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如何鉴定CRISPR/Cas9点突变小鼠转基因鼠以及ES打靶技术...

如何鉴定CRISPR/Cas9点突变小鼠转基因鼠以及ES打靶技术构建鼠? 基因工程小鼠基因型PCR鉴定的基本原则是利用基因工程小鼠基因组与野生型小鼠基因组的序列差异,以小鼠基因组DNA为模板进行PCR,并以凝胶电泳对比不同基因型特异产物的大小,根据条带大小来区分小鼠的不同基因型。上期我们讲述了CRISPR/Cas9基因敲入鼠的鉴定,今天我们就来学习CRISPR/Cas9点突变小鼠、转基因鼠以及ES打靶技术构建鼠的鉴定。 一、CRISPR/Cas9点突变小鼠如何鉴定?点突变由于只是单碱基或少数碱基的增加、缺失或替换,在电泳图上突变片段与野生型条带的大小是无法区分的。因此只用PCR是无法鉴定的,还需要结合测序或者酶切来鉴定。 1. 引物设计选择在发生点突变的上下游片段设计引物,设计引物时,还要考虑一下突变后是否有酶切位点,使酶切点两边的片段大小有区分。先进行PCR扩增,再将扩增产物电泳后切胶或者测序。若......阅读全文

如何鉴定CRISPR/Cas9点突变小鼠转基因鼠以及ES打靶技术...

如何鉴定CRISPR/Cas9点突变小鼠转基因鼠以及ES打靶技术构建鼠?   基因工程小鼠基因型PCR鉴定的基本原则是利用基因工程小鼠基因组与野生型小鼠基因组的序列差异,以小鼠基因组DNA为模板进行PCR,并以凝胶电泳对比不同基因型特异产物的大小,根据条带大小来区分小鼠的不同基因型。上期

ES打靶和CRISPR/Cas9如何选择?

近年随着生物医药技术快速迭代,靶向药物、免疫疗法、基因治疗等个性化治疗方式成为生物药创新的主要方向。国内企业亦纷纷向生物药领域挺进或转型,生物药市场愈发火热。 其中,基因编辑婴儿事件虽然近日被《科学》杂志列入2018年度十大科学突破的负面事件,但从一年前的专利之争,到年底基因编辑公司Edit

ES打靶和CRISPR/Cas9如何选择?

  近年随着生物医药技术快速迭代,靶向药物、免疫疗法、基因治疗等个性化治疗方式成为生物药创新的主要方向。国内企业亦纷纷向生物药领域挺进或转型,生物药市场愈发火热。   其中,基因编辑婴儿事件虽然近日被《科学》杂志列入2018年度十大科学突破的负面事件,但从一年前的专利之争,到年底基因编辑

ES打靶和CRISPR/Cas9如何选择?

  近年随着生物医药技术快速迭代,靶向药物、免疫疗法、基因治疗等个性化治疗方式成为生物药创新的主要方向。国内企业亦纷纷向生物药领域挺进或转型,生物药市场愈发火热。   其中,基因编辑婴儿事件虽然近日被《科学》杂志列入2018年度十大科学突破的负面事件,但从一年前的专利之争,到年底基因编辑

CRISPR/Cas9和ES打靶选择的优劣比较

 近年随着生物医药技术快速迭代,靶向药物、免疫疗法、基因治疗等个性化治疗方式成为生物药创新的主要方向,这其中离不开基因编辑技术的发展。从一年前的专利之争,到基因编辑公司Editas人类基因编辑的临床试验获FDA批准可知,基因编辑技术的发展备受期待。 目前动物模型基因编辑技术大抵分为两类:ES细胞打靶

TetraOne KO——基因敲除技术进展

TetraOne KO——基因敲除技术的重大突破 近日,赛业生物科技(Cyagen Biosciences)宣布推出其全球专利技术TetraOne基因敲除,一种不仅在速度上媲美TALEN、CRISPR/Cas9(把ES打靶基因敲除/敲入鼠的定制周期降低至6个月),而且避免了TALEN、CRISP

TetraOne KO——基因敲除技术的重大突破

  近日,赛业生物科技(Cyagen Biosciences)宣布推出其全球专利技术TetraOne基因敲除,一种不仅在速度上媲美TALEN、CRISPR/Cas9(把ES打靶基因敲除/敲入鼠的定制周期降低至6个月),而且避免了TALEN、CRISPR/Cas9脱靶效应困扰的革命性技术。Tetra

TetraOne KO——基因敲除技术的重大突破

  TetraOne KO——基因敲除技术的重大突破   近日,赛业生物科技(Cyagen Biosciences)宣布推出其全球专利技术TetraOne基因敲除,一种不仅在速度上媲美TALEN、CRISPR/Cas9(把ES打靶基因敲除/敲入鼠的定制周期降低至6个月),而且避免了TAL

最新RNAi技术可媲美转基因小鼠模型

  基因编辑技术一直都是生命科学的热门研究领域,近来编辑领域出现了可与转基因小鼠技术相媲美的新RNAi干扰技术,该技术由洛克菲勒大学的研究人员研制出,在全基因组水平上首次对小鼠进行RNAi筛查研究,并在数月内发现了导致表皮肿瘤生长的基因,研究成果发表在《自然》期刊上。   RNAi技术筛

研究中常用的两种小鼠背景品系的选择-C57BL/6与Balb/C

基因编辑鼠的种类很多,在实际应用中,要根据研究的内容和目的来选择合适的基因编辑鼠才能取得良好的实验结果。我们通常会根据研究内容从背景品系、修饰的基因、修饰的方式以及构建技术这几个方面进行考虑来选择合适的基因编辑鼠。今天我们就先来聊一聊研究中常用的两种背景品系及构建技术的选择。 研究中常用的两种背景品