Celigo技术在基因治疗和病毒研究中的应用（二）
蚀斑实验流程示例见下图：经典的病毒感染滴度就是通过蚀斑实验来测定的。通常，将细胞接种在多孔培养板中形成汇合的单细胞层。在第二天，将细胞用稀释的病毒样品接种一段特定的时间（时间取决于滴定的辅助病毒）。除去接种物并用新鲜培养基换液，再将细胞孵育若干天，直到形成大到足以通过肉眼观察和计数的蚀斑。传统的蚀斑测定需要花费数天的时间，劳动强度大，并且由于不同分析人员对蚀斑进行手工计数，因此结果会比较主观。在这里，我们将Nexcelom公司的Celigo成像分析系统应用到传统蚀斑实验的工作流程中，从而自动成像、识别并计数蚀斑个数。自动化蚀斑计数不仅与手动蚀斑计数结果相一致，而且还通过消除人为偏见提高了测定的可靠性。同时，我们还整合了斑块的荧光检测，由于荧光可以更早地检测出通常肉眼看不到的微小斑块，因此不但提高了检测灵敏度还缩短了检测时长。应用该方法可以明显地增加实验和分析的通量，以加速关键的工艺开发流程。Results-手动计数对比自动计数蚀......阅读全文
Celigo技术在基因治疗和病毒研究中的应用（二）
蚀斑实验流程示例见下图：经典的病毒感染滴度就是通过蚀斑实验来测定的。通常，将细胞接种在多孔培养板中形成汇合的单细胞层。在第二天，将细胞用稀释的病毒样品接种一段特定的时间（时间取决于滴定的辅助病毒）。除去接种物并用新鲜培养基换液，再将细胞孵育若干天，直到形成大到足以通过肉眼观察和计数的蚀斑。传统的蚀斑
Celigo技术在基因治疗和病毒研究中的应用（一）
Biogen于1978年由几位著名的生物学家，包括爱丁堡大学的Kenneth Murray、麻省理工学院的Phillip Allen Sharp，以及哈佛大学的Walter Gilbert和Charles Weissmann在日内瓦成立。后来，Walter Gilbert和Phillip A
Celigo技术在基因治疗和病毒研究中的应用（三）
Disucssion这里所介绍的使用荧光检测的自动蚀斑计数方法有助于加快蚀斑检测的速度。但是，有几种类型的感染性病毒滴度实验不会形成蚀斑。半数组织培养感染剂量（TCID50）就是另一种常用的病毒滴定方法。TCID50是终点稀释测定法，用于确定感染50％接种细胞所需的病毒样品稀释度。由于蚀斑和TCID
Celigo成像分析技术在细胞杀伤中的应用（二）
这么好的方法当然需要一个强大的检测仪器来支撑 – Celigo成像细胞定量分析仪：● 明场+四色荧光● 全孔成像，图片清晰，适用于6-1536孔板● 定量分析全孔细胞数目● 软件自带流式设门分析功能● 高速同步成像和分析，15分钟内完成一块96孔板的免疫杀伤检测现在小编就以NK细胞的ADCC（抗体依
Celigo成像分析技术在细胞增殖中的应用
细胞增殖是肿瘤研究的必备实验之一。最简单直接的检测细胞增殖的方法就是在不同时间点进行细胞计数，但是在96孔板甚至384孔板的实验设置下，这无疑是难以操作的。于是，研究者们更倾向于用间接方法研究细胞增殖，比如基于线粒体内脱氢酶还原能力的MTT, MTS, CCK-8法，还有基于胞内ATP水平的Ce
Celigo成像分析技术在细胞杀伤中的应用（一）
2018年的诺贝尔生理学或医学奖授予了两位免疫学家，分别是美国的James P Allison和日本的本庶佑教授，以表彰他们的原创发现推动了免疫学研究的进程，促使了癌症治疗领域革命性新药物的面世。如今炙手可热的PD-1， CAR-T，TCR-T技术等都要归功于这一伟大发现及其临床应用。如果你的工作也
激光衍射技术在吸入制剂研究中的应用（二）
图2. 鼻喷剂一个揿次整个过程 图3. 鼻喷剂一个揿次三个阶段的分别的粒度分布及累计数据 从图3也可以看出，初始阶段平均粒径在68微米左右，而稳定后粒径变小达到37微米，而消散阶段粒径进一步变大达到45微米左右。而图4则给出了连续4个揿次的喷射数据，这样不仅可以看到每个揿次的粒径变化、粒径平均值等
激光衍射技术在吸入制剂研究中的应用（二）
图10. 马尔文喷雾粒度仪测试液雾示意图 而吸入式样品池下面是接泵或者呼吸装置，这样液雾通过上面人工喉进入激光测试区域，然后通过吸入样品池被泵抽走。图11是一个持续液雾雾化的粒径分布结果，图中横坐标为时间，纵坐标为粒径大小，三种颜色的曲线分别为雾滴粒径的D10、D50以及D90。可
中空纤维膜过滤技术在病毒类疫苗中的应用（二）
2.中空纤维膜过滤技术 2.1中空纤维膜过滤原理简介 中空纤维膜过滤技术属于切向流过滤技术（Tangential Flow Filtration, TFF）的范畴，又称错流过滤（Cross-Flow Filtration，CFF），其操作原理如图1：料液以一定的流速在膜的上表
质谱技术在蛋白组研究中的应用（二）
6 质谱仪的最新进展 用质谱检测蛋白，首先考虑到用PMF与 MALDI-TOF联用，如果无法检测，下一步就用ESI-MS/MS创建序列标签。在PMF分析中，MALDI的平板中只需一小部分样本就足以检测，剩下的样本就可以用来创建序列标签。并且，在MALDI-TOF仪器上，用一种叫做“源后延迟”
Gradiflow－技术在蛋白质分离研究中的应用（二）
2. 蛋白质组预分离2DE是研究者常用的蛋白质组分析方法，这种方法很有用，但是它的限制因素在实验过程中逐渐呈现出来，比如一些膜蛋白，高分子量和低分子量的蛋白质，就很难用2DE检测出来。特别是一些蛋白样品中包含高丰度的蛋白质，这样就很有可能将研究者感兴趣的蛋白质掩盖，在2DE图谱上体现不出来，从而减少
显微技术在病毒与传染病学研究中的应用
传染病（Infectious Diseases）是由各种病原体引起的能在人与人、动物与动物或人与动物之间相互传播的一类疾病。中国目前的法定报告传染病分为甲、乙、丙3类，共40种。此外，还包括国家卫生计生委决定列入乙类、丙类传染病管理的其他传染病和按照甲类管理开展应急监测报告的其他传染病。新型冠状
代谢组学、脂质组学在病毒研究中的应用（二）
案例三基于代谢组学技术挖掘病毒感染宿主后代谢动态变化情况2019年发表在Viruses杂志上的另一篇文章，采用基于Orbitrap 的非靶标和靶标代谢组学方式研究了麻痹病毒（Cricket paralysis virus, CrPV）感染昆虫Bm5细胞后宿主代谢的动态变化情况。研究人员发现，CrPV
包合技术在药剂学中研究和应用
包合技术在药剂学中研究和应用很广泛，有以下几点：1.提高药物的稳定性；2.增大溶解度；3.掩盖不良嗅味，降低药物刺激性与毒副作用；4.调节药物的释放度，提高药物生物利用度。
AAV基因治疗的应用研究（二）
中国科学家在CRISPR/Cas9 与AAV的联合应用方面也不甘人后。比如，2016年3月，华东师范大学生命科学院院长刘明耀教授和李大力教授首次证明了通过Cas9基因编辑技术修复F9基因突变治疗B型血友病的可行性。刘教授的团队发现了B型血友病FIX基因的新型突变Y371D，同时找到小鼠上对应的氨
基因治疗的概念和技术应用
基因治疗（gene therapy）是指将外源正常基因导入靶细胞，以纠正或补偿缺陷和异常基因引起的疾病，以达到治疗目的。其中也包括转基因等方面的技术应用，也就是将外源基因通过基因转移技术将其插入病人的适当的受体细胞中，使外源基因制造的产物能治疗某种疾病。从广义说，基因治疗还可包括从DNA水平采取的治
电泳技术在医学中的应用（二）
6. 高效毛细管电泳及高效毛细管电泳2质谱联用:高效毛细管电泳是以弹性石英毛细管为分离通道,以高压直流电场为推动力,依据样品中各组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离的电泳分离分析方法。利用毛细管代替平板凝胶,分离效率得以提高。高效毛细管电泳的应用范围从小分子、无机离子到生物大分子,甚至整个细
MEMS技术在海洋观测中的应用（二）
二、MEMS现状基于各种原因，许多MEMS产品在商业上取得了巨大成功，其中许多器件已经获得广泛应用。汽车工业是MEMS技术的主要驱动力之一。例如MEMS振动结构陀螺仪，是一款新的相当便宜的设备，目前用于汽车防滑或电子稳定控制系统中。村田电子的SCX系列MEMS加速度计、陀螺仪和倾斜仪，以及将这些功能
非病毒转染技术在基因编辑中的应用
印第安纳大学医学院的印第安纳再生医学与工程中心(ICRME)是组织纳米转染(TNT)再生医学技术的发源地，该技术可在活体中实现功能性组织重编程。去年，ICRME的研究人员在《Nature Protocol》上发表了关于如何制造TNT 2.0硅芯片硬件的文章。现在，他们的研究首次证明了TNT可以作为一
腺相关病毒（AAV）在动物实验中的应用（二）
三、肝脏AAV2、AAV5、AAV7 和 AAV8，其中 AAV7 和 AAV8 的效率是 AAV2 的 10-100 倍。注射部位常选择门静脉、外周静脉和尾静脉。注射病毒滴度一般选择 8×10^10-2×10^12(GC/kg)（人、灵长类）；1×10^11 GC/只鼠，稀释成 50-10
分离病毒及构建假病毒在抗疫研究中的应用
新冠疫情已经在全球范围爆发，目前确诊感染人数已经超过190万，并且这一数值还在持续增长中。在疫情爆发初期，我国科研战线迅速行动，不到一周时间就确定了新冠病毒的全基因组序列并分离得到了病毒毒株，及时向全球共享。那么为什么分离病毒毒株这么重要呢？毒株分离的意义和难度病毒毒株的分离对于疫情的防控、抗病毒药
二代测序技术在临床诊疗中的应用（二）
二二代测序在心血管疾病诊断中的应用1. 二代测序在心血管疾病研究中的应用潜力巨大：NGS已被证明可成功鉴定出单基因疾病和心血管系统常见疾病的新型致病突变34。NGS在常见心血管疾病（cardiovascular diseases, CVD）中正变得越来越重要，因为与仅提供已知单核苷酸多态性（si
扫描电镜在材料研究中的应用二
利用高温样品台,可以观察材料在加热过程中组织转变的过程,研究不同材料在热状态下转变的差异。在材料工艺性能研究方面,可以直接观察组织形态的动态变化,弥补了以前只能通过间接观察方法的不足。例如,耐火材料和铁氧体的烧结温度都在1000℃以上,实验中可以观察材料的原位变化,待冷却下来后,结合能谱仪和EBSD
AFM在二维材料研究中的应用
AFM在二维材料研究中的应用新型二维材料自2004年石墨烯被发现以来，探寻其他新型二维晶体材料一直是二维材料研究领域的前沿。正如石墨烯一样，大尺寸高质量的其他二维晶体不仅对于探索二维极限下新的物理现象和性能非常重要，而且在电子、光电子等领域具有诸多新奇的应用。原子力显微镜(AFM)一直被广泛用于二维
扫描电镜在药物研究中的应用二
观察微泡细胞外微泡 (EMV) 是由细胞在体外和在生物体内自然释放的膜状纳米大小的细胞器。微泡可以在各种人体体液中找到：血浆，尿液，母乳和羊水。 由于观察到它们携带功能性蛋白质，RNA分子和抗原，它们可以被理解为一种新的细胞 - 细胞通讯方式。先前的研究工作表明，从牛奶的mRNA和miRNA中获得的
裸质粒载体在基因治疗药物中的应用
基因治疗药物研发概况 基因治疗是二十世纪九十年代发展起来的一种全新的疾病治疗模式，是通过载体将外源基因导入靶细胞，以纠正或改善致病基因所产生的缺陷，达到治疗疾病的目的。根据“Gene Therapy Clinical Trials Worldwide”的统计，至2017年11月，全球范围共
裸质粒载体在基因治疗药物中的应用
基因治疗药物研发概况 基因治疗是二十世纪九十年代发展起来的一种全新的疾病治疗模式，是通过载体将外源基因导入靶细胞，以纠正或改善致病基因所产生的缺陷，达到治疗疾病的目的。根据“Gene Therapy Clinical Trials Worldwide”的统计，至2017年11月，全球范围共
裸质粒载体在基因治疗药物中的应用
基因治疗是二十世纪九十年代发展起来的一种全新的疾病治疗模式，是通过载体将外源基因导入靶细胞，以纠正或改善致病基因所产生的缺陷，达到治疗疾病的目的。根据“Gene Therapy Clinical Trials Worldwide”的统计，至2017年11月，全球范围共开展了2597个临床试验，主
FLIMFRET在病毒侵染动态研究中的应用
2020年， “病毒“这个词反复出现在公众的视野里。当我们在感慨着病毒凶猛、人类渺小和生命无常的同时，对于病毒以及相关的研究技术，我们又了解多少呢？研究难点病毒是一种个体微小、结构简单、只含一种核酸（DNA或RNA）、必须在活细胞内寄生并以复制方式增殖的非细胞型生物。而病毒侵染宿主细胞却是一个非常复
肺癌研究中慢病毒工具在体内外模型中的应用
引言：上海吉凯基因化学技术有限公司成立于2002年，拥有国内最大的慢病毒文库，同时也是国内最大的疾病关键基因科研服务供应商，在疾病研究领域的实验积累已逾14年！在这里，我们为大家特别整理了10多个研究领域的经验所得，将最实用的精华分享给大家！肺癌作为世界范围内第一大常见肿瘤，这次就当仁不让先来分