（双光子、共聚焦）荧光显微镜和普通显微镜的区别
最近试着做了一些小鼠的冰冻切片，接下来要使用荧光显微镜看自己打的病毒是否在自己想要的脑区。荧光显微镜的一些基本原理需要简单学习一下，也在此分享一下。 荧光显微镜是利用紫外线为光源，用以照射被检验的物体，使该物体发出光源，然后在显微镜下进行对物体的观察。主要是用于免疫荧光细胞，主要是由光源、滤板系统和光学系统组成的在通过目镜和物镜的放大来观察样本的荧光图像。我们来看下这荧光显微镜和普通光学显微镜有什么样的区别。 1、在照明方式上看 荧光显微镜的照明方式一般是用落射式，也就是说光源是通过物镜来投放于试验样本上。 2、在分辨率上看 荧光显微镜利用的是紫外线做为光源，波长比较短，但是分辨率却高于普通的光学显微镜。 3、在滤光片上的不同 荧光显微镜是用了两个特殊的滤光片，在光源前用是用来滤出可见光，在物镜和目镜之间的使用来滤出紫外线，这样可以保护人的眼睛。 荧光显微镜也属于光学显微镜的一种，主要是荧光显微镜所激发的波长......阅读全文
多光子共聚焦扫描显微镜的原理以及应用
多光子共聚焦显微镜是光学显微镜的重大改进，主要表现为可以观察活细胞、固定细胞和组织的深层结构，并且可以得到清晰锐利的多层Z平面结构，即光学切片，并以此可以构建标本的三维实体结构。共聚焦显微镜采用激光光源，经过扩充后充满整个物镜后焦平面，然后经过物镜的透镜系统，在标本的焦平面上会聚成非常小的点。根据物
清华大学仪器共享平台双光子显微镜
仪器名称：双光子显微镜仪器编号：15017684产地：日本生产厂家：Olympus型号：FV1200MPE出厂日期：201403购置日期：201510所属单位：生命学院>蛋白质研究技术中心>细胞影像平台>设施细胞影像平台放置地点：清华大学生物医学馆U6-119固定电话：固定手机：固定email：联系
关于空间站双光子显微镜的基本介绍
空间站双光子显微镜的研制由北京大学国家生物医学成像科学中心主任程和平团队负责，基于一种双光子吸收及荧光激发的非线性光学成像技术，具有高分辨率、强三维层析能力、大成像深度等特点。 2022年，团队攻克了航天极端环境机体应激与防护等多项技术难题，最终研制出空间站双光子显微镜。 1、空间站双光子显
LSCM的双光子技术
近年来LSCM推出了双光子技术，即利用两个低能量激发光子激发一个荧光分子，其荧光波长等于一个高能量单光子直接激发一个荧光分子，却降低荧光损耗，并具有更高的激发功率和稳定的穿透力，从而提高图片分辨率，值得进行尝试和应用。总之，LSCM技术因其简单易行的前期处理、高辨识度的后期成像及无损于样品等优势，将
双光子显微镜展示学习涉及大脑的不同区域
为了探索大脑中学习和记忆的建立方式，约翰·霍普金斯大学医学院的科学家使用了激光辅助成像工具来监测和测量AMPAR分子的水平，从而有助于在老鼠大脑中的神经元之间发送信息。他们的实验增加了证据，即基于运动的学习可以发生在大脑的多个区域，即使是通常与运动控制无关的区域。科学家将带有荧光标签的编码DNA
Lavision双光子显微镜毛囊再生过程活体成像（二）
Figure 2 |生长过程中处于形态重组的干细胞progeny隔层. a, 毛囊生长中的向下伸展。生长状态的活毛囊三个连续时间点（3小时间隔）的光学切片，展示了progeny组分向下的伸展（左三） 。核间距增加，干细胞和progen隔层(大约生长初期 II to IIIa)中的总细胞数被定
微型化双光子显微镜研制十年路
今年2月上旬，神舟十五号航天员乘组使用空间站双光子显微镜，开展在轨验证实验任务并取得成功。这是目前已知的世界首次在航天飞行过程中，使用双光子显微镜获取航天员皮肤表皮及真皮浅层的三维图像。 在南京脑观象台投入使用的微型化双光子显微镜成像系统。 “第三次双光子显微镜测试顺利结束！” “无比完美
双光子荧光显微镜的技术特点和使用技巧
双光子荧光显微镜是结合了激光扫描共聚焦显微镜和双光子激发技术的一种新技术。 双光子激发的基本原理是：在高光子密度的情况下，荧光分子可以同时吸收 2 个长波长的光子，在经过一个很短的所谓激发态寿命的时间后，发射出一个波长较短的光子;其效果和使用一个波长为长波长一半的光子去激发荧光分子是相同的。双
Lavision双光子显微镜毛囊再生过程活体成像（一）
Live imaging of stem cell and progeny behaviour in physiological hair-follicle regenerationPanteleimon Rompolas1, Elizabeth R. Deschene1*, Giovanni
LaVision双光子显微镜肿瘤生长与入侵动态成像（一）
Dynamic imaging of cancer growth and invasion: a modiWedskin-fold chamber modelStephanie Alexander · Gudrun E. Koehl ·Markus Hirschberg · Edward K. Ge
双光子荧光显微镜的技术特点和使用技巧
双光子激发的基本原理是：在高光子密度的情况下，荧光分子可以同时吸收 2 个长波长的光子，在经过一个很短的所谓激发态寿命的时间后，发射出一个波长较短的光子;其效果和使用一个波长为长波长一半的光子去激发荧光分子是相同的。双光子激发需要很高的光子密度，为了不损伤细胞，双光子显微镜使用高能量锁模脉冲激光器。
双光子荧光显微镜的技术特点和使用技巧
双光子荧光显微镜是结合了激光扫描共聚焦显微镜和双光子激发技术的一种新技术。 双光子激发的基本原理是：在高光子密度的情况下，荧光分子可以同时吸收 2 个长波长的光子，在经过一个很短的所谓激发态寿命的时间后，发射出一个波长较短的光子;其效果和使用一个波长为长波长一半的光子去激发荧光分子是
LaVision双光子显微镜肿瘤生长与入侵动态成像（二）
Fig 2. 肿瘤生长阶段。 a 由落射荧光显微镜监测的移植瘤生长和入侵的时间进程。新生血管的插入，不存在（3天）和存在（7天）。标尺1mm。b 通过以day 1的体积进行归一化的肿瘤体积。mean+-SD（n=9）。c HT-1080移植肿瘤在6天的时候的肿瘤形态，血管化，分生和凋亡。
LaVision双光子显微镜肿瘤生长与入侵动态成像（三）
Fig 4. HT-1080双色细胞的原位入侵模型。a 注射后6天入侵类型的分类。缺少入侵（上，左）并且散布单个细胞（上，右；白色箭头），散射的或者紧密地丝状整体入侵（下图）。标尺250um。 b 45个连续的非依赖性肿瘤的按中所分入侵模式的频率。11天时，沿着纹状肌肉纤维集体入侵丝的定位。
共聚焦的共焦显微
共焦显微技术是由美国科学家M.Minsky在1957年提出的，当时的主要目的是消除普通光学显微镜在探测样品时产生的多种散射光。20世纪60年代通过提高扫描精度突破了普通宽场成像的分辨率限制，在20世纪80年代研制成商用共焦显微镜。共焦显微镜分为普通光照明激发和激光照明激发两种类型，而以后者应用最为广
700万！西南大学双光子显微镜采购项目公开招标
公告信息：采购项目名称双光子显微镜采购品目货物/设备/仪器仪表/光学仪器/显微镜采购单位西南大学获取招标文件时间2023年10月18日至2023年10月25日每日上午:9:00 至 12:00 下午:12:00 至 17:00（北京时间，法定节假日除外）招标文件售价￥400获取招标文件的地点《中国政
关于双光子激光扫描显微镜的主要功能介绍
双光子激光扫描显微镜是一种用于生物学、基础医学、药学领域的分析仪器，于2011年12月9日启用。 双光子激光扫描显微镜的技术指标：它包括：多光子荧光检测系统、共聚焦检测系统、光谱扫描检测系统、计算机软硬件系统等部分。 双光子激光扫描显微镜的主要功能： 双光子扫描显微镜是结合激光扫描共聚焦显
LaVision双光子显微镜无损伤无标记THG成像（一）
Label-free live brain imaging and targeted patching with third-harmonic generation microscopyStefan Wittea,b,1, Adrian Negreana,b,c, Johannes C. Lodde
Nature子刊：高速双光子显微镜可用于小鼠大脑成像
近日，美国斯坦福大学Mark J. Schnitzer及其研究小组研发出可用于清醒小鼠大脑成像的千赫兹双光子显微镜。这一研究成果于2019年10月28日在线发表于国际学术期刊《自然—方法学》。 研究人员介绍，双光子显微镜是在散射介质中成像的主要技术，通常可提供约10–30 Hz的帧采集速率。
LaVision双光子显微镜无损伤无标记THG成像（三）
Fig. 4.THG成像深度与自动化细胞检测 (A–C) 小鼠额前叶皮质的THG图像，成像深度分别为100, 200, and 300 μm 。每幅图像都是3个以2微米深度间隔独立图像的最大密度投影(D) 110 μm深度处神经元细胞的自动检测THG图像。细胞检测的运算法则定义为以红色显示的
LaVision双光子显微镜无损伤无标记THG成像（二）
主要结果Fig. 1.无标记活体大脑的三次谐波显微成像(A)脑组织THG成像的epidetection几何学图示。插图：THG原理。注意基质中没有光学激发发生。(B) 树突处的聚焦激光束。通过将激光聚焦体积设定到树突直径的几倍大小，可以获得部分相匹配，显著的THG信号将会产生。(C)细胞
简述三维双光子激光显微镜的主要功能
三维双光子激光显微镜的功能：三光子显微镜专门为大动物脑皮层双光子成像研究而设计，镜下操作空间大，系统的共振镜扫描模式，可提供32fps@512X512分辨率的高速图像，这种快速高分辨率的成像指标是该领域研究所必需的；大动物包括清醒猴实验中身体和头部需保持直立，视觉皮层不是处于水平而是有很大角度，
LaVision双光子显微镜亚细胞水平的深层组织成像（五）
结论 这些结果表明红外双光子和二次谐波产生显微成像对于无毒害的时间分辨的细胞行为调查的深层组织成像尤其有利。作为与其它脉冲飞秒激光系统相比的优势，如Ch:forsterite (1230 nm) 和 Fianium fiber (1064 nm) 激光器，OPO产生的波长是可调谐的
关于三维双光子激光显微镜的技术指标介绍
三维双光子激光显微镜是一种用于生物学领域的分析仪器，于2019年10月14日启用。 1、双光子共聚焦扫描和检测系统： 两组扫描振镜系统；共振扫描速度：512×512≥32 fps； 512×32≥496 fps；共振线扫描≥16000行/秒；扫描模式：点式扫描模式 ，同视野内不同角度、不同位置
LaVision双光子显微镜亚细胞水平的深层组织成像（一）
红外双（多）光子显微镜：亚细胞水平的深层组织成像Volker Andresen1,2, Stephanie Alexander1, Wolfgang-Moritz Heupel1, Markus Hirschberg1, Robert M Hoffman3 and Peter Friedl1,4Cu
LaVision双光子显微镜亚细胞水平的深层组织成像（四）
Figure 4．IR-MPM的光漂白，光毒性和组织穿透性. (a)以75mW能量的760, 880, and 1100 nm 激发波长连续扫描的释放光的下降时测量的DsRed2光漂白。样品被进行250次连续扫描，释放光强度以整个扫描区域的平均像素强度量化，并对首幅图像强度归一化。虚线表明了
双光子显微镜活体单细胞成像揭示生物钟发育过程
3月14日，PLOS Biology 期刊在线发表了题为《斑马鱼生物钟的活体单细胞成像》的研究论文。该研究由中国科学院脑科学与智能技术卓越创新中心（神经科学研究所）、上海脑科学与类脑研究中心、神经科学国家重点实验室严军研究组、何杰研究组与安徽医科大学附属第一医院教授李元海合作完成。该研究成功构建
LaVision双光子显微镜亚细胞水平的深层组织成像（三）
Figure 2 NIR和IR双光子激发和释放光谱。通过在同一焦平面对不同波长的Ti：Sa激光和OPO激光获取多幅图像并对扫描间的能量强度和漂白进行校正后的激发光谱。为获取红色和内在荧光团以及SHG的释放光谱，信号通过物镜，光谱仪和CCD相机检测。 (a) 自然状态下，SDS-PAGE前后的
LaVision双光子显微镜亚细胞水平的深层组织成像（二）
系统性能和Ti:Sa与OPO激光的同时使用 为了同时获取样品Ti：Sa和OPO的激发，一个分光器将Ti：Sa激光分解为泵浦OPO光束和直接成像光束(Figure 1a). 分光比例取决于足够激发所需的光亮，先后依赖于样品特征（光密度，连续性和荧光团吸收截面）和想要的成像深度。在实际应用
共定位分析应通过获得薄的光学切片来进行
对于厚度小于 5μm 的样品，比如贴壁细胞或很薄的组织切片，在常规的宽场荧光显微镜下，定量的共定位分析一般是可以的。然而，对于厚样品，图像应以具有一定轴向尺寸的光学切片来记录，来分析看起来共定位的荧光团是否真正位于同一个侧向焦平面上，或在 Z 轴上他们是否彼此叠加。厚样品的荧光团共定位分析应通过获得