液相色谱梯度洗脱中的谱带压缩效应
色谱, 2021, 39(1): 10-14 DOI: 10.3724/SP.J.1123.2020.07042 微型述评 液相色谱梯度洗脱中的谱带压缩效应 郝卫强*, 刘丽娟, 沈巧银郝卫强《色谱》青年编委 个人简介 博士,研究员,1976年出生。 1994年就读于中国药科大学药物分析专业,获学士和硕士学位。2001年就读于中国科学院大连化学物理研究所分析化学专业,获博士学位。2005年进入复旦大学化学系博士后流动工作站。出站后先后在南京大学常州高新技术研究院以及常州工程职业技术研究院工作。 长期从事液相色谱的基础与应用研究。近年来对梯度液相色谱的分离机理展开了研究,推导得到该模式下不同色谱模型的解析解。在此基础上探讨了梯度洗脱的分离特点,并运用计算机辅助的方法对实践中梯度分析条件进行了优化。 主持和参与国家、省、市项目十余项,发表论文40余篇,获中国发明ZL授权4件、软件著作权5件。荣获复旦大学优秀博士......阅读全文
高效液相色谱仪梯度洗脱曲线
高效液相色谱仪梯度洗脱时，常用一个弱极性溶剂A和一个强极性溶剂B组合，以梯度洗脱时间为横坐标，以流动相中强极性组分B的体积百分含量为纵坐标，可绘出梯度洗脱曲线。若在单位时间内，强极性溶剂B在流动相中的体积百分含量以恒定速率增加，则流动相的极性呈线性梯度输出；若不以恒定速度增加，则流动相的极性呈凸形或
梯度洗脱的优点
梯度洗脱的优点：1.缩短分析周期；2.提高分离能力；3.峰型得到改善，很少拖尾；4.增加灵敏度。但有时引起基线漂移。
梯度洗脱的原理
流动相由几种不同极性的溶剂组成，通过改变流动相中各溶剂组成的比例改变流动相的极性，使每个流出的组分都有合适的容量因子k，并使样品中的所有组分可在最短时间内实现最佳分离。具体地讲，当样品随梯度起点的流动相进入色谱柱入口时，由于起点流动相中强洗脱溶剂B含量较低，化合物C1(保留性适中)和化合物C2(保留
什么是梯度洗脱？
梯度洗脱装置梯度洗脱就是在分离过程中使两种或两种以上不同极性的溶剂按一定程序连续改变它们之间的比例，从而使流动相的强度、极性、pH值或离子强度相应地变化，达到提高分离效果，缩短分析时间的目的。梯度洗脱装置分为两类：一类是外梯度装置（又称低压梯度），流动相在常温常压下混合，用高压泵压至柱系统，仅需一台
超高效液相色谱柱洗脱技术优化策略
超高效液相色谱洗脱技术的质量取决于什么?如何利用QbD评判色谱仪洗脱质量，它除关注关键性的邻近双峰外也考虑了洗脱的稳定性。 图1 色谱洗脱技术的经验模型。模型中的影响因素有梯度时间(tG)、温度(T)、有机洗脱剂B的初始浓度(%Bs)及最终浓度(%Be)、水质洗脱液A的酸碱度pH值以及
影响液相色谱仪梯度洗脱的因素
液相色谱仪进行梯度洗脱时，选定溶剂A、B之后，设定梯度速度和梯度时间，确定梯度曲线形状，要以最经济的梯度洗脱程序，实现样品的最佳化分离。影响梯度洗脱的因素有：1、溶剂的纯度要高，否则会使梯度洗脱的重现性变坏。2、梯度混合的溶剂互溶性要好，应防止不互溶的溶剂进入色谱柱。3、注意溶剂的粘度和密度对混合流
高效液相色谱仪的梯度洗脱技术
高效液相色谱仪在进行多成分的复杂样品分离时，经常会碰到前面的一些成分分离不完全，后面的一些成分分离度太大，且出峰很晚和峰形较差。为了使保留值相差很大的多种成分在合理的时间内全部洗脱并相互分离，往往要用到梯度洗脱技术。在高效液相色谱仪中流速（压力）梯度洗脱和温度梯度洗脱效果不大，而且会带来一些不利影响
高效液相色谱仪的梯度洗脱技术
高效液相色谱仪在进行多成分的复杂样品分离时，经常会碰到前面的一些成分分离不完全，后面的一些成分分离度太大，且出峰很晚和峰形较差。为了使保留值相差很大的多种成分在合理的时间内全部洗脱并相互分离，往往要用到梯度洗脱技术。在高效液相色谱仪中流速（压力）梯度洗脱和温度梯度洗脱效果不大，而且会带来一些不利影响
高效液相色谱跑梯度如何平衡基线？
首先，当梯度完成时，基线漂移是正常的，但是基线漂移的严重性可以通过以下措施来改善1.梯度前，最好用纯有机溶剂冲洗高效液相色谱柱，或使用新高效液相色谱柱，以防止高效液相色谱柱中的残留物导致基线漂移。2.试剂纯度优选为普通色谱纯试剂。如果纯度不够，梯度过程中也会出现基线漂移。3.控制室或柱温，防止温度波
液相色谱等度梯度有什么不同
新手学液相色谱，会碰到两种洗脱方式：等度洗脱和梯度洗脱，什么情况下会用到等度，哪些条件下用梯度，有什么不同？ 1、洗脱的改变与不改变的配比不同 等度洗脱：流动相的组成比例和流速恒定不变。 梯度洗脱：改变流动相的浓度配比。 2、它们的定义不同 等度洗脱定义：液相色谱操
液相色谱等度和梯度的区别
等度洗脱是指实验过程中(做样过程)从头到尾只用一种流动相。也就是只用一个泵，输送同一种流动相。 梯度洗脱是指在同一个分析周期中随着时间的变化按一定程序梯度性地改变洗脱液的比例(浓度配比、成 分、离子强度、溶液极性等)或pH，以期将层析柱上不同的组分洗脱出来的方法。从而可以使一个复杂样品中性质(
液相色谱等度梯度有什么不同
新手学液相色谱，会碰到两种洗脱方式：等度洗脱和梯度洗脱，什么情况下会用到等度，哪些条件下用梯度，有什么不同？ 1、洗脱的改变与不改变的配比不同 等度洗脱：流动相的组成比例和流速恒定不变。 梯度洗脱：改变流动相的浓度配比。 2、它们的定义不同 等度洗脱定义：液相色谱操
气相色谱仪的谱带展宽
气相色谱仪的谱带展宽有时间性谱带展宽和空间性谱带展宽等。一、时间性谱带展宽：气相色谱仪不分流进样时，在气化室中气化的含有大量溶剂的样品不可能瞬间进入毛细管柱，溶剂峰会严重拖尾，使早流出组分的色谱峰被掩盖在溶剂拖尾峰中，从而使分析变得困难甚至不可能。这种由于进样时间延长引起的色谱峰展宽称为时间性谱带展
高效液相色谱质谱与液相色谱质谱有什么区别
高效液相色谱-质谱与液相色谱-质谱有什么区别一样的，HPLC-MS联用现在的液相色谱仪均属于高效液相，是采用高压色谱柱洗脱分离
影响高效液相色谱仪梯度洗脱的因素
高效液相色谱仪进行梯度洗脱时，选定溶剂A、B之后，设定梯度速度和梯度时间，确定梯度曲线形状，要以最经济的梯度洗脱程序，实现样品的最佳化分离。影响梯度洗脱的因素有：1、溶剂的纯度要高，否则会使梯度洗脱的重现性变坏。2、梯度混合的溶剂互溶性要好，应防止不互溶的溶剂进入色谱柱。3、注意溶剂的粘度和密度对混
影响高效液相色谱仪梯度洗脱的因素
高效液相色谱仪进行梯度洗脱时，选定溶剂A、B之后，设定梯度速度和梯度时间，确定梯度曲线形状，要以最经济的梯度洗脱程序，实现样品的最佳化分离。影响梯度洗脱的因素有：1、溶剂的纯度要高，否则会使梯度洗脱的重现性变坏。2、梯度混合的溶剂互溶性要好，应防止不互溶的溶剂进入色谱柱。3、注意溶剂的粘度和密度对混
高效液相色谱法仪器的梯度洗脱介绍
类似于GC中的程序升温。已成为现代高效液相色谱中不可缺少的部分。梯度洗提，就是载液中含有两种（或更多）不同极性的溶剂，在分离过程中按一定的程序连续改变载液中溶剂的配比和极性，通过载液中极性的变化来改变被分离组分的分离因素，以提高分离效果。梯度洗提可以分为两种： a.低压梯度（也叫外梯度）：在常
影响高效液相色谱仪梯度洗脱的因素
高效液相色谱仪进行梯度洗脱时，选定溶剂A、B之后，设定梯度速度和梯度时间，确定梯度曲线形状，要以最经济的梯度洗脱程序，实现样品的最佳化分离。影响梯度洗脱的因素有： 1、溶剂的纯度要高，否则会使梯度洗脱的重现性变坏。 2、梯度混合的溶剂互溶性要好，应防止不互溶的溶剂进入色谱柱。
液相色谱仪的梯度洗脱类型与实质
液相色谱仪的梯度洗脱是指在同一个色谱分析周期中，按一定程度不断改变流动相的浓度配比。梯度洗脱又称梯度淋洗或程序洗脱。一、梯度洗脱类型：1、高压梯度：采用两台高压输液泵，分别按设定的比例输送A和B两种溶液至混合器，混合器在泵之后，两种溶液在高压状态下混合。2、低压梯度：只需一台高压输液泵，比例阀在泵之
高效液相色谱法的梯度洗脱的介绍
类似于GC中的程序升温。已成为现代高效液相色谱中不可缺少的部分。梯度洗提，就是载液中含有两种（或更多）不同极性的溶剂，在分离过程中按一定的程序连续改变载液中溶剂的配比和极性，通过载液中极性的变化来改变被分离组分的分离因素，以提高分离效果。梯度洗提可以分为两种： a.低压梯度（也叫外梯度）：在常
梯度洗脱的技术条件
①洗脱液体积应足够大，一般要几十倍于床体积，从而使分离的各峰不致于太拥挤。②梯度的上限要足够高，使紧密吸附的物质能被洗脱下来。③梯度不要上升太快，要恰好使移动的区带在快到柱末端时达到解吸状态。目的物的过早解吸，会引起区带扩散；而目的物的过晚解吸会使峰形过宽。
梯度洗脱的技术特点
提高柱效，改善检测器的灵敏度。当样品中的一个峰的k值和最后一个峰的k值相差几十倍至几百倍时，使用梯度洗脱效果特别好。梯度洗脱中为保证流速的稳定，必须使用恒流泵，否则难获重复结果。梯度洗脱常用一个弱极性的溶剂A和一个强极性的溶剂B。（一种原理，前者为洗脱装置和柱子之间封闭，适用于配备压力泵的色谱柱，后
梯度洗脱的技术特点
提高柱效，改善检测器的灵敏度。当样品中的一个峰的k值和最后一个峰的k值相差几十倍至几百倍时，使用梯度洗脱效果特别好。梯度洗脱中为保证流速的稳定，必须使用恒流泵，否则难获重复结果。梯度洗脱常用一个弱极性的溶剂A和一个强极性的溶剂B。（一种原理，前者为洗脱装置和柱子之间封闭，适用于配备压力泵的色谱柱，后
梯度洗脱装置怎么分类
梯度洗脱装置分为两类：一类是外梯度装置（又称低压梯度），流动相在常温常压下混合，用高压泵压至柱系统，仅需一台泵即可。另一类是内梯度装置（又称高压梯度），将两种溶剂分别用泵增压后，按电器部件设置的程序，注入梯度混合室混合，再输至柱系统。
高压液相色谱四元低压梯度泵系统
高压液相色谱-四元低压梯度泵系统是一种用于基础医学、临床医学、药学、中医学与中药学领域的分析仪器，于2008年12月1日启用。 技术指标 术参数 流速 0.001-20.000ml/min 压力 Stainless Steel：0-6,000psi 脉动 ≤0.8%@1ml/min and
液相色谱－质谱联用实验
实验方法原理质谱分析法是通过对被测样品离子的质荷比的测定来进行分析的一种分析方法。被分析的样品首先要离子化，然后利用不同离子在电场或磁场的运动行为的不同，把离子按质荷比（m/z）分开而得到质谱，通过样品的质谱和相关信息，可以得到样品的定性定量结果。质谱分析法主要是通过对样品的离子的质荷比的分析而实现
液相色谱－质谱联用实验
实验方法原理 质谱分析法是通过对被测样品离子的质荷比的测定来进行分析的一种分析方法。被分析的样品首先要离子化，然后利用不同离子在电场或磁场的运动行为的不同，把离子按质荷比（m/z）分开而得到质谱，通过样品的质谱和相关信息，可以得到样品的定性定量结果。质谱分析法主要是通过对样品的离子的质荷比的分析而实
液相色谱质谱联用仪
LC-MS联用仪主要由高效液相色谱，接口装置(同时也是电离源)，质谱仪组成。高效液相色谱与一般的液相色谱相同，其作用是将混合物样品分离后进入质谱仪。此处从略。仅介绍接口装置和质谱仪部分。 LC-MS接口装置 LC-MS联用的关键是LC和MS之间的接口装置。接口装置的主要作用是去除溶剂并使样
高效液相色谱仪的梯度洗脱类型与实质
高效液相色谱仪的梯度洗脱是指在同一个色谱分析周期中，按一定程度不断改变流动相的浓度配比。梯度洗脱又称梯度淋洗或程序洗脱。一、梯度洗脱类型： 1、高压梯度：采用两台高压输液泵，分别按设定的比例输送A和B两种溶液至混合器，混合器在泵之后，两种溶液在高压状态下混合。 2、低压梯度：只需一台高压输
高效液相色谱仪的梯度洗脱类型与实质
高效液相色谱仪的梯度洗脱是指在同一个色谱分析周期中，按一定程度不断改变流动相的浓度配比。梯度洗脱又称梯度淋洗或程序洗脱。一、梯度洗脱类型：1、高压梯度：采用两台高压输液泵，分别按设定的比例输送A和B两种溶液至混合器，混合器在泵之后，两种溶液在高压状态下混合。2、低压梯度：只需一台高压输液泵，比例阀在