高效液相色谱法的梯度洗脱的介绍
类似于GC中的程序升温。已成为现代高效液相色谱中不可缺少的部分。梯度洗提,就是载液中含有两种(或更多)不同极性的溶剂,在分离过程中按一定的程序连续改变载液中溶剂的配比和极性,通过载液中极性的变化来改变被分离组分的分离因素,以提高分离效果。梯度洗提可以分为两种: a.低压梯度(也叫外梯度):在常压下,预先按一定程序将两种或多种不同极性的溶剂混合后,再用一台高压泵输入色谱柱。 b.高压梯度 ( 或称内梯度系统 ) :利用两台高压输液泵,将两种不同极性的溶剂按设定的比例送入梯度混合室,混合后,进入色谱柱。......阅读全文
高效液相色谱法的梯度洗脱的介绍
类似于GC中的程序升温。已成为现代高效液相色谱中不可缺少的部分。梯度洗提,就是载液中含有两种(或更多)不同极性的溶剂,在分离过程中按一定的程序连续改变载液中溶剂的配比和极性,通过载液中极性的变化来改变被分离组分的分离因素,以提高分离效果。梯度洗提可以分为两种: a.低压梯度(也叫外梯度):在常
高效液相色谱法仪器的梯度洗脱介绍
类似于GC中的程序升温。已成为现代高效液相色谱中不可缺少的部分。梯度洗提,就是载液中含有两种(或更多)不同极性的溶剂,在分离过程中按一定的程序连续改变载液中溶剂的配比和极性,通过载液中极性的变化来改变被分离组分的分离因素,以提高分离效果。梯度洗提可以分为两种: a.低压梯度(也叫外梯度):在常
液相色谱法术语概念梯度洗脱
梯度洗脱(gradient elution)间断地或连续地改变流动相的组成或其他操作条件,从而改变其色谱洗脱能力的过程。
关于高效液相色谱设备的梯度洗脱的介绍
类似于GC中的程序升温。已成为现代高效液相色谱中不可缺少的部分。梯度洗提,就是载液中含有两种(或更多)不同极性的溶剂,在分离过程中按一定的程序连续改变载液中溶剂的配比和极性,通过载液中极性的变化来改变被分离组分的分离因素,以提高分离效果。梯度洗提可以分为两种: a.低压梯度(也叫外梯度):在常
高效液相色谱仪的梯度洗脱
高效液相色谱仪的梯度洗脱是指在一个分析周期内按一定程序连续变化流动相的浓度配比、极性、PH 值或离子强度。对于复杂混合物,特别是保留性能相差较大的混合物,梯度洗脱是改进高效液相色谱仪分离效果的重要手段。一、工作原理:流动相由两种(或多种)不同极性的溶剂组成,通过改变流动相中各溶剂组成的比例而改变流动
高效液相色谱仪的梯度洗脱技术
高效液相色谱仪在进行多成分的复杂样品分离时,经常会碰到前面的一些成分分离不完全,后面的一些成分分离度太大,且出峰很晚和峰形较差。为了使保留值相差很大的多种成分在合理的时间内全部洗脱并相互分离,往往要用到梯度洗脱技术。在高效液相色谱仪中流速(压力)梯度洗脱和温度梯度洗脱效果不大,而且会带来一些不利影响
高效液相色谱仪的梯度洗脱技术
高效液相色谱仪在进行多成分的复杂样品分离时,经常会碰到前面的一些成分分离不完全,后面的一些成分分离度太大,且出峰很晚和峰形较差。为了使保留值相差很大的多种成分在合理的时间内全部洗脱并相互分离,往往要用到梯度洗脱技术。在高效液相色谱仪中流速(压力)梯度洗脱和温度梯度洗脱效果不大,而且会带来一些不利影响
高效液相色谱仪梯度洗脱曲线
高效液相色谱仪梯度洗脱时,常用一个弱极性溶剂A和一个强极性溶剂B组合,以梯度洗脱时间为横坐标,以流动相中强极性组分B的体积百分含量为纵坐标,可绘出梯度洗脱曲线。若在单位时间内,强极性溶剂B在流动相中的体积百分含量以恒定速率增加,则流动相的极性呈线性梯度输出;若不以恒定速度增加,则流动相的极性呈凸形或
影响高效液相色谱仪梯度洗脱的因素
高效液相色谱仪进行梯度洗脱时,选定溶剂A、B之后,设定梯度速度和梯度时间,确定梯度曲线形状,要以最经济的梯度洗脱程序,实现样品的最佳化分离。影响梯度洗脱的因素有:1、溶剂的纯度要高,否则会使梯度洗脱的重现性变坏。2、梯度混合的溶剂互溶性要好,应防止不互溶的溶剂进入色谱柱。3、注意溶剂的粘度和密度对混
影响高效液相色谱仪梯度洗脱的因素
高效液相色谱仪进行梯度洗脱时,选定溶剂A、B之后,设定梯度速度和梯度时间,确定梯度曲线形状,要以最经济的梯度洗脱程序,实现样品的最佳化分离。影响梯度洗脱的因素有: 1、溶剂的纯度要高,否则会使梯度洗脱的重现性变坏。 2、梯度混合的溶剂互溶性要好,应防止不互溶的溶剂进入色谱柱。
影响高效液相色谱仪梯度洗脱的因素
高效液相色谱仪进行梯度洗脱时,选定溶剂A、B之后,设定梯度速度和梯度时间,确定梯度曲线形状,要以最经济的梯度洗脱程序,实现样品的最佳化分离。影响梯度洗脱的因素有:1、溶剂的纯度要高,否则会使梯度洗脱的重现性变坏。2、梯度混合的溶剂互溶性要好,应防止不互溶的溶剂进入色谱柱。3、注意溶剂的粘度和密度对混
梯度洗脱的优点
梯度洗脱的优点:1.缩短分析周期;2.提高分离能力;3.峰型得到改善,很少拖尾;4.增加灵敏度。但有时引起基线漂移。
梯度洗脱的原理
流动相由几种不同极性的溶剂组成,通过改变流动相中各溶剂组成的比例改变流动相的极性,使每个流出的组分都有合适的容量因子k,并使样品中的所有组分可在最短时间内实现最佳分离。具体地讲,当样品随梯度起点的流动相进入色谱柱入口时,由于起点流动相中强洗脱溶剂B含量较低,化合物C1(保留性适中)和化合物C2(保留
液相色谱法术语概念线性溶剂强度梯度洗脱
线性溶剂强度梯度洗脱(linear solvent strength gradient elution)流动相中溶剂强度参数较强或较弱的组分的体积百分数随时间或洗脱体积呈线性变化。
梯度洗脱分类
梯度洗脱可分为低压梯度(又称为外梯度)和高压梯度(又称为内梯度)。(1)低压梯度装置。低压梯度是采用比例调节阀,在常压下预先按一定的程序将溶剂混合后,再用泵输入色谱柱系统,也称为泵前混合。(2)高压梯度装置。由两台(或多台)高压输液泵、梯度程序控制器(或计算机及接口板控制)、混合器等部件所组成。两台
高效液相色谱仪的梯度洗脱类型与实质
高效液相色谱仪的梯度洗脱是指在同一个色谱分析周期中,按一定程度不断改变流动相的浓度配比。梯度洗脱又称梯度淋洗或程序洗脱。一、梯度洗脱类型: 1、高压梯度:采用两台高压输液泵,分别按设定的比例输送A和B两种溶液至混合器,混合器在泵之后,两种溶液在高压状态下混合。 2、低压梯度:只需一台高压输
高效液相色谱梯度洗脱时应该注意的问题
在进行梯度洗脱时,由于多种溶剂混合,而且组成不断变化,因此必然带来一些特殊的问题,我们必须充分地重视。 1、要注意溶剂的互溶性,不相混溶的溶剂不能用作梯度洗脱的流动相。有些溶剂在一定的比例内互溶,超出一定的范围后就不会互溶。例如:乙腈和1mol/L的醋酸铵(pH5.16)做梯度洗脱,乙
在高效液相色谱中梯度洗脱装置的作用
梯度洗脱装置分两种:高压梯度:用两台高压输液泵将两种溶剂输入低压梯度:在常压下将两种溶剂(或多元溶剂)混合,然后用高压输液泵将流动相输入到色谱柱中。梯度洗脱可提高分离度、缩短分离时间、降低最小检测量和提高分离精度。但在使用中,梯度洗脱也有许多与等度洗脱不同的地方需要注意。梯度洗脱时应注意:1、注意各
高效液相色谱仪的梯度洗脱类型与实质
高效液相色谱仪的梯度洗脱是指在同一个色谱分析周期中,按一定程度不断改变流动相的浓度配比。梯度洗脱又称梯度淋洗或程序洗脱。一、梯度洗脱类型:1、高压梯度:采用两台高压输液泵,分别按设定的比例输送A和B两种溶液至混合器,混合器在泵之后,两种溶液在高压状态下混合。2、低压梯度:只需一台高压输液泵,比例阀在
高效液相色谱梯度洗脱时应该注意的问题
在进行梯度洗脱时,由于多种溶剂混合,而且组成不断变化,因此必然带来一些特殊的问题,我们必须充分地重视。 1、要注意溶剂的互溶性,不相混溶的溶剂不能用作梯度洗脱的流动相。有些溶剂在一定的比例内互溶,超出一定的范围后就不会互溶。例如:乙腈和1mol/L的醋酸铵(pH5.16)做梯度洗脱,乙腈含量超过70
高效液相色谱梯度洗脱时应该注意的问题
在进行梯度洗脱时,由于多种溶剂混合,而且组成不断变化,因此必然带来一些特殊的问题,我们必须充分地重视。 1、要注意溶剂的互溶性,不相混溶的溶剂不能用作梯度洗脱的流动相。有些溶剂在一定的比例内互溶,超出一定的范围后就不会互溶。例如:乙腈和1mol/L的醋酸铵(pH5.16)做梯度洗脱,乙
梯度洗脱的技术特点
提高柱效,改善检测器的灵敏度。当样品中的一个峰的k值和最后一个峰的k值相差几十倍至几百倍时,使用梯度洗脱效果特别好。梯度洗脱中为保证流速的稳定,必须使用恒流泵,否则难获重复结果。梯度洗脱常用一个弱极性的溶剂A和一个强极性的溶剂B。(一种原理,前者为洗脱装置和柱子之间封闭,适用于配备压力泵的色谱柱,后
梯度洗脱的技术特点
提高柱效,改善检测器的灵敏度。当样品中的一个峰的k值和最后一个峰的k值相差几十倍至几百倍时,使用梯度洗脱效果特别好。梯度洗脱中为保证流速的稳定,必须使用恒流泵,否则难获重复结果。梯度洗脱常用一个弱极性的溶剂A和一个强极性的溶剂B。(一种原理,前者为洗脱装置和柱子之间封闭,适用于配备压力泵的色谱柱,后
梯度洗脱的技术条件
①洗脱液体积应足够大,一般要几十倍于床体积,从而使分离的各峰不致于太拥挤。②梯度的上限要足够高,使紧密吸附的物质能被洗脱下来。③梯度不要上升太快,要恰好使移动的区带在快到柱末端时达到解吸状态。目的物的过早解吸,会引起区带扩散;而目的物的过晚解吸会使峰形过宽。
什么是梯度洗脱?
梯度洗脱装置梯度洗脱就是在分离过程中使两种或两种以上不同极性的溶剂按一定程序连续改变它们之间的比例,从而使流动相的强度、极性、pH值或离子强度相应地变化,达到提高分离效果,缩短分析时间的目的。梯度洗脱装置分为两类:一类是外梯度装置(又称低压梯度),流动相在常温常压下混合,用高压泵压至柱系统,仅需一台
梯度洗脱的概念和目的
梯度洗脱(gradient elution)又称为梯度淋洗或程序洗脱。在同一个分析周期中,按一定程度不断改变流动相的浓度配比,称为梯度洗脱。在气相色谱中,为了改善对宽沸程样品的分离和缩短分析周期,广泛采用程序升温的方法。而在液相色谱中对组分复杂的样品则采用梯度洗脱的方法。在同一个分析周期中,按一定程
梯度洗脱的概念和用途
梯度洗脱(gradient elution)又称为梯度淋洗或程序洗脱。在同一个分析周期中,按一定程度不断改变流动相的浓度配比,称为梯度洗脱。在气相色谱中,为了改善对宽沸程样品的分离和缩短分析周期,广泛采用程序升温的方法。而在液相色谱中对组分复杂的样品则采用梯度洗脱的方法。在同一个分析周期中,按一定程
高效液相色谱的梯度洗脱实验具体操作如何
高灵敏度:紫外检测器可达0.01ng,进样量在μL数量级。应用范围广:百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析,特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析,显示出优势。柱子可反复使用:用一根柱子可分离不同化合物样品量少、容易回收:样品经过色谱柱后不被破坏,可以收集单一组分或做制备
梯度洗脱装置怎么分类
梯度洗脱装置分为两类:一类是外梯度装置(又称低压梯度),流动相在常温常压下混合,用高压泵压至柱系统,仅需一台泵即可。另一类是内梯度装置(又称高压梯度),将两种溶剂分别用泵增压后,按电器部件设置的程序,注入梯度混合室混合,再输至柱系统。
梯度洗脱时,高效液相基线下降,怎么回事
使用高效液相色谱仪时,监视器的基线不平的原因包括:1、未平衡,2、梯度 ,3、柱内滞留杂质出峰解决办法:A、峰拖尾 原因 解决方法 1、筛板阻塞 1、a、反冲色谱柱 b、更换进口筛板 c、更换色谱柱 2、色谱柱塌陷 2、填充色谱柱 3、干扰峰 3、a、使用更长的色谱柱 b、改变流动相或更换色谱柱 4