酶联免疫法的优缺点

①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。 ②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开,*后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据颜色反应的深浅来进行定性或定量分析。由于酶的催化频率很高,故可极大地放大反应效果,从而使测定方法达到很高的敏感度。ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。 在这种测定方法中有3种必要的试剂: ①固相的抗原或抗体 ②酶标记的抗原或抗体 ③酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件,可设计出各种不同类型的检测方法。 ......阅读全文

化学发光法和酶联免疫法的区别

化学发光法由于灵敏度高,分析方法简单快捷,检测时间短及诊断范围宽等优势被公认为未来将取代放免和酶联免疫检测方法的最佳方案雅培发光法主要是依据标本中抗体,抗原浓度与化学发光强度在一定条件下呈线性定量关系的原理,利用仪器对体系发光强度的检测,直接确定抗体,抗原含量。酶联免疫法是分代的,第四代酶联免疫法是

化学发光法和酶联免疫法的区别

1、原理上的区别化学发光法依据化学检测体系中待测物浓度与体系的化学发光强度在一定条件下呈线性定量关系的原理,利用仪器对体系化学发光强度的检测,而确定待测物含量。酶联免疫法原理是在测定时把受检标本和酶标抗原或抗体与固相载体表面的抗原或抗体起反应加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标

酶联法检测人类免疫缺陷病毒HIV

实验概要本实验用ELISA法检测了人类免疫缺陷病毒HIV。实验原理在微孔板上预包被高纯度基因重组HIV(1型加Ⅱ型),与样品中抗HIV抗体反应,同时加入HRP标记HIV(1型加Ⅱ型)抗原。然后用TMB底物作用显色。通过酶标仪检测吸光度(OD值)从而判定样品中HIV抗体的存在与否。主要试剂1.预包被微

酶联免疫法检测黄曲霉毒素

  ELISA法也是近年来研究开发出来的一种较为新颖的方法。其原理是根据抗体和抗原之间特异性的免疫学反应,最后用测定酶活力的方法来增加测定的灵敏度。  该方法检测速度快、对人体危害小、但重复性差、试剂寿命短、需低温保存、假阳性概率较高、需要配置专门的酶标仪,且对一些富含盐和脂肪的试样需进行额外的处理

酶联法检测人类免疫缺陷病毒HIV

实验概要本实验用ELISA法检测了人类免疫缺陷病毒HIV。实验原理在微孔板上预包被高纯度基因重组HIV(1型加Ⅱ型),与样品中抗HIV抗体反应,同时加入HRP标记HIV(1型加Ⅱ型)抗原。然后用TMB底物作用显色。通过酶标仪检测吸光度(OD值)从而判定样品中HIV抗体的存在与否。主要试剂1.预包被微

概述酶联免疫法实验的注意事项

  ⒈正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。  ⒉在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:  ⑴固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚

酶联免疫法的原理及注意事项

  原理  ①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。  ②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形

酶联免疫法的基本原理简介

  ①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。  ②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原

自动酶联荧光免疫检测系统(VIDAS)筛选法酶免疫测定

①试剂条上标注有所需编码(1是食品测试样品)。试剂盒提供每一系列测试所需的阳性对照(C1),阴性对照(C2)和抗原标准液(S1)。试剂条需恢复至室温。②混合均匀每一阳性对照、阴性对照和抗原标准液。③各吸取0.5mL 阳性对照、阴性对照、抗原标准液和按(5)④步骤煮沸的M肉汤加入到试剂条的测试孔中。④

酶联免疫电泳转移分析法

该法是分析蛋白质的一种新方法,由southern blot衍化而来,后者是由Southern E.M. 所创建,即将在琼脂糖凝胶中电泳后的DNA,原位吸附于硝酸纤维素膜上,再用放射性同位素如32P等标记的单链RNA或DNA探针,与板上的核酸分子杂交,从而达到分析DNA中基因位置和顺序的目的。以后

农残检测中酶抑制率法与酶联免疫法的比较

农残检测中酶抑制率法与酶联免疫法的优劣势比较酶抑制法检测适用于现场的定性和半定量测定,该方法检测时,蔬菜中物质(水份、碳水化合物、蛋白质、脂)等不会对农药残留物的检测造成影响,节省了大量预处理时间,不必进行复杂的分离去杂工作,仪器不需要使用或使用的仪器相对简单,无须大型设备和专业人员,成本较低。 免

乳铁蛋白的酶联免疫法检测介绍

  酶联免疫法是一种基于抗原抗体特异性反应的检测方法,具有反应灵敏、特异性强等优点。在微孔板中包被抗乳铁蛋白抗体(一抗),加入目标物乳铁蛋白后,乳铁蛋白与一抗结合,再加入乳铁蛋白抗体(二抗)与之形成夹心结构,最后加入显色剂,利用酶标仪测定特定波长的吸光度值,其吸光度值与乳铁蛋白含量成正比,可绘制标准

丙型肝炎病毒的酶联免疫试验法检测介绍

  即:放射免疫诊断(RIA)或酶联免疫试验(ELISA)检测血清中抗HCV1989年,Kuo等建立了抗-C-100放射免疫试验方法(RIA),随后 Ortho公司又研制成功酶联免疫试验方法(ELISA)检测抗-C-100。这两种方法均用重组酵母表达的病毒抗原(C-100-3,为NS4编码的蛋白,含

酶联免疫法(ELISA)检测黄曲霉的方法介绍

ELISA法也是近年来研究开发出来的一种较为新颖的方法。其原理是根据抗体和抗原之间特异性的免疫学反应,最后用测定酶活力的方法来增加测定的灵敏度。该方法检测速度快、对人体危害小、但重复性差、试剂寿命短、需低温保存、假阳性概率较高、需要配置专门的酶标仪,且对一些富含盐和脂肪的试样需进行额外的处理。

酶联免疫法在农药残留检测中的应用

  摘 要:酶联免疫法(ELISA)是以酶标记抗体或抗原为主要试剂的一种标记免疫分析技术,其结合了抗原抗体反应的高度特异性和酶的高效催化作用,具有灵敏度高、特异性强、准确性好、检测成本低、迅速等优点,该方法近年来被广泛应用于食品安全中农药残留的检测。   古语有云:“民以食为天”,随着人们生活水平的

什么是酶联免疫

酶联免疫法,简称ELISA。它的中心就是让抗体与酶复合物结合,然后通过显色来检测。步骤其实很简单:ELISA用血清来检测,首先血液要经过至少半个小时的凝集,然后取血清(这是有些网友不理解为什么医院抽完了血对血置之不理的原因,其实是误会)。将酶复合物用稀释液稀释后,加血清及阴性、阳性对照,还有就是质控

什么是酶联免疫

酶联免疫法简介  酶联免疫吸附剂测定法,简称酶联免疫法,或者ELISA法。   它的中心就是让抗体与酶复合物结合,然后通过显色来检测。步骤  ELISA用血清来检测,首先血液要经过至少半个小时的凝集,然后取血清。将酶复合物用稀释液稀释后,加血清及阴性、阳性对照,还有就是质控品(这是严格的要求,它的范

酶联免疫分析缺点

  ①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。   ②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗

酶联免疫斑点实验(ELIspot)——酶联免疫斑点实验(ELIspot)

实验材料血液样品细胞样品试剂、试剂盒70%乙醇PBS脱脂奶粉链霉亲和素检测抗体包被抗体仪器、耗材PVDF膜96孔培养板硝基纤维素底板免疫斑点板酶标板实验步骤一、包被96孔板 用70%乙醇浸润96孔板中的PVDF膜30 s 加入捕获抗体(PBS稀释),4℃过夜 倒空板中包被液,轻轻在纸上拍干,用PBS

改进的间接酶联免疫法检测磺胺类药物

实验概要磺胺类药物是抗菌药,被广泛应用于动物和人。各种检测磺胺类药物残留的方法已经被应用。本试验利用酶联免疫吸附方法,检测磺胺类药物的浓度,为实际应用提供参考。本实验用四只兔子制备抗体,兔子被TS-LPH和TS-BSA免疫,间接ELISA检测血清,在每两只兔子上,使用TS-OV作为诱导原,产生高滴度

改进的间接酶联免疫法检测磺胺类药物

实验概要磺胺类药物是抗菌药,被广泛应用于动物和人。各种检测磺胺类药物残留的方法已经被应用。本试验利用酶联免疫吸附方法,检测磺胺类药物的浓度,为实际应用提供参考。本实验用四只兔子制备抗体,兔子被TS-LPH和TS-BSA免疫,间接ELISA检测血清,在每两只兔子上,使用TS-OV作为诱导原,产生高滴度

酶联免疫法的检测方法双抗体夹心法简介

  在临床检验中,此法适用于检验各种蛋白质等大分子抗原,例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。只要获得针对受检抗原的异性抗体,就可用于包被固相载体和制备酶结合物而建立此法。如抗体的来源为抗血清,包被和酶标用的抗体最好分别取自不同种属的动物。如应用单克隆抗体,一般选择两个针对抗原上不同决定簇的

新型间接酶联免疫法检测磺胺类药物

实验原理62.5mgTS,34.5mgN-羟基琥珀酰亚胺酯和45.3mg 1,3-二环己基碳二亚胺在1.5ml的干燥的N,N-二甲基酰胺中反应18h, 4o C,通过滤过作用移除生成的二环乙基脲沉淀物,得到滤液。滤液被加到含有65mgLPH 2ml的PBS中,用NaOH调节PH到7.6。

酶联免疫法检测硝基呋喃类抗菌剂

  硝基呋喃类(Nitrofurans)抗菌剂是一种广效性抗生素,因价格较低廉且疗效佳,广泛用于畜禽及水产养殖鱼类,用以治疗由大肠杆菌或沙门式杆菌所引起之肠炎,养殖鱼之疥疮、赤鳍病、溃疡病等,于饲料中添加或养殖药浴使用。   硝基呋喃类抗菌剂常见有以下四种药物———呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃

黄曲霉毒素检测方法酶联免疫法(ELISA)

ELISA法也是近年来研究开发出来的一种较为新颖的方法。其原理是根据抗体和抗原之间特异性的免疫学反应,最后用测定酶活力的方法来增加测定的灵敏度。该方法检测速度快、对人体危害小、但重复性差、试剂寿命短、需低温保存、假阳性概率较高、需要配置专门的酶标仪,且对一些富含盐和脂肪的试样需进行额外的处理。

酶联免疫斑点实验(ELIspot)_酶联免疫斑点实验(ELIspot)2

实验方法原理ELISPOT技术原理,一句话概括就是:用抗体捕获培养中的细胞分泌的细胞因子,并以酶联斑点显色的方式将其表现出来。实验材料细胞试剂、试剂盒PBSPBST乙醇包被抗体封闭液抗体稀释液检测抗体酶联亲和素AEC显色液PHA刺激物U-Cytech无血清培养基仪器、耗材ELISPOT读数仪超净工作

酶联免疫法的检测方法双抗体夹心法的步骤

  双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法,操作步骤如下:  一、将特异性抗体与固相载体连接,形成固相抗体:洗涤除去未结合的抗体及杂质。  二、加受检标本:使之与固相抗体接触反应一段时间,让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合,形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。  三、加酶标抗体:使固相免疫复

酶联免疫测定的原则

  EIA本身是以酶[辣根过氧化物酶(HRP)、 碱性磷酸酶(AP)等]作标记物的,因此,EIA的测定放大始终是围绕着 标记酶来作文章的,不外乎三种可能的方式:①增加标记酶的量;②非显色底物的应用;③附加一个受标记酶催化的反应系统。  一、增加标记酶的量 通过生物素/亲合素—酶或酶/抗酶复合物的间接

人ATP酶(ATPase)酶联免疫分析

人ATP酶(ATPase)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中ATP酶(ATPase)的含量。实验原理:   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人ATP酶(ATPase)水平。用纯化的人ATP酶(ATPase)抗体包被微孔板,

人Apelin酶联免疫分析

人Apelin酶联免疫分析(ELISA) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中Apelin的含量。 实验原理:   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人Apelin水平。用纯化的人Apelin抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包