毛细电泳实验常见的13个问题
一、无样品峰出现 A、检查电流是否稳定: ①没有电流。 可能原因——毛细管堵塞或断裂。 解决方法——用水冲洗毛细管,并观察是否有水流出,若无水流出请拆下卡盒检查毛细管两端和窗口是否断裂;毛细管没有断裂的话可以用水反向高压冲洗以试图解决此问题。缓冲溶液需要过滤,将样品过滤或者离心去除其中的颗粒。 ②电流波动很大,直至几乎消失。 可能原因——缓冲溶液中有气泡产生或者区带中样品析出。 解决方法——将缓冲溶液超声脱气,如果还有此现象发生,则可能是样品区带有析出,可以通过降低样品浓度/延长ramp time来试图解决这一问题;对于在缓冲溶液中溶解度不高的样品则需要在缓冲溶液中加入添加剂以解决此问题。 ③电流初始值较小,后逐渐增大。 可能原因——样品进样量过大。 解决方法——减少进样量,通常进样参数设置在0.5psi,5sec左右。 ④电流正常。 可能原因:a样品浓......阅读全文
毛细管柱分析常见问题的解决(5.2)
2 进样技术差(进样太慢):采用快速平稳进样技术。
毛细管柱分析常见问题的解决(9.7)
7.载气控制不协调,检查载气源,看压力是否足够。如压力≤500psi,请更换气瓶。
毛细管柱分析常见问题的解决(3.2)
2 柱或进样器温度太低:升温(不要超过柱最高温度)。进样器温度应比样品最高沸点高25℃.
毛细管柱分析常见问题的解决(2.1-)
二 前沿峰1. 柱超载,减少进样量。
毛细管柱分析常见问题的解决(2.3)
3 样品冷凝,检查进样口和柱温,如有必要可升温。
毛细管柱分析常见问题的解决(4.6)
1. 载气泄漏:检查泄漏处(用肥皂水)。
毛细管柱分析常见问题的解决(1.4)
4 柱温温度太低,检查温度,并根据需要调整。
毛细管柱分析常见问题的解决(1.1)
一 峰丢失(进样后没峰出现)可能的原因及采用的排除方法注射器有毛病,采用新注射器验证。
毛细管柱分析常见问题的解决(8.5)
5.载气有杂质或气路污染:更换气瓶,使用载气净化装置清洁金属管。
毛细管柱分析常见问题的解决(8.6)
6.载气流速不在仪器最大/最小限定范围之内(包括FID用氢气和空气):测量流速,并根据使用手册技术指标,予以验证。
毛细管柱分析常见问题的解决(6.2)
2.注射器污染:用新注射器及干净的溶剂试一试,如假峰消失,就将注射器冲洗几次。
毛细管电泳仪毛细管电泳的概念
毛细管电泳(capillary electrophoresis,CE)又称高效毛细管电泳(high performance capillary electrophoresis,HPCE),是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力的新型液相分离技术。实际上包含电泳、色谱及其交叉内容,它使分析化
微量制备毛细管电泳实验——多次分离
实验材料多肽:ACTH 4-10试剂、试剂盒血管紧缩素I和血管紧缩素II0.05 mmol/L 和 0.25 mmol/L 磷酸钠缓冲液(pH 2.30 存储于 4℃)0.1 mol/L 氢氧化钠仪器、耗材75 μm 内径的融合硅毛细管柱CE 仪器锥形微量瓶实验步骤1. 低压下(0.5 lb/in2
高效毛细管电泳法的毛细管电泳的特点
柱效高,可达105~106/m分离速度快,几十秒~几十分钟溶剂和试样消耗极少没有高压泵,仪器成本比HPLC更低选择性强
毛细管电泳法的毛细管电泳的分离模式
毛细管区带电泳(Capillary Zone Electrophoresis, CZE)最常见的模式,用以分析带电溶质。样品中各个组分因为迁移率不同而分成不同的区带。为了降低电渗流和吸附现象,可将毛细管内壁做化学修饰。毛细管凝胶电泳(Capillary Gel Electrophoresis,CGE
电泳槽的使用方法及常见问题
所谓电泳,是指带电粒子在电场中的运动,不同物质由于所带电荷及分子量的不同,因此在电场中运动速度不同,根据这一特征,应用电泳法便可以对不同物质进行定性或定量分析,或将一定混合物进行组份分析或单个组份提取制备,这在临床检验或实验研究中具有极其重要的意义。电泳仪正是基于上述原理设计制造的。下面简单介绍其使
电泳仪常见问题及解决方法
1、电泳仪的输出为何达不到设定值? 答: ①电泳仪的输出状态遵守“欧姆定律”:电压U=电流I×(电泳槽)电阻R相对不变的情况下,U、I、P(功率P=电流I×电压U)中任意一个参数恒定,其他参数也随之恒定;而任意一个参数变化,其他参数也随之正比变化; ②如果电泳仪的输出电压U达不到预置值,应
电泳槽常见问题及解决办法
电泳槽时凝胶时间不对,那么通常胶在60min,1H内凝,如果凝的太慢,可能是TEMEN,APS剂量不够或者失效。APS应该现配现用,TEMED不稳定,容易被氧化成黄色。如果凝的太快,可能是APS和TEMED用量过多,此时胶太硬易裂,电泳时易烧胶。纹理和托尾现:由于样品溶解不佳引起的,克服的方法可以在
电泳槽常见问题及其解决办法
电泳槽常见问题及其解决办法 故障一、手工粘接电泳槽的铂金电极孔处漏液 该处可能是因为电泳槽工作时间较长所至,对此应使用堵漏胶(稠合液)进行封堵即可。 故障二、模具水平电泳槽电极孔处漏液 检查电极下的密封圈是否被螺丝拧紧在正确位置或已经损坏。如有损坏需更换密封胶圈。 故障三、电泳槽有机板粘
电泳槽常见问题及其解决办法
故障一、手工粘接电泳槽的铂金电极孔处漏液 该处可能是因为电泳槽工作时间较长所至,对此应使用堵漏胶(稠合液)进行封堵即可。 故障二、模具水平电泳槽电极孔处漏液 检查电极下的密封圈是否被螺丝拧紧在正确位置或已经损坏。如有损坏需更换密封胶圈。 故障三、电泳槽有机板粘接处漏液或开胶 有机板开胶
电泳仪常见问题及解决方法
电泳仪常见问题及解决方法1、电泳仪的输出为何达不到设定值? 答:①电泳仪的输出状态遵守“欧姆定律”:电压U=电流I×(电泳槽)电阻R相对不变的情况下,U、I、P(功率P=电流I×电压U)中任意一个参数恒定,其他参数也随之恒定;而任意一个参数变化,其他参数也随之正比变化;②如果电泳仪的输出电压U达不到
毛细管电泳仪毛细管电泳应用
应用 (1)高速DNA测序:由于人类基因组工程的提出,高速DNA测序引起了广泛注意,由于对核苷酸及其聚合物极高的分辨率,毛细管电泳在DNA测序中的应用潜力也受到重视。在高电场和使用阵列毛细管条件下,其潜在的测序能力远远超过了现有方法。 (2)手性分离现代社会中,手性分析常牵涉到人类生命、
毛细管电泳仪毛细管电泳分类
分类1、按分离目的可分:实验室毛细管电泳仪和工业毛细管电泳仪。2、按分离对象的离子属性可分:无机离子毛细管电泳仪和有机离子毛细管电泳仪。3、按作用可分:毛细管定量分析电泳仪和毛细管定性分析电泳仪。4、按分离原理可分:毛细管色谱电泳仪、毛细管区带电泳仪和毛细管凝胶电泳仪等。5、按分离特征可分:高效毛细
毛细管电泳芯片毛细管区带电泳
芯片毛细管区带电泳毛细管区带电泳是芯片毛细管电泳分离蛋白质的一种最基本的分离模式。它基于不同的蛋白质分子在电场中的迁移速率不同而实现分离,是一种简单、快速的分离方法。采用区带电泳分离模式已成功地分离了多种蛋白质样品。Colyer等采用毛细管电泳芯片,以区带电泳模式对人血清蛋白样品进行了分离,可分辨出
毛细管电泳芯片胶束电动毛细管电泳
芯片胶束电动毛细管电泳胶束电动毛细管电泳是毛细管电泳与胶束增溶色谱相结合的分离技术,其原理是在装有胶束溶液的通道内,溶质组分在电场力的作用下根据其在胶束相和水相之问的分配不同而产生分离。Jin等在玻璃芯片上采用胶束电动色谱的分离模式,以Bio-Rad公司的CE·SDS缓冲液作为分离介质,成功实现了相
蛋白质的毛细管电泳分析实验
毛细管电泳的主要特点是柱效高(N>105~106)、分析时间短,所用样品量和试剂消耗少,操作模式多,更容易改变背景电解质,在线检测和自动化,使其成为同 HPLC 互补的分析技术,在生命科学领域显示出很好的应用前景。对肽和蛋白质的分析已经从对标准样品混合物的初步优化研究朝着应用方向发展,如定量测定重组
蛋白质的毛细管电泳分析实验
基本方案 实验方法原理 实验材料 蛋白质溶液
蛋白质的毛细管电泳分析实验
实验方法原理 实验材料 蛋白质溶液仪器、耗材 毛细管电泳仪实验步骤 「操作条件选择」具体见「其他」1. 毛细管电泳柱的制备:清洗、反应与柱平衡;2. 移开进样端的缓冲溶液池,换上样品管;3. 使用低压或电迁移方式进样;4. 再换上缓冲溶液池;5. 施加分离所需的电压。 进行电泳分析。收起 注意事项
非极性毛细管色谱柱常见问题原因解析
非极性毛细管色谱柱的一些常识非常必要。使用过程中容易发生柱堵塞引起系统压力过高;柱效低引起峰拖尾、变宽;柱污染、损坏导致鬼峰等问题。引起这些问题的内在原因: 1.硅羟基的死吸附 非极性毛细管色谱柱的基材硅胶粒子表面存在硅胶羟基。任何物质在色谱柱中都存在双分配效应,即在流动相与固定相之间进行分配,
微量制备毛细管电泳实验——单次分离
实验材料多肽:ACTH 4-10试剂、试剂盒4:1(V/V)0.5 mol/L 磷酸钠缓冲液(pH 2.50)/乙烯乙二醇0.1 mol/L 氢氧化钠仪器、耗材150 μm 内径的融合硅毛细管柱CE 仪器锥形微量瓶实验步骤1. 制备多肽混合物和预处理柱子(见多次分离步骤 1 和 2)。2. 在 0.