毛细电泳实验常见的13个问题
一、无样品峰出现 A、检查电流是否稳定： ①没有电流。 可能原因——毛细管堵塞或断裂。 解决方法——用水冲洗毛细管，并观察是否有水流出，若无水流出请拆下卡盒检查毛细管两端和窗口是否断裂；毛细管没有断裂的话可以用水反向高压冲洗以试图解决此问题。缓冲溶液需要过滤，将样品过滤或者离心去除其中的颗粒。 ②电流波动很大，直至几乎消失。 可能原因——缓冲溶液中有气泡产生或者区带中样品析出。 解决方法——将缓冲溶液超声脱气，如果还有此现象发生，则可能是样品区带有析出，可以通过降低样品浓度/延长ramp time来试图解决这一问题；对于在缓冲溶液中溶解度不高的样品则需要在缓冲溶液中加入添加剂以解决此问题。 ③电流初始值较小，后逐渐增大。 可能原因——样品进样量过大。 解决方法——减少进样量，通常进样参数设置在0.5psi,5sec左右。 ④电流正常。 可能原因：a样品浓......阅读全文
胎牛血清实验的常见问题
一、怎样选择适合我们实验室的血清？ 国内一致认为hyclone的血清是的，但国外一般认为gibco比hyclone好，所以并不是价格决定质量，但是总的来说这两种价格普遍偏贵，一般不是太娇气的细胞，国产的就够用了。此外，由于国内hyclone，gibco并没有生产线，需要到代理商买。二、如何避免血清中
离子交换色谱实验常见的问题
一、纯化后样品纯度不高怎么办？ 若目标蛋白和杂蛋白等电点差异较大，目标蛋白通过穿透步骤获得，通过调节起始缓冲液pH，使目标蛋白与填料之间的静电作用更强；若目标蛋白和杂蛋白等电点差异较小，目标蛋白通过洗脱步骤获得，过调节起始缓冲液pH，使目标蛋白与填料之间的静电作用更强；再调节洗脱溶液的离子强度
毛细管电泳仪毛细管电泳工作原理
毛细管电泳所用的石英毛细管柱，在pH>3情况下，其内表面带负电，和溶液接触时形成一双电层。在高电压作用下，双电层中的水合阳离子引起流体整体朝负极方向移动的现象叫电渗。粒子在毛细管内电解质中的迁移速度等于电泳和电渗流(EOF)两种速度的矢量和。正离子的运动方向和电渗流一致，故最先流出；中性粒子的电泳速
毛细管电泳仪的常见故障及解决办法
一、无电泳峰1、检查结果：没有电流。可能原因：毛细管堵塞或断裂。解决方案：用水冲洗毛细管，观察是否有水流出。若无水流出，拆下卡盒检查毛细管两端和窗口是否断裂。若毛细管没断裂，可用水反向高压冲洗。缓冲液需过滤，将样品过滤或离心去除其中的颗粒。2、检查结果：电流波动很大，甚至几乎消失。可能原因：缓冲液中
实验室透析实验常见问题总汇
Q1：如何准备透析膜管？透析膜管的准备因膜管材质和生产工艺的差别而有所不同。注意，我们不推荐煮沸处理，因其可能损坏膜管并改变膜孔径。生物技术级RC、CE及PVDF膜可以用DI水冲洗15-30分钟，去除防腐剂叠氮化钠。Spectra/PorR 7 标准级RC膜已经预处理，去除了重金属和硫化物，只需在去
电泳槽常见问题解决办法
电泳槽常见问题解决办法 手工粘接电泳槽的铂金电极孔处漏液 该处可能是因为电泳槽工作时间较长所至，对此应使用堵漏胶（稠合液）进行封堵即可。 模具水平电泳槽电极孔处漏液 检查电极下的密封圈是否被螺丝拧紧在正确位置或已经损坏。如有损坏需更换密封胶圈。 电泳槽有机板粘接处漏
SDS－PAGE电泳色谱仪常见问题分析
SDS－PAGE电泳色谱仪常见问题分析：一、微笑形区带（两边翘起，中间凹下）： 形成原因：主要是由凝胶中间部分凝固不均匀引起的，多出现于较厚的凝胶中。处理办法：待其充分凝固再做实验。二、皱眉形区带（两边向下，中间鼓起）：形成原因：主要出现在蛋白质垂直电泳槽中，一般是由两板之间的底部间隙气泡未排除干净
电泳仪常见问题解决方法
一、电泳仪的输出达不到设定值答： 电泳仪的输出值状态遵“循欧姆定律”：电压U=电流I×(电泳槽)电阻R电阻R相对不变的情况下，U、I、P(功率P=电流I×电压U)中任意1个参数恒定，其他参数也随之恒定;而任意1个参数变化，其他参数也随之正比变化。如果电泳仪的输出电压U达不到预置值，应首先观察I
电泳仪常见问题及其解决方法介绍
电泳仪常见问题及其解决方法介绍 一、电泳仪的输出达不到设定值 答：电泳仪的输出值状态遵“循欧姆定律”：电压U=电流I×（电泳槽）电阻R 电阻R相对不变的情况下，U、I、P（功率P=电流I×电压U）中任意1个参数恒定，其他参数也随之恒定;而任意1个参数变化，其他参数也随之正比变化。 如果电泳仪的输出
琼脂糖凝胶电泳常见问题有哪些
琼脂糖凝胶电泳是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。对于分子量较大的样品，如大分子核酸、病毒等，一般可采用孔径较大的琼脂糖凝胶进行电泳分离。琼脂糖凝胶电泳常见为题都有哪些？DNA带模糊DNA降解：琼脂糖凝胶电泳试验中要避免核酸酶污染电泳缓冲液陈旧：电泳缓冲液多系使用后，离子强度降解，PH值上升，
琼脂糖凝胶电泳常见问题有哪些
琼脂糖凝胶电泳是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。对于分子量较大的样品，如大分子核酸、病毒等，一般可采用孔径较大的琼脂糖凝胶进行电泳分离。琼脂糖凝胶电泳常见为题都有哪些？DNA带模糊DNA降解：琼脂糖凝胶电泳试验中要避免核酸酶污染电泳缓冲液陈旧：电泳缓冲液多系使用后，离子强度降解，PH值上升，
电泳槽常见问题解决办法
电泳槽常见问题解决办法手工粘接电泳槽的铂金电极孔处漏液该处可能是因为电泳槽工作时间较长所至，对此应使用堵漏胶（稠合液）进行封堵即可。模具水平电泳槽电极孔处漏液检查电极下的密封圈是否被螺丝拧紧在正确位置或已经损坏。如有损坏需更换密封胶圈。电泳槽有机板粘接处漏液或开胶有机板开胶此类情况不宜发生，若发现开
SDSPAGE电泳常见问题及解决方案
SDS-PAGE电泳常见问题及解决方案问题原因解决方案①出现“微笑”形带（两边翘起中间凹下）由于凝胶的中间部分凝固不均匀所致，多出现于较厚的凝胶中待其充分凝固再作后续实验②出现“皱眉”形带（两边向下中间鼓起）主要出现在蛋白质垂直电泳槽中，一般是两板之间的底部间隙气泡未排除干净可在两板间加入适量缓冲液
SDSPAGE电泳常见问题及解决方案
SDS-PAGE电泳常见问题及解决方案问题原因解决方案①出现“微笑”形带（两边翘起中间凹下）由于凝胶的中间部分凝固不均匀所致，多出现于较厚的凝胶中待其充分凝固再作后续实验②出现“皱眉”形带（两边向下中间鼓起）主要出现在蛋白质垂直电泳槽中，一般是两板之间的底部间隙气泡未排除干净可在两板间加入适量缓冲液
SDSPAGE蛋白质电泳常见问题分析
Q：SDS-PAGE电泳的基本原理? A：SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS(十二烷基硫酸钠)，SDS会与变性的多肽，并使蛋白带负电荷，由于多肽结合SDS的量几乎总是与多肽的分子量成正比而与其序列无关，因此SDS多肽复合物在丙稀酰胺凝胶电泳中的迁移率只与多肽的大小有
SDSPAGE电泳常见问题及解决方案
SDS-PAGE电泳常见问题及解决方案问题原因解决方案①出现“微笑”形带（两边翘起中间凹下）由于凝胶的中间部分凝固不均匀所致，多出现于较厚的凝胶中待其充分凝固再作后续实验②出现“皱眉”形带（两边向下中间鼓起）主要出现在蛋白质垂直电泳槽中，一般是两板之间的底部间隙气泡未排除干净可在两板间加入适量缓冲液
电泳仪常见问题及其解决方法介绍
一、电泳仪的输出达不到设定值 答：电泳仪的输出值状态遵“循欧姆定律”：电压U=电流I×（电泳槽）电阻R 电阻R相对不变的情况下，U、I、P（功率P=电流I×电压U）中任意1个参数恒定，其他参数也随之恒定;而任意1个参数变化，其他参数也随之正比变化。 如果电泳仪的输出电压U达不到预置值，
电泳槽常见问题解决办法
电泳槽常见问题解决办法手工粘接电泳槽的铂金电极孔处漏液该处可能是因为电泳槽工作时间较长所至，对此应使用堵漏胶（稠合液）进行封堵即可。模具水平电泳槽电极孔处漏液检查电极下的密封圈是否被螺丝拧紧在正确位置或已经损坏。如有损坏需更换密封胶圈。电泳槽有机板粘接处漏液或开胶有机板开胶此类情况不宜发生，若发现开
阴极电泳14个常见问题及解决方法
一、颗粒 （1）现象 在烘干后的电泳涂膜表面上有手感粗糙的、较硬的粒子，或肉眼可见的细小痱子，往往被涂物的水平面较垂直面严重，这种漆膜病态称为颗粒。 （2）产生原因 ①CED槽液PH值偏高，碱性物质混入，造成槽液不稳定，树脂析出或凝聚。 ②槽内有沉淀“死角
酵母双杂交实验常见问题
酵母双杂交实验常见问题 1.如果诱饵蛋白对酵母细胞是有毒的，该怎么办？ 在某些情况下，在液体培养基中培养不好的菌珠可以在固体培养基上生长得很好。首先重悬克隆于1ml的SD/–Trp，接着将重悬液平铺于5 个100-mm的SD/–Trp平板，在30℃下温浴，直至平板上的克隆相互粘在一起。用5ml 0
毛细管电泳芯片自由流电泳
芯片自由流电泳除上述分离模式外，芯片自由流电泳也是芯片电泳分离蛋白质的重要方法。芯片自由流电泳是指在芯片中通过外加电场使样品随缓冲液连续流动的同时沿电场方向进行电迁移，从而按照电泳淌度不同实现分离的电泳分离模式。Raymond等采用芯片自由流电泳模式分离了人血清蛋白、缓激肽和核糖核酸酶A，其分离长度
实验室仪器移液器的常见的问题
1. 安装吸头时,用移液器在枪盒上用力敲击?装吸头时下压操作用力不能过猛,也无需敲击管嘴连件,只需将移液器管嘴对准吸头用力插进去左右轻轻旋转即可将吸头安装牢固。2. 在调节量程时,将量程调出标定范围?在设置量程时,所设量程在移液器量程范围内不可将按钮旋出量程,否则会卡住机械装置,损坏了移液器。 3.
毛细管电泳的应用
CE具有多种分离模式（多种分离介质和原理），故具有多种功能，因此其应用十分广泛，通常能配成溶液或悬浮溶液的样品（除挥发性和不溶物外）均能用CE进行分离和分析，小到无机离子，大到生物大分子和超分子，甚至整个细胞都可进行分离检测。它广泛应用于生命科学、医药科学、临床医学、分子生物学、法庭与侦破鉴定、化学
毛细管电泳的分类
分离模式毛细管电泳根据分离模式不同可以归结出多种不同类型的毛细管电泳，见表1。毛细管电泳的多种分离模式，给样品分离提供了不同的选择机会，这对复杂样品的分离分析是非常重要的。表1毛细管电泳类型 类型 缩写 说明 1 单根毛细管 毛细管区带电泳 CZE 毛细管和电极槽灌有相同的缓冲液 毛细管等速
毛细管电泳的分类
分离模式毛细管电泳根据分离模式不同可以归结出多种不同类型的毛细管电泳，见表1。毛细管电泳的多种分离模式，给样品分离提供了不同的选择机会，这对复杂样品的分离分析是非常重要的。表1毛细管电泳类型 类型 缩写 说明 1 单根毛细管 毛细管区带电泳 CZE 毛细管和电极槽灌有相同的缓冲液 毛细管等速
毛细管电泳的概念
毛细管电泳（capillary electrophoresis，CE）又称高效毛细管电泳（high performance capillary electrophoresis，HPCE），是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力的新型液相分离技术。毛细管电泳实际上包含电泳、色谱及其交叉内容，
毛细管电泳的概念
毛细管电泳（capillary electrophoresis，CE）又称高效毛细管电泳（high performance capillary electrophoresis，HPCE），是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力的新型液相分离技术。毛细管电泳实际上包含电泳、色谱及其交叉内容，
毛细管电泳的应用
CE具有多种分离模式（多种分离介质和原理），故具有多种功能，因此其应用十分广泛，通常能配成溶液或悬浮溶液的样品（除挥发性和不溶物外）均能用CE进行分离和分析，小到无机离子，大到生物大分子和超分子，甚至整个细胞都可进行分离检测。它广泛应用于生命科学、医药科学、临床医学、分子生物学、法庭与侦破鉴定、化学
毛细管电泳的分类
分离模式毛细管电泳根据分离模式不同可以归结出多种不同类型的毛细管电泳，见表1。毛细管电泳的多种分离模式，给样品分离提供了不同的选择机会，这对复杂样品的分离分析是非常重要的。表1毛细管电泳类型 类型 缩写 说明 1 单根毛细管 毛细管区带电泳 CZE 毛细管和电极槽灌有相同的缓冲液
毛细管电泳的概念
毛细管电泳（capillary electrophoresis，CE）是利用被分析离子在电场作用下移动的速率不同而达到分离的目的，这种技术主要用来分析在毛细管缓冲溶液中能离解为离子的物质。