Cas9CKI小鼠繁育原则与路线讲解

随着基因工程技术的发展,针对特定基因研究的小鼠模型构建也越来越成熟。但是,构建成功的模型小鼠要用于实验,还需要漫长的繁育之路要走。行百里者半九十,你以为模型构建成功了就结束了吗?NO NO NO!繁育是提供合格实验材料过程中的临门一脚。特别是对于CKO、CKI这些组织特异性的模型小鼠,需要与cre工具鼠配繁,才能得到在特定组织敲除或敲入的目的小鼠。而基于cas9[1]技术制作的CKI小鼠,对于不同的构建策略,繁育之路也是不同的。这一点需要涉及Cas9-CKI繁育工作的研究人员注意。否则,三周怀胎,一朝分娩,含辛茹苦到断乳,最终还是宝宝心里苦。Cas9-CKI小鼠的构建过程分体外和体内两个阶段: 1.F0 代繁育原则:1) 利用CRISPR/Cas9系统打靶获得到的小鼠,由于Cas9系统在受精卵阶段对基因进行编辑,在F0代可能出现多种基因型并存的状态。Cas9技术制作的小鼠不带有Neo标记基因,但是会产生多条......阅读全文

核酸分离与纯化的设计与原则(二)

(四)核酸的浓缩、沉淀与洗涤随着核酸提取试剂的逐步加入,以及去除污染物过程中核酸分子不可避免的丢失,样品中核酸的浓度会逐渐下降,及至影响到后面的实验操作或不能满足后继研究与应用的需要时,需要对核酸进行浓缩。沉淀是核酸浓缩最常用的方法,其优点在于核酸沉淀后,可以很容易地改变溶解缓冲液和调整核酸溶液至所

国外黑臭河道治理典型案例与技术路线探讨

   2015年中共中央、国务院《关于加快推进生态文明建设的意见》(中发〔2015〕12号文)指出:“要将生态文明建设放在突出的战略位置,加大自然生态系统和环境保护力度,使蓝天常在、青山常在、绿水常在,实现中华民族永续发展”。针对我国水环境的严峻形式,国务院于2015年4月份颁布了《水污染防治行动计

XRF技术讲解

  X射线荧光光谱(XRF)技术是一项可用于确定各类材料成分构成的分析技术,已经成熟运用多年。其应用方向包括金属合金、矿物、石化产品等等。  X射线形成部分电磁波谱。其处于紫外线辐射的高能侧,使用千电子伏特表示能量高低,纳米表示波长。  XRF一般可用于分析从钠到铀的所有元素,其可识别浓度范围最低至

珍稀植物大果藤黄实现人工繁育

  大果藤黄是我国仅分布于云南德宏和西藏墨脱的珍稀狭域特有植物,具有较高的药用价值。来自德宏州瑞丽市林业局的消息,该局已成功实现大果藤黄的人工繁育,这在国内尚属首次。  瑞丽市林业局高级工程师赵见明向记者介绍,目前种苗长势良好,植株平均高度已超过15厘米。他们从野外采集到大果藤黄种子后,于2017年

离心机清洗与维护原则

    离心机是实验室的精密仪器,因此需要好好的维护,在每次实验过后都会出现清洗的情况,平时也会出现维护的情况,下面的一下基本的原则与要求。仪器维护规则1.一次规则 当系统出了故障,你可以试探性地改变某些状态,一次可以改变一个参数。做一些简单的改变步骤,也许就能解决问题。 2.二次比较规则 在动手检

DNA样品采集与知情同意原则

哈瓦苏派族一成员在和解达成后讲话  6年前,美国一个印第安小部落状告亚利桑那州立大学研究人员未经同意采集其部落成员的血液样品,要求5000万美元的赔偿。如今,双方达成庭外和解,亚利桑那州立大学退还部落成员的DNA样品,并赔偿70万美元。《科学》杂志的文章认为,这不是一件普通

生物材料的分类与选择原则

一、生物材料的种类:生物材料可分为两大类:天然生物材料和人工生物材料。1、天然生物材料一般是指在自然界易采集的、目的物含量较高的生物个体或组织。2、人工生物材料可分为三种:(1)新品种材料。(2)组织培养材料。(3)生物产品与生物制品材料。二、生物材料的选择原则:1、有效成分含量多,稳定性好。2、来

心律失常治疗原则与策略

  一、心律失常治疗的理念:临床医生在治疗时应把握哪些原则?    心律失常治疗的理念和总体原则是在整个处理过程中不能只考虑到心律失常本身,还要考虑很多临床情况。    首先,在处理过程中应把血流动力学状态放在首位,而不仅仅要弄清楚是何种性质的心律失常。更多的是对于异位心律,无论是快速型心律失常

核酸分离与纯化的原则、步骤

  磁珠提核酸   磁珠法纯化DNA主要是利用利息交换吸附材料吸附核酸,从而将核酸和蛋白质等其细胞中其他物质分离。本文主要概述了核酸分离与纯化的原则、核酸分离与纯化的步骤、磁珠法纯化DNA原理。   核酸分离与纯化的原则   核酸在细胞中总是与各种蛋白质结合在一起的。核酸的分离主要是指将核酸与

生物材料的分类与选择原则

一、生物材料的种类:        生物材料可分为两大类:天然生物材料和人工生物材料。  1、天然生物材料一般是指在自然界易采集的、目的物含量较高的生物个体或组织。  2、人工生物材料可分为三种:(1)新品种材料。(2)组织培养材料。(3)生物产品与生物制品材料。二、生物材料的选择原则:  1、有效

消毒与灭菌的原则和方法

   清洁、消毒、灭菌是预防和控制医院感染的一个重要环节.它包括医院病室内外环境的清洁、消毒、诊疗用具、器械、药物的消毒、灭菌,以及接触传染病患者的消毒隔离和终末消毒等措施.  一、概念(一)消毒     是指杀灭或清除传播媒介上的病原微生物,使之达到无害化的处理.根据有无已知的传染源可分预防性消毒

氧分析仪与焊接技术的共同应用讲解

  氧分析仪选用进口燃料电池传感器,具有寿命长、精度高、响应快等特点,不受其他气体成份的干扰。自动温度补偿,消除环境温度的影响,可选加精密过滤器。点阵OLED液晶显示,可同时显示氧含量、日期、时间,仪器内部温度等参数。定时自动存储功能,可随时查看存储数据。报警点可在全量程范围内任意设置。交直流供电,

Mitrephorone-A全合成路线

  ent-Trachylobane类天然产物mitrephorone A、B和C与二萜ent-atiserene、ent-beyerene和ent-kaurene结构相关,但却显示出罕见的、具有合成挑战性的氧化方式(Scheme 1)。初步的生物学研究显示,1-3具有中等抗微生物和抗癌活性。最近,

小鼠细胞-PCR反应体系与反应条件

小鼠细胞 PCR反应体系与反应条件标准的PCR反应体系:    10×扩增缓冲液   10ul    4种dNTP混合物   各200umol/L    引物        各10~100pmol     模板DNA      0.1~2ug      Taq DNA聚合酶   2.5u     M

小鼠细胞-PCR反应体系与反应条件

小鼠细胞 PCR反应体系与反应条件标准的PCR反应体系:    10×扩增缓冲液   10ul    4种dNTP混合物   各200umol/L    引物        各10~100pmol     模板DNA      0.1~2ug      Taq DNA聚合酶   2.5u     M

小鼠的正确抓取与固定方法(二)

操作方法①抓取小鼠,头部向上,头向后仰使口腔和食管呈直线②右手持注射器(一般用1ml的注射器配灌胃针头),从一侧口角进针,沿着上颚推至后头,以针头轻压舌根③灌胃针前端顺利进入食管后,缓慢推进,插入针时应无阻力;若感到阻力或动物挣扎时,应立即停止进针或将针拔出参考给药量:小鼠0.1ml/10g体重,最

小鼠的正确抓取与固定方法(一)

与小白鼠相生相杀的日子,被咬伤出血真是一件很让人抓狂的事,不只是影响着身体健康。所谓一朝被蛇咬,十年怕井绳,心里的恐惧还会延误我们的课题,关乎着毕业。不懂人情世故的小编也难逃此劫,回看过去几篇文章,其实小鼠性情温顺还挺可爱的,原来它咬伤我,在于我还不懂她……因此,在日常实验中,我们应该读懂小鼠,站在

我国螺类繁育研究获新进展

   近日,由中国科学院南海海洋研究所研究员何毛贤团队承担的中科院战略性先导科技专项A子课题“南海生态环境变化-关键生态种群繁育-螺类繁育”所培育的金口蝾螺、大马蹄螺人工育苗在广东省雷州市顺利通过中科院科技任务重大局组织的专家现场验收。  金口蝾螺(Turbo chrgysostomus)为腹足纲蝾

讲解外贴超声波液位开关故障与维护

  外贴超声波液位开关故障与维护是怎样的?一般应该只是1台突然发生故障,不可能5台同时出现故障。对该5台电磁阀进行检查时,发现电磁阀本身正常,但氮-223电磁阀的气路中发现有铁屑。   外贴超声波液位开关故障与维护:   a、故障现象 调节阀在接近全关位置时,阀杆出现振动,影响控制质量。   

细心讲解差压变送器工作原理与使用注意事项

  能够防止管道中的介质直接进入变送器,感压膜片与变送器之间靠注满流体的毛细管连接起来。它用于测量液体、气体或蒸汽的液位、流量和压力,然后将其转变成4—20mADC信号输出。在广泛应用的今天,差压变送器也暴漏出了很多问题,问题得不到及时解决就会影响生产的进行。   差压变送器工作原

讲解硬度计的​使用注意事项与维修方法

  硬度计使用注意事项   1、应注意电源电压的标称值,硬度计的地线和电源的极性,并要注意接地。因为当硬度计与信号源(如计算机)连接的是不同电源时,两条零线之间可能存在较高的电位差。当用户带电插拔信号线或其他插头时,会在插头插座之间发生打火现象,损坏信号输入电路,由此很有可能造成硬度计的损坏。

实验室分离与提纯的原则

  1、引入的试剂一般只跟杂质反应;  2、后续的试剂应除去过量的前加的试剂;  3、不能引进新物质;  4、杂质与试剂反应生成的物质易与被提纯物质分离;  5、过程简单,现象明显,纯度要高;  6、尽可能将杂质转化为所需物质;  7、除去多种杂质时要考虑加入试剂的合理顺序;  8、如遇到极易溶于水

小型变压器设计原则与技巧

  变压器截面积的确定  铁芯截面积A是根据变压器总功率P确定的。设计时,若按负载基本恒定不变,铁芯截面积相应可取通常计算的理论值即A=1.25。  每伏匝数的确定  变压器的匝数主要是根据铁芯截面积和硅钢片的质量而定的。  漆包线的线径确定  线径应根据负载电流确定,由于漆包线在不同环境下电流差距

消毒与灭菌的原则和方法(一)

清洁、消毒、灭菌是预防和控制医院感染的一个重要环节.它包括医院病室内外环境的清洁、消毒、诊疗用具、器械、药物的消毒、灭菌,以及接触传染病患者的消毒隔离和终末消毒等措施.  一、概念(一)消毒     是指杀灭或清除传播媒介上的病原微生物,使之达到无害化的处理.根据有无已知的传染源可分预防性消毒和疫源

消毒与灭菌的原则和方法(二)

2、消毒灭菌     包括光照消毒和电离国徽.光消毒主要是利用紫外线照射,使菌体蛋白发生光解、变性,菌体内的氨基酸、核酸、酶遭到破坏而致细菌死亡.紫外线通过空气时,可使空气中的氧气电离产生臭氧,加强了杀菌作用.紫外线穿透性差,不能透过玻璃,尘埃,纸张和固体物质;透过空气能力较强,透过液体能力

血培养结果报告原则与流程

血培养的结果报告一、 血培养的报告原则应纳入危急值报告的范畴,建立专门的危急值报告制度,详细记录包括患者信息、涂片染色结果以及报告人和告知人等内容,临床科室也应有相应记录。二、 阳性血培养的分级报告制度(一)初步报告血培养阳性报警后,应立即抽取培养液进行涂片、革兰染色、显微镜镜检,最好在1小时内将结

讲解高温电炉优势

高温电炉是加热元件与电连接后加热炉膛,从而对炉内的物体进行加热,其加热速度快,温控精度高,电炉的保温性能好,热量不容易散发,热效率高,抗干扰,高温时炉壁的温度接近室温,大大的提高了操作人员的工作环境。高温电炉污染小,更适合环保标准。高温电炉操作简单方便。高温电炉设计更为简便,占地面积小。高温电炉除了

胃液分析详细讲解

  (1)一般性状检查。包括:  1、胃液的量:空腹胃液量为10—70毫升,若大于100毫升有诊断价值。价值。见于胃液分泌过多,如十二指肠球部溃疡;胃排空障碍,如幽门梗阻等。  2、色:正常胃液为清晰无色,若为黄绿色,混浊,则有胆汁反流。  3、味:正常略带酸味。晚期胃癌可有恶臭味;小肠梗阻可出现粪

“十二五”氮氧化物减排思路与技术路线

  摘要  “十二五”期间,氮氧化物的总量控制要突出重点行业和重点区域,推行以防治火电行业排放为核心的工业氮氧化物防治体系和以防治机动车排放为核心的城市氮氧化物防治体系。要推进能源结构持续优化,严格控制新增量;全面开展电力行业氮氧化物减排;采取综合措施加强机动车氮氧化物排放控制;推进以水泥行业为主的

瞬间记忆大脑“路线图”探明-与智商和先天基因相关

  一本《论语》,甚至是厚厚的《红楼梦》,为什么有人能一目十行,不到几分钟,就可讲出书中的内容,连具体的数字也能复述出来?这种“瞬间记忆”的大脑“路线图”究竟是什么?他与人类的智商到底有什么关系?“最强大脑”是先天本能还是后天习得?  近日,中科院上海生命科学研究院神经科学研究所李澄宇课题组采用先进