测定蛋白质浓度的方法有哪些?

蛋白质是细胞中最重要的含氮生物大分子之一,承担着各种生物功能。蛋白质的定量分析是蛋白质构造分析的基础。 下面小编给大家汇总一下有哪些常用的蛋白测量的方法。 BCA法 原理 在碱性环境下蛋白质与Cu2+络合并将Cu2+还原成Cu1+(biuret reaction)。BCA与Cu1+结合形成稳定的紫蓝色复合物,在562nm处有高的光吸收值并与蛋白质浓度成正比,据此可测定蛋白质浓度。 实验步骤 1.按试剂盒说明书配置BCA工作液; 2.完全溶解蛋白质标准品,加到96孔板的蛋白标准品孔中,按照说明书要求对标品进行梯度稀释,加入BCA工作液,用酶标仪测定其吸光度; 3.以样品浓度为X轴,吸光度为Y轴,绘制标准曲线; 4.待测样品中加入BCA工作液,测定吸光度,带入标准曲线中,计算样品浓度。 与Lowery法相比,BCA蛋白测定方法灵敏度高,操作简单,试剂及其形成的颜色复合物......阅读全文

铝含量的测定方法有哪些?

铝的测定方法有分光光度法和原子吸法,前者受共有成分铁及碱金属、碱土金属元素干扰。火焰原子吸收法由于铅在空气-乙炔火焰中形成耐高温氧化物,灵敏度很低。N2O-乙炔火焰在国内尚未普及应用。在石墨炉原子吸收法中,铝也难以形成基态原子,适用性不强。络合物交换反应间接原子吸收法通过测定Cu达到定量测定铝,方法

土壤样品的测定方法有哪些

  (1) 重量法:适用于测定土壤水分 (2) 原子吸收分光光度法:适用于金属如铜、铅、锌、铬、汞等成分。 (3) 容量法:适用于浸出物中含量较高的成分测定,如Ca2+、Mg2+、Cl-、SO42-等。 (4) 气相色谱法、高效液相色谱法:适用于有机氯、有机磷、有机汞等农药的测定。 (5) 离子色谱

挥发酸的测定方法有哪些

  挥发酸即易挥发的酸,是以游离状态或以盐的形式存在的所有乙酸等脂肪酸的总和,不包括乳酸、琥珀酸等不易挥发的酸。挥发性酸的测定方法包括直接法和间接法。  直接法:直接用标准NaOH滴定由水蒸气蒸馏或其它方法所得到的挥发酸。  间接法:将挥发酸蒸发除去后,滴定不挥发残液的酸度,最后由总酸度减去此残液酸

铬含量的测定方法有哪些

(硫酸亚铁铵滴定法)在硫酸溶液中,以硝酸银作催化剂,用过硫酸铵将3价铬氧化为6价铬,锰同时被氧化为高锰酸。溶液中出现紫红色时表示铬已氧化完全。然后加入少量的氯化钠,煮沸破坏高锰酸,再用硫酸亚铁铵标准溶液滴定。其反应式如下:2Cr3++3S2O82-+7H2O AgNO3 Cr2O72-+6SO42-

油品闪点有哪些测定方法

  闪点是指在规定条件下,加热油品所逸出的蒸气和空气组成的混合物与火焰接触发生瞬间闪火时的低温度。闪点是微小爆炸的低温度。混合气中可燃性气体含量达到一定浓度时,遇火才能爆炸。  闪点的测定是有一定条件的,条件变了,闪点就会变化。根据石油产品性质和使用的条件不同及测定条件不同,方法也不同,大致分两种:

氨氮测定方法有哪些?

氨氮测定方法有哪些? 一、什么是氨氮氨氮是指水中以游离氨(NH3)和铵离子(NH4+)形式存在的氮。 二、氨氮测定方法1、纳氏试剂分光光度法测定原理:  本法低检出浓度为0.025mg/L(光度法),测定上限为2mg/L.采用目视比色法,低检出浓度为0.02mg/L.水样做适当的预处理后,本法可用于

总氮测定方法有哪些?

总氮测定方法通常采用过硫酸钾氧化,使有机氮和无机氮化合物转变为硝酸盐后,再以紫外法、偶氮比色法,以及离子色谱法或气相分子吸收法进行测定。

常用粘度测定方法有哪些?

根据不同行业分类:有动力粘度、运动粘度和条件粘度三种测定方法。一、动力粘度(也称需旋转粘度):ηt是二液体层相距1厘米,其面积各为1(平方厘米)相对移动速度为1厘米/秒时所产生的阻力,单位为克/厘米·秒。1克/厘米·秒=1泊一般:工业上动力粘度单位用泊来表示。二、运动粘度:在温度t℃时,运动粘度用符

测定胆汁酸有哪些方法?

血清总胆汁酸的测定是肝疾病的一个敏感指标。目前推荐检测血清总胆汁酸的方法是循环酶法。【参考值】<10 μmol/L测定Thio-NADH在405nm处吸光度的变化,求得总胆汁酸的含量。【临床意义】(1)急性肝炎当肝细胞损伤时,不能有效摄取经肠道回收的胆汁酸,致使胆汁酸池变小,胆汁中胆汁酸浓度降低。在

食品中检测蛋白质的方法有哪些?

  食品中检测蛋白质的方法可参考GB 5009.5-2016 《食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定》国家标准。标准规定了食品中蛋白质的测定方法。标准第一法和第二法适用于各种食品中蛋白质的测定,第三法适用于蛋白质含量在10g/100g以上的粮食、豆类奶粉、米粉、蛋白质粉等固体试样的测定。标准不适用于

蛋白质纯化有哪些方法,如何应用

常用的蛋白质纯化方法有离子交换色谱、亲和色谱、电泳、疏水色谱等等离子交换色谱:蛋白质和氨基酸一样会两性解离,所带电荷决定于溶液pH。pH小于pI时蛋白质带正电,pH大于pI时蛋白质带负电。不同蛋白质等电点的蛋白质在同一个溶液中,表面电荷情况不同。离子交换就是利用不同蛋白质在同一溶液中表面电荷的差异来

蛋白质纯化有哪些方法,如何应用

常用的蛋白质纯化方法有离子交换色谱、亲和色谱、电泳、疏水色谱等等离子交换色谱:蛋白质和氨基酸一样会两性解离,所带电荷决定于溶液pH。pH小于pI时蛋白质带正电,pH大于pI时蛋白质带负电。不同蛋白质等电点的蛋白质在同一个溶液中,表面电荷情况不同。离子交换就是利用不同蛋白质在同一溶液中表面电荷的差异来

叶绿素a的测定方法有哪些?各有哪些优缺点

叶绿素a的测定方法有哪些一.单色分光光度法测定叶绿素含量时,要测定665和750nm处的吸光度.根据文献,665nm处光密度值应该在0.1-0.8之间.叶绿素含量测定选取待测样品0.5g,用80%丙酮溶液抽提,定容到10mL,测652nm处吸光度.计算方法方式:计算样品叶绿素总量Ct= D652×

叶绿素a的测定方法有哪些?各有哪些优缺点

一.单色分光光度法测定叶绿素含量时,要测定665和750nm处的吸光度.根据文献,665nm处光密度值应该在0.1-0.8之间.叶绿素含量测定选取待测样品0.5g,用80%丙酮溶液抽提,定容到10mL,测652nm处吸光度.计算方法方式:计算样品叶绿素总量Ct= D652× 1000/34.5 (1

叶绿素a的测定方法有哪些?各有哪些优缺点

一.单色分光光度法测定叶绿素含量时,要测定665和750nm处的吸光度.根据文献,665nm处光密度值应该在0.1-0.8之间.叶绿素含量测定选取待测样品0.5g,用80%丙酮溶液抽提,定容到10mL,测652nm处吸光度.计算方法方式:计算样品叶绿素总量Ct= D652× 1000/34.5 (1

蛋白质浓度测定的注意事项

  检查前禁忌:检查前一天不吃过于油腻、高蛋白食物,避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。体检前一天的晚八时以后,应禁食。  检查时要求:抽血时应放松心情,避免因恐惧造成血管的收缩、增加采血的困难。测定中,蛋白-染料复合物会有少部分吸附于比色杯壁上,实验证明此复合物的吸附量是可以忽略的。

蛋白质浓度测定的检查过程

  受试者静脉采血,及时分离血清后测定。绘制标准曲线:取96孔酶标板,加入试剂。试剂加完后,准确吸取20μl样品溶液于酶标孔中,加入BCA试剂200μl,轻摇,于37℃保温30-60min,冷却至室温后,以空白为对照,在酶标仪上590nm处比色,以牛血清白蛋白含量为横坐标,以吸光值为纵坐标,绘制标准

蛋白质浓度测定的临床意义

  异常结果  1、 双缩脲法:双缩脲法是第一个用比色法测定蛋白质浓度的方法,硫铵不干扰显色, Cu2+与蛋白质的肽键,以及酪氨酸残基络合,形成紫蓝色络合物,此物在540nm波长处有最大吸收。双缩脲法常用于0.5g/L~10g/L含量的蛋白质溶液测定。  2、Lowry法:Cu+与蛋白质在碱性溶液中

临床上需测定药物浓度进行监测的主要药物有哪些

(1)强心苷类:毒毛花苷K、去乙酰毛花苷(西地兰)、地高辛和洋地黄毒苷。(2)抗癫痫药类:苯妥英、苯巴比妥、卡马西平、乙琥胺、丙戊酸钠等。(3)治疗情感性精神障碍药:丙米嗪类、去甲替林、阿米替林、多虑平、碳酸锂等。(4)氨基苷类抗生素:链霉素、庆大霉素、妥布霉素、卡那霉素、丁胺卡拉霉素等。(5)免疫

水分测定仪测定水分的方法有哪些?

  无损检查  指在测定过程中被测者粉碎或发生化学变化,无法维持原来的形状、结构和成分。在这两大类中,非破坏检测方法更经济快捷,发展也更快,是当今世界水分检测的主流。  直接干燥法  直接干燥法是指,将测定对象的样品放在烤箱里,根据ASAE规格,在130℃的温度下维持19h,测定前后的质量差,就是水

BCA法测定蛋白质浓度原理

BCA法测定蛋白质浓度原理:BCA与二价铜离子的硫酸铜等其他试剂组成的试剂混合一起即成为苹果绿,即 BCA 工作试剂。在碱性条件下,BCA 与蛋白质结合时,蛋白质将 Cu2+ 还原为 Cu+,工作试剂由原来的苹果绿色变为紫色复合物。562 nm 下其光吸收强度与蛋白质浓度成正比。BCA 蛋白浓度测定

血镁测定的方法有哪些呢?

  比色法、荧光法、离子层析法、离子选择电极法、酶法、原子吸收分光光度法、同位素稀释质谱法等。  决定性方法:同位素稀释质谱法。  参考方法:原子吸收分光光度法。  常规方法:甲基麝香草酚蓝(MTB)比色法、钙镁试剂(calmagite)法。  ①calmagite(CLG)比色法:  CLG为一染

海水中藻类的测定方法有哪些

可以参考一下《水和废水监测分析方法》(第四版)649页之后的几段。也可以参考一下这篇文章《HPLC测定饮用水中藻类叶绿素含量》作者: ysqlym 发布日期: 2008-08-19一般用测定叶绿素a来表示藻类的含量(分光光度法)一、材料用具及仪器药品菠菜叶片、721分光光度计、天平、研钵、剪刀、容量

表面张力的测定方法有哪些

一、 测定方法液体表面张力的测定方法分静态法和动态法。静态法,有毛细管上升法、DuNouy吊环法、Wilhelmy盘法、旋滴法、悬滴法、滴体积法、最大气泡压力法;动态法有旋滴法、震荡射流法和悬滴法等。其中毛细管上升法和最大气泡压力法不能用来测液-液界面张力。Wilhelmy 盘法,最大气泡压力法,振

氟化物的测定方法有哪些?

氟化物的测定方法有氟试剂比色法、茜素磺酸锆比色法和离子选择电极法、离子色谱法等。比色法测水中含氟量有褪色和增色两种方法,如茜素磺酸铅盐比色法就是利用氟离子和金属锆离子形成稳定的无色化合物,使其从菌素磺酸锗盐(红色整合物)中游离出来而褪色,进行比色测定。该法测量误差较大;氟试剂比色法为增色反应,色度较

测定含硒量的方法有哪些?

方法选择2,3-二氨基萘荧光光度法灵敏、准确,可测定含硒量在10 μg/L以下的水样。二氨基联苯胺光度法灵敏度低,适合于测定含硒量在5 μg/L以上的水样,合成该试剂的原料有致癌性,试剂很难购得且稳定性差。原子荧光法是灵敏度高、准确度好,且仪器设备简单、价廉的方法。火焰原子吸收法可以测定硒,但其测量

防腐剂的测定方法有哪些

GC是最早发展起来的色谱方法,过去很多防腐剂的测定方法都是采用气相色谱方法。而近年来HPLC逐渐成为防腐剂检测的主要手段,因为HPLC前处理过程较为简单,不像GC方法检测一些难挥发性的化合物时往往需要将其转化为可挥发的化合物,因此可以极大地提高检测速度,减少检测人员的劳动强度。尽管如此,GC方法在现

食品中铝的测定方法有哪些

食品中铝含量属于微量测定,统一品牌同一批次不同的样品每次测得的结果都不同,甚至相同的样品两次的顶的结果都不同。这个没有固定数值的吧。

淀粉酶的测定方法有哪些

淀粉被淀粉水解,切断淀粉链的α-1,4糖苷键,对碘呈蓝紫色的反应消失,这种呈色消逝的速度可以表示水解的程度,因而能衡量酶的活力。操作方法1、取试管1支,加20毫升2%淀粉,混匀,在30℃水浴中,使管内温度达到30℃。2、将淀粉酶0.5ml加到30℃的淀粉液中,混匀,在30℃水浴中保温,自加入记时,经

淀粉酶的测定方法有哪些

淀粉被淀粉水解,切断淀粉链的α-1,4糖苷键,对碘呈蓝紫色的反应消失,这种呈色消逝的速度可以表示水解的程度,因而能衡量酶的活力。操作方法1、取试管1支,加20毫升2%淀粉,混匀,在30℃水浴中,使管内温度达到30℃。2、将淀粉酶0.5ml加到30℃的淀粉液中,混匀,在30℃水浴中保温,自加入记时,经