫啶橙(AO)染色,荧光显微镜观察:活细胞核呈黄绿色荧光,胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧,可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。 3、台盼蓝染色:如果细胞膜不完整、