离子交换色谱实验常见的问题
一、纯化后样品纯度不高怎么办？ 若目标蛋白和杂蛋白等电点差异较大，目标蛋白通过穿透步骤获得，通过调节起始缓冲液pH，使目标蛋白与填料之间的静电作用更强；若目标蛋白和杂蛋白等电点差异较小，目标蛋白通过洗脱步骤获得，过调节起始缓冲液pH，使目标蛋白与填料之间的静电作用更强；再调节洗脱溶液的离子强度和pH，使目标蛋白与杂蛋白逐渐分离；选择合适的离子交换填料及粒径；柱没有经过起始缓冲液的充分平衡；降低洗脱流速；调整样品溶液黏度。 二、纯化后的蛋白收率较低怎么办？ 调整样品pH，使样品pH 与起始缓冲液pH 保持一致；改变洗脱模式，如将线性梯度模式改变为阶段性梯度洗脱；改变洗脱方法，如将pH 洗脱方法改为盐梯度洗脱方法；改变洗脱强度。 三、样品过于粘稠怎么处理？ 样品过于粘稠可能是由于含有的蛋白太多，或者含有大分子量的核酸分子，通常有以下解决方法：增加裂解前稀释细胞所用体积；增加裂解时间，直至黏度下降，或者增加DNase......阅读全文
离子交换色谱实验常见的问题
一、纯化后样品纯度不高怎么办？ 若目标蛋白和杂蛋白等电点差异较大，目标蛋白通过穿透步骤获得，通过调节起始缓冲液pH，使目标蛋白与填料之间的静电作用更强；若目标蛋白和杂蛋白等电点差异较小，目标蛋白通过洗脱步骤获得，过调节起始缓冲液pH，使目标蛋白与填料之间的静电作用更强；再调节洗脱溶液的离子强度
离子交换设备常见问题
１、离子交换纯水机的耗水量怎样？ 离子交换器在整个制水过程中没有废水排出，只是在再生时需要耗水，一般耗水量可计为制水量的5-10%２、离子交换纯水机的酸碱耗量怎样，每次再生可用多长时间？离子交换器的酸碱耗量与离子交换树脂性能有关，但市面上普通的用于阳阴离子交换器的阳阴离子交换树脂，每升阳树脂需30%
制备色谱色谱峰峰常见问题
峰形对称性的优劣对峰面积和分离度有很大的影响，从而影响分析结果的准确性。引起峰形异常的因素很多，色谱实践中，大部分的峰形问题都不是色谱柱的问题，仪器参数设定、色谱条件和方法正确与否对峰形有很大影响。和小析姐看看都有哪些问题吧。 峰拖尾 常见的3种拖尾情况： 次级保留引起峰拖尾的机理解析：
实验员常见基础问题：高效液相色谱法
1.与气相色谱相比液相色谱的优点：与气相色谱法相比，液相色谱法不受样品挥发性和热稳定性及相对分子质量的限制，只要求把样品制成溶液即可，非常适合于分离生物大分子、离子型化合物，不稳定的天然产物以及其他各种高分子化合物等。此外，液相色谱的流动相不仅起到使样品沿色谱柱移动的作用，而且与固定相一样，与样品分
液相色谱常见的图谱问题
液相色谱系统的许多问题都能在谱图上反映出来。其中有一些问题可以通过改变设备参数得到解决；而其他的问题必须通过修改操作程序来解决。对于色谱柱和流动相的正确选择是得到好的色谱图的关键。 A、 峰拖尾 1、筛板阻塞 a、反冲色谱柱 b、更换进口筛板 c、更换色谱柱 2、色谱柱
离子色谱柱常见的问题分析
离子色谱柱是一款高容量氢氧根体系色谱柱，用于分析疏水性离子（包括多磷酸盐，硫氰酸盐, 硫代硫酸盐, 高氯酸盐） 和多价阴离子（包括多磷酸盐和聚羧酸锌）。 一般离子色谱柱内径约为4mm4.6mm，这样的色谱柱比较适合于常规1ml/mi流量的分析，针对特定的痕量分析和联用技术的需要，新型的离子色谱
色谱柱使用常见问题
柱压升高 原因：缓冲盐使用不当导致缓冲盐析出，堵塞塞板和键合相颗粒之间的孔隙，阻碍流动相传质，引起柱压升高； 相同化合物的保留时间发生变化 原因：如果没有冲洗干净就进行进样，色谱柱内含有的盐会使化合物的保留时间发生变化； 柱效下降 原因： 1、有些缓冲盐会渗入到键合相的深处，损害硅胶
色谱耗材常见问题（五）
1、如何清洗分流平板（镀金密封垫）A.在溶剂中超声清洗，烘干；B.用非氯硅烷化试剂去活化：HMDS（六甲基二硅烷）或BSTFA（N，O双（三甲基硅烷基）或BSA（N,O-双(三甲基硅烷基)乙酰胺）或TSIM、TSIM（N-三甲基硅烷咪唑）；C.用溶剂清洗，先惰性洗涤——甲苯，再用醇类清洗——甲醇，
离子交换色谱实验的基本流程介绍
预处理和装柱 1. 将超纯水与沉降胶按1:3 比例悬浮，轻轻搅匀； 2. 将色谱柱固定到设备支架上，链接出口管道，从柱底端进口反向泵入超纯水，排除管道及筛板中的气泡，停泵，然后从出口端放出部分超纯水，保留1~2cm 高度超纯水，封死出口端，然后正向冲洗进口端管道和适配器，排除筛板和管道中气泡
实验室分析仪器液相色谱仪常见问题色谱图问题分析
①筛板堵塞或柱失效,解决办法是反向冲洗柱子,替换筛板或更换柱子。②存在干扰峰,解决办法为使用较长的柱子,改换流动相或更换选择性好的柱子。③可能柱超载,减少进样量。
色谱柱使用中的常见问题
1、色谱柱中的流动相是否会排干不少做色谱分离试验的人遇到过这样的情形：不慎未及时补充流动相，泵将溶剂瓶中的流动相吸干了，HPLC系统由此而停止工作了。如此情况是否会损坏色谱柱？泵是否已将色谱柱中所有流动相都排干了？色谱柱还能使用吗？事实上，如果泵将溶剂瓶中的流动相吸干，并不会造成色谱柱的损坏。即使泵
液相色谱仪离子交换色谱实验操作步骤
实验操作1．填料的预处理2．装柱离子交换色谱不同于凝胶色谱，柱子通常较为短小，对于一般工作，通常选长度为10-40cm的柱已足够。柱的直径按照欲分物质的数量来选定。对于很复杂的混合物和进行精细分析是用细长的柱，分辨率较好；对于初步分离可用较粗、容量较大的柱。装好的柱子用起始缓冲液充分平衡后上样。3．
色谱峰常见问题汇总（一）
一、峰丢失 可能的原因可采用的排除方法 1.注射器有毛病1用新注射器验证。 2.未接入检测器，或检测器不起作用2.检查设定值 3.进样温度太低3.检查温度，并根据需要调整 4.柱箱温度太低4.检查温度，并根据需要调整 5.无载气流5.检查压力调节器，并检查泄漏，验证柱进品流速
离子色谱常见问题有哪些
1、电导检测器常见故障电导检测器常见故障是检测池被污染。故障原因:污染物主要来源于没有经过适当前处理的样品,如浓度过高、复杂的样品基体等。故障现象:基线噪声变大,灵敏度降低。2、分析泵常见故障分析泵常见故障是泵内产生气泡和漏液故障现象:基线的噪声加大,色谱峰形变差(出现乱峰)。3、抑制器使用中的常见
离子色谱常见问题有哪些
1、电导检测器常见故障电导检测器常见故障是检测池被污染。故障原因:污染物主要来源于没有经过适当前处理的样品,如浓度过高、复杂的样品基体等。故障现象:基线噪声变大,灵敏度降低。2、分析泵常见故障分析泵常见故障是泵内产生气泡和漏液故障现象:基线的噪声加大,色谱峰形变差(出现乱峰)。3、抑制器使用中的常见
离子色谱常见问题有哪些？
离子色谱常见问题有哪些？阅读：2565发布时间：2018/3/29离子色谱有哪些常见问题，下面表格为您一一例举，快来收藏吧！问题原因解决方法压力突然下降有气泡排气或打开脱气装置系统内漏液检查管路泵头需要维护检查清理泵头、阀、密封圈压力突然上升淋洗液有固体小颗粒；可能高纯水品质不良或过滤件污染从流路的
高压液相色谱常见问题
（一）涡流扩散（Eddy diffusion）流动相碰到较大的固体颗粒，就像流水碰到石头一样产生涡流。如果柱装填得不均匀，有的部分松散或有细沟，则流动相的速度就快；有的部位结块或装直紧密则流就慢，多条流路有快有慢，就使区带变宽。因此，固相载体的颗粒要小而均匀，装柱要松紧均一，这样涡流扩散小，
色谱工作站常见问题
电源的要求对色谱工作站提供电源支持的电网系统要求持续稳定；在工厂里要避免跟大功率动力电系统同源同线；此外在工作站电源前好安装稳压电源。 接地 色谱检测器、电脑主机都要求接地，切不可以把接地线连到自来水管或其他下水的铁管了事。 色谱工作站没有信号⑴、确认电源是否损坏，如果电源灯不亮，则电源有可能已经
色谱峰常见问题汇总（二）
六、假峰 可能的原因可采用的排除方法 1.柱吸附样品，随后解吸 1.更换衬管，如不能解决问题，就从柱进样口端去掉1~2圈，再重新安装。 2.注射器污染 2.用新注射器及干净的溶剂试一试，如假峰消失，就将注射器冲洗几次。 3.样品量太大3.减少进样量。 4.进样技术差(进样
色谱柱常见问题与解决
色谱柱在使用中zui常见的问题就是柱压升高，如果柱压是在长时间使用过程中缓慢增加，属于正常现象。但柱压在使用过程中突然升高(系统管路堵塞及压力传感器故障除外)，以下列举部分色谱柱常见问题与解决办法： 1、色谱柱头的过滤筛板堵塞或污染解决方法：如确定是色谱柱头的过滤筛板被污染，可以将色谱柱反方向用甲
液相色谱常见异常峰问题
异常的色谱峰指的是色谱图中的无峰或出现负峰、宽峰、双峰、肩峰、峰形不对称等情况。一般来说，异常峰是实验工作中较为棘手的问题。异常峰的出现会影响色谱分析的结果。通常情况下，峰型问题是由分离系统所决定的。在做液相过程中，我们就是要变换不同的条件来改善不好的峰型，对于各种各样的异常峰，要区别对待，
离子色谱常见问题及其对策
离子色谱常见问题类型主要有压力异常(偏高、波动)、漏液、保留时间漂移、基线问题(漂移、噪声)、 峰形异常等，本文主要针对这几个现象逐条分析，让你不再为使用离子色谱而烦恼。 一、压力异常 无压力，流动相不流动的可能原因： 1、保险丝断或电源问题;2、柱塞杆折断;3、泵头内有
胎牛血清实验的常见问题
一、怎样选择适合我们实验室的血清？ 国内一致认为hyclone的血清是的，但国外一般认为gibco比hyclone好，所以并不是价格决定质量，但是总的来说这两种价格普遍偏贵，一般不是太娇气的细胞，国产的就够用了。此外，由于国内hyclone，gibco并没有生产线，需要到代理商买。二、如何避免血清中
毛细电泳实验常见的13个问题
一、无样品峰出现 A、检查电流是否稳定： ①没有电流。 可能原因——毛细管堵塞或断裂。 解决方法——用水冲洗毛细管，并观察是否有水流出，若无水流出请拆下卡盒检查毛细管两端和窗口是否断裂；毛细管没有断裂的话可以用水反向高压冲洗以试图解决此问题。缓冲溶液需要过滤，将样品过滤或
气相色谱的常见问题和维护
气相色谱的常见问题和维护 一基线 1,基线向下漂移 可能的原因一:新色谱柱刚安装在设备上,基线续可能连续向下漂移几钟.这是正常现象。 建议采取措施:提高柱温箱温度至色谱柱的最高连使用温度附近,维持该温度到基线走势平稳。如果新色谱柱在初次使用中,以基线连续10分钟没有下降的趋势,应立刻冷却
十四种色谱常见使用问题的详细解答
一、用HPLC进行分析时保留时间有时发生漂移，有时发生快速变化，原因何在?如何解决?答：关于漂移问题：1、温度控制不好，解决方法是采用恒温装置，保持柱温恒定。2、流动相发生变化，解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等。3、柱子未平衡好，需对柱子进行更长时间的平衡。 关于快速变化问题1、流速发生变化，解
色谱常见十四种使用问题的详细解答
色谱常见十四种使用问题的详细解答问：用HPLC进行分析时保留时间有时发生漂移，有时发生快速变化，原因何在?如何解决? 答：关于漂移问题： 1、温度控制不好，解决方法是采用恒温装置，保持柱温恒定 2、流动相发生变化，解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等 3、柱子未平衡好，需对柱子进行
液相色谱仪的常见问题汇总
气泡溢出流动相内有气泡，关闭泵，打开泄压阀，打开purg键，清洗脱气，气泡不断从过滤器冒出，进入流动相，无论打开purge键几次，都无法清除不断产生的气泡。原因过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内,过滤器内部由于霉菌的生长繁殖，形成菌团，阻塞了过滤器，缓冲液难以流畅地通过过滤器，空气在泵的压力作用下经过
色谱常见十四种使用问题的详细解答
泰特仪器是专业生产气相色谱仪、便携式色谱仪及相关色谱耗材（色谱进样垫、色谱柱、色谱进样针等）的厂家，生产的设备符合国家标准，在市场上受到用户的青睐和认可。下面由泰特仪器的技术人员为您介绍色谱常见十四种问题的详细解答。 1,问：用HPLC进行分析时保留时间有时发生漂移，有时发生快速变化，
色谱柱在使用中最常见的问题
(1)色谱柱头的过滤筛板堵塞或污染； (2)色谱柱头的填料被样品污染； (3)色谱柱内缓冲液中的盐遇到高浓度的甲醇或其他有机溶剂，形成结晶析出； (4)流动相pH值过大或过小使固定相结构破坏或溶解。 解决办法如下： (1)如确定是色谱柱头的过滤筛板被污染，可以将色谱柱反方向用甲醇冲洗至