Nature|胚胎干细胞悬浮培养首次构建体外类囊胚
哺乳动物的发育起源于受精卵，受精卵通过分裂，经历了2-cell、4-cell、8-cell、桑葚胚（Morula）再到囊胚（Blastocyst）阶段，称之为着床前胚胎（pre-implantation）。随后胚胎植入子宫壁，诱导子宫内膜蜕膜化（decidualization）预示着成功着床（implantation）。着床后胚胎通过原肠作用形成外胚层/内胚层和中胚层，不同胚层细胞相互作用，为胚胎形成结构复杂的器官奠定基础。 复杂的生命历程有着复杂的分子调节机制，为了研究这些复杂的科学问题， 科研人员研发了 体外培养体系 。类器官（Organoids）的出现，为研究器官形成和人类疾病发生等问题，打开了新的篇章。目前，类器官模型已经成功应用于许多器官模型的建立，如脑、肝、肾等。类器官模型在研究疾病发生和药物筛选方面发挥着重要的作用。 人工培育胚胎作为胚胎研究的类器官一直受到科学家的广泛关注：2016年，研究人员成功......阅读全文
体外培养细胞包括了什么
在这里对于体外培养细胞所有情况则包括了初代培养与各种细胞系的培养，则就是说当体外培养细胞生长达到一定的密度后，则都是需要进行传代处理的。而在这里我们所说的传代的频率与培养液体的性能性质，以及接种的细胞数量与增殖速度是相关的。这就是说接种的细胞数量越大则细胞基数就越大，而在相同的增殖速度下细胞数量增加
体外培养贴壁细胞特点
贴附并伸展，是多数体外培养细胞的基本生长特点。细胞贴壁的过程使形态发生很大变化，细胞形态改变是细胞内骨架（真核细胞中的蛋白纤维网架体系，由微管、微丝及中间纤维组成的体系）本身和细胞外基质共同作用的结果。培养细胞在未贴附于底物之前一般均似球体样，当与底物贴附后，细胞将逐渐伸展而形成一定的形态，呈成纤维
原代细胞体外培养现状
原代细胞自然生长有两种方式，锚定依赖或非锚定依赖，这主要取决于它们在体内的组织来源：外周血（非锚定依赖）或固体组织器官（锚定依赖）。原代细胞一旦分离后，24-48h内需要进行贴壁或起始，开始培养。 广义地说，所有的哺乳动物细胞，无论其类型或来源，都需要在与人类生理条件（即37°C，5%CO2）
体外培养细胞的形态特征
体外培养细胞根据它们在培养器皿是否能贴附于支持物上生长特征，可分为贴附型生长和悬浮型生长两大类。贴附型细胞在培养时能贴附在支技物表面生长。如羊水细胞为贴附型细胞，常表现为成纤维型细胞和上皮细胞生长。悬浮型细胞在培养中悬浮生长。1、成纤维型细胞在培养中的细胞凡形态与成纤维细胞类似时，皆可称之为成纤维细
类器官构建的三要素
细胞分化物理特征关键信号路径的激活/抑制原始细胞的类型及条件
研究人员培育出濒危白犀牛囊胚－挽救濒危动物现希望
英国《自然·通讯》杂志5日发表的一项研究报告称，科学家利用辅助生殖技术，已能培育出濒临灭绝的北方白犀牛（NWR）和其近亲亚种的杂交胚胎。虽然此前研究人员曾对马等大型哺乳动物进行过体外受精，但这项研究是首个将犀牛胚胎在体外成功培养至囊胚期的例子。这一技术有望让濒危基因得以保留，大大提高了部分保存
人类胚胎体外发育首次突破10天
来自美国和英国的两个研究小组分别在最近出版的《自然》和《自然—细胞生物学》杂志上发表论文称，他们将人类胚胎体外发育的时间提高到10天以上。这两项研究不仅突破了此前难以超越的7天之限，还将曾经遥不可及的“14天规则”一下拉近到了眼前。问世30余年的人类胚胎研究“14天规则”或因此面临修订。 美国
胚胎干细胞培养技术大全
MEDIA AND SOLUTIONS REQUIRED FOR ROUTINE ES CELL CULTURERoutine Culturing of ES CellsISOLATION OF PRIMARY MOUSE EMBRYO FIBROBLASTSMITOMYCIN C TREATMEN
小鼠胚胎干细胞培养实验
体外分化法 实验方法原理 胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择（第3步），在有bFGF存
小鼠胚胎干细胞培养实验
体外分化法 实验方法原理 胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择（第3步），在有bFGF存
小鼠胚胎干细胞培养实验
实验方法原理 胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择（第3步），在有bFGF存在的情况下扩增（第4步）并最终分化在第5步。细胞全程培养在37℃，5％CO2，100％湿度条件下。一般体外诱导向神经细胞方向分化，也可以采用低浓度的RA进
Nature重大突破：构建原始态iPS细胞
将人类胚胎干细胞投入医学应用的障碍之一正是在于它们极其具有前景的一个特征：天生能够快速分化为其他的细胞类型。直到现在，科学家们一直无法有效地将胚胎干细胞维持在它们的原始干细胞状态。而一直被提出来替代胚胎干细胞的重编程成体细胞——诱导多能干细胞(iPS细胞)也具有相似的局限性。尽管这些iPS细胞能
《自然》：基因重组可制造“类胚胎干细胞”
科学家有望摆脱对卵子和晶胚的依赖，干细胞个体治疗获得希望 由于胚胎干细胞可以发展成任何种类的身体组织，因此一直受到科学家的高度重视。最近，三个独立的科研小组的研究成果表明，对正常小鼠细胞进行基因重组改造，能够成功制造出“胚胎干细胞”，几乎与源于晶胚的胚胎干细胞没有区别。这一技术有望使科学家摆脱了对
PNAS：首次发现过渡型人类胚胎干细胞
先兆子痫是一种孕期疾病，其并发症可能导致孕妇提前接受紧急剖腹产手术。科学家认为引发先兆子痫的因素有很多，其中包括胎盘着床过浅。而美国密苏里大学的研究人员在培育胎盘细胞以更好地研究先兆子痫诱因的过程中，偶然发现了一种以前未知的新形式人类胚胎干细胞。这些新的干细胞有望帮助推进先兆子痫和很多其他人类生
PNAS：－首次发现过渡型人类胚胎干细胞
先兆子痫是一种孕期疾病，其并发症可能导致孕妇提前接受紧急剖腹产手术。科学家认为引发先兆子痫的因素有很多，其中包括胎盘着床过浅。而美国密苏里大学的研究人员在培育胎盘细胞以更好地研究先兆子痫诱因的过程中，偶然发现了一种以前未知的新形式人类胚胎干细胞。这些新的干细胞有望帮助推进先兆子痫和很多其他人类生
人的单倍体胚胎干细胞的建立方法
5月17日，国际著名学术期刊Cell Research在线发表了中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所李劲松研究组和上海交大仁济医院陈子江研究组的合作研究论文，该研究建立了来自人孤雌囊胚的单倍体胚胎干细胞系。 哺乳动物，包括小鼠、大鼠和猴，其单倍体胚胎干细胞的建立为遗传
粘附细胞培养与悬浮培养之间有何区别？
细胞培养实验有两种基本的细胞生长系统：在人工基质上的单层培养（即粘附培养）或在培养基中自由漂浮（悬浮培养）。来源于脊椎动物的大部分细胞，除造血细胞系及少数其它细胞系外，均依赖固着性的生长，因此需要专门培养于适当的基质上，且该基质必须经过特殊处理，才能成功地粘附和扩增（即组织-培养处理）。不过，许多细
类器官的发展历程
1907年，Henry Van 发现物理分离的海绵细胞可以重现聚集，自行组成一个新的功能完善的海绵。在接下来的几十年里，脊椎动物中也发现了相似的细胞分离再聚合现象，例如1944年Holtfreter的两栖动物肾组织实验和1960年Weiss的禽类胚胎实验。1961年 Piercehe和 Verney
4L分批式搅拌悬浮培养
实验方法原理 小规模培养细胞，然后将细胞加人预温和预充有 5% CO2 的培养液抽吸瓶中。利用喷射法缓慢搅拌细胞悬液直至达到所需的细胞浓度，然后收集细胞。实验材料 D-PBSA二氧化碳试剂、试剂盒 抗泡沫剂仪器、耗材 发酵培养瓶生长培养基内流式无菌微孔滤膜磁铁搅拌子电子细胞计数器或血细胞计数板实验步
4L分批式搅拌悬浮培养
实验方法原理 小规模培养细胞，然后将细胞加人预温和预充有 5% CO2 的培养液抽吸瓶中。利用喷射法缓慢搅拌细胞悬液直至达到所需的细胞浓度，然后收集细胞。 实验材料
4L分批式搅拌悬浮培养
4L分批式搅拌悬浮培养 实验方法原理 小规模培养细胞，然后将细胞加人预温和预充有 5% CO2 的培养液抽吸瓶中。利用喷射法缓慢搅拌细胞悬液直至达到所需的细胞
烟草或胡萝卜的悬浮培养方法
实验概要把烟草或胡萝卜愈伤驯化成悬浮细胞。主要试剂1. 附加2%蔗糖，1%甘露醇，500mg/L水解乳蛋白，1.5ml/L 2，4-D的MS培养基，PH调到5.6~6.2。2. 8%三氧化铬（CrO3）。实验材料松软的烟草或胡萝卜愈伤组织。实验步骤1. 用镊子夹取出生长旺盛的松软愈伤组织，放入三角瓶
4L分批式搅拌悬浮培养
实验方法原理小规模培养细胞，然后将细胞加人预温和预充有 5% CO2 的培养液抽吸瓶中。利用喷射法缓慢搅拌细胞悬液直至达到所需的细胞浓度，然后收集细胞。实验材料D-PBSA二氧化碳试剂、试剂盒抗泡沫剂仪器、耗材发酵培养瓶生长培养基内流式无菌微孔滤膜磁铁搅拌子电子细胞计数器或血细胞计数板实验步骤安装大
悬浮培养细胞生长曲线的绘制实验
实验方法原理以三种不同细胞浓度进行系列细胞培养，每天计数细胞直至平台期。实验步骤材料无菌悬浮细胞培养培养液，l00 mlD-PBSA(细胞计数用）24 孔板非无菌装培养板的塑料盒CO2 温箱或 5% C02 以充盈塑料盒操作步骤1. 如单层培养那样（见方案 21.8 ) 将生长液中的细胞悬液以不同浓
悬浮培养细胞生长曲线的绘制实验
实验方法原理以三种不同细胞浓度进行系列细胞培养，每天计数细胞直至平台期。实验步骤 材料 无菌 悬浮细胞培养 培养液，l00 ml D-PBSA(细胞计数用） 24 孔板 非无菌 装培养板的塑料盒 CO2 温箱或 5% C02 以充盈塑料盒 操作步骤 1. 如单层培养那样（见方案 21.8
4L分批式搅拌悬浮培养
实验方法原理 小规模培养细胞，然后将细胞加人预温和预充有 5% CO2 的培养液抽吸瓶中。利用喷射法缓慢搅拌细胞悬液直至达到所需的细胞浓度，然后收集细胞。 实验材料
悬浮细胞能用培养皿养吗
体外培养细胞重要的生长特点有：贴附和伸展以及接触抑制和生长的密度限制。贴附并伸展，是多数体外培养细胞的基本生长特点。虽然血细胞如淋巴细胞在活体体内并无聚集的倾向并在体外可于悬浮状态中生长，但是大多数的哺乳动物细胞在体内和体外均附着于一定的底物而生长，在体外时这些底物可以是其他细胞、胶原、玻璃或塑
4L分批式搅拌悬浮培养
4L分批式搅拌悬浮培养 实验方法原理 小规模培养细胞，然后将细胞加人预温和预充有 5% CO2 的培养液抽吸瓶中。利用喷射法缓慢搅拌细胞悬液直至达到所需的细胞
悬浮培养细胞生长曲线的绘制实验
实验方法原理 以三种不同细胞浓度进行系列细胞培养，每天计数细胞直至平台期。实验步骤 材料无菌悬浮细胞培养培养液，l00 mlD-PBSA(细胞计数用）24 孔板非无菌装培养板的塑料盒CO2 温箱或 5% C02 以充盈塑料盒操作步骤1. 如单层培养那样（见方案 21.8 ) 将生长液中的细胞悬液以不