Cas9CKI小鼠繁育原则与路线讲解
随着基因工程技术的发展，针对特定基因研究的小鼠模型构建也越来越成熟。但是，构建成功的模型小鼠要用于实验，还需要漫长的繁育之路要走。行百里者半九十，你以为模型构建成功了就结束了吗？NO NO NO！繁育是提供合格实验材料过程中的临门一脚。特别是对于CKO、CKI这些组织特异性的模型小鼠，需要与cre工具鼠配繁，才能得到在特定组织敲除或敲入的目的小鼠。而基于cas9[1]技术制作的CKI小鼠，对于不同的构建策略，繁育之路也是不同的。这一点需要涉及Cas9-CKI繁育工作的研究人员注意。否则，三周怀胎，一朝分娩，含辛茹苦到断乳，最终还是宝宝心里苦。Cas9-CKI小鼠的构建过程分体外和体内两个阶段： 1.F0 代繁育原则：1) 利用CRISPR/Cas9系统打靶获得到的小鼠，由于Cas9系统在受精卵阶段对基因进行编辑，在F0代可能出现多种基因型并存的状态。Cas9技术制作的小鼠不带有Neo标记基因，但是会产生多条......阅读全文
基因敲除的技术路线
基因敲除的技术路线如下:(1)构建重组基因载体﹔(2)用电穿孔、显微注射等方法把重组DNA转入受体细胞核内﹔(3)用选择培养基筛选已击中的细胞﹔(4)将击中细胞转入胚胎使其生长成为转基因动物,对转基因动物进行形态观察及分子生物学检测。
免疫共沉淀技术路线
准备工作： 预冷PBS，RIPA Buffer，细胞刮子（用保鲜膜包好后，埋冰下），离心机 1. 用预冷的PBS洗涤细胞两次，最后一次吸干PBS； 2. 加入预冷的RIPA Buffer(1ml/107个细胞、10cm培养皿或150cm2培养瓶，0.5ml/5×106个细胞、6cm培养皿、75cm2
与您细细讲解水平仪的工作原理是怎样的
水平仪的工作原理： 水平仪的水准管是由玻璃制成，水准管内壁是一个具有一定曲率半径的曲面，管内装有液体，当水平仪发生倾斜时，水准管中气泡就向水平仪升高的一端移动，从而确定水平面的位置。水准管内壁曲率半径越大，分辨率就越高，曲率半径越小，分辨率越低，因此水准管曲率半径决定了水平仪的精度。 水平
高温云母板所用材料人工与天然的区别讲解
高温云母板采用耐高温白云母或金云母原料及高温有机硅树脂粘合经烘培压制而成的硬质板状绝缘材料，具有良好的电绝缘性能和耐高温性能，特别适合于钢铁、冶金等行业各种工业电炉、工频炉、中频炉、电弧炉等高温绝缘，以及作为石棉替代品，专门为对以下性能有较高要求的电热机械应用而设计。产品通过UL安全认证，产品执
高温云母板所用材料人工与天然的区别讲解
高温云母板采用耐高温白云母或金云母原料及高温有机硅树脂粘合经烘培压制而成的硬质板状绝缘材料，具有良好的电绝缘性能和耐高温性能，特别适合于钢铁、冶金等行业各种工业电炉、工频炉、中频炉、电弧炉等高温绝缘，以及作为石棉替代品，专门为对以下性能有较高要求的电热机械应用而设计。产品通过UL安全认证，产品执
高温云母板所用材料人工与天然的区别讲解
高温云母板采用耐高温白云母或金云母原料及高温有机硅树脂粘合经烘培压制而成的硬质板状绝缘材料，具有良好的电绝缘性能和耐高温性能，特别适合于钢铁、冶金等行业各种工业电炉、工频炉、中频炉、电弧炉等高温绝缘，以及作为石棉替代品，专门为对以下性能有较高要求的电热机械应用而设计。产品通过UL安全认证，产品执
详细讲解实验室各种培养箱的对比与联系
培养箱有很多分类，根据温度可以分为：室温-60度（电热恒温培养箱）；5-60度（微生物培养箱、光照培养箱、霉菌培养箱、恒温恒湿培养箱、人工气候箱），下面小编给大家说说不同功能的培养箱所实现的功能。1、电热恒温培养箱温控范围：室温-60度，可用于大专院校、生物、农业、科研等部门作储藏菌种、生物培养，进
eLife：癌基因总闸与超强抗癌小鼠
将一个与不同类型癌症相关的调节区域移除，小鼠对肿瘤的形成产生了巨大的抵抗力！ 我们每个细胞内都有接近2万个基因，这些基因是维系我们身体和生存的说明书。在细胞生命周期的某个时间点上，只有部分基因需要保持活跃，每个基因的活性一直处于动态的调节状态，使细胞响应环境变化。 增强子是控制基因活性的分子
SARS小鼠模型的构建策略与应用进展
在全国疫情逐步清零时，北京的疫情却出现了“反弹”，牵动着全国人民的心。截止6月18日24时，北京8天内已出现新增确诊病例183例，还有一些主动筛查中发现的无症状携带病例。这无疑在告诉我们每一个人：疫情尚未结束，仍需加强防疫！ 对于中国乃至整个世界来说，由新冠病毒（SARS-CoV-2) 引起的全
大小鼠气管插管的常用方式与指导
气管插管常用方法介绍 气管插管法是指将特制的气管内导管经声门置入气管，进而打开呼吸道，通气供氧，保持气道通畅，防止误吸，为肺部疾病造模及给药等提供最佳条件。 大鼠气管插管常用胸部透光插管法、盲插法以及气管切开法（小鼠气管插管方法与大鼠类似）。胸部透光插管法操作繁琐，对经验不足的操作者不够友好，插管成
大小鼠不孕与后代出生状况差
大小鼠不孕怎么办？ 合笼之后发现大小鼠不孕，可以从以下几点考虑： 1. 雌鼠配种的年龄是否过大？C57BL/6建议选择8周以上的雌鼠雄鼠，其他常规品系6周以上即可。体重是否正常？外生殖系统是否正常？年龄太小或太大的雌鼠、体重太重或太轻的雌鼠会比较容易难产。另外，第一胎的母鼠一般生产效果都不太好，
小鼠源细胞操作步骤与注意事项
小鼠源细胞操作步骤：1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在*、第二孔中分别加标准品100μl，然后在*、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从*孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取
小鼠源细胞注意事项与操作流程
小鼠源细胞注意事项： 1. 接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。 2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。 3.严格无菌操作，打
我国揭示雌雄异株繁育系统进化系统
自从达尔文以来，雌雄异株的进化一直是进化生物学家关注的焦点。虽然雌雄异株在有花植物各大分支广泛分布，但其物种数目仅占有花植物的7-8%。由于雌雄异株分支经常处于系统发育树的顶端，且相对其雌雄同株的姐妹类群物种相对少，因此，雌雄异株一直被进化生物学家认为是“进化的死胡同”。 茜草科玉叶金花属（M
“中国青蟹之乡”实现规模化苗种繁育
青蟹肉质细嫩、味道鲜美、营养丰富，是浙江人餐桌上最受欢迎的海鲜之一。连日来，在台州三门青蟹研究院繁育基地，300余只种蟹进入抱卵关键期，即将实现大规模同步抱卵。 “我们已初步建立高质量抱卵蟹规模化培育技术体系，抱卵率达70%，这批三门原产地种蟹4月可进入幼苗培育期，5月将迎来大量优质苗种上市。”
全面清查野生动物人工繁育场所
春季是我国候鸟大规模北迁和集群活动季节，也是乱捕滥猎滥食鸟类等野生动物违法犯罪活动的高发期。日前，国家林草局召开2019年全国春季候鸟保护工作电视电话会议，部署加强候鸟保护、打击破坏鸟类资源违法犯罪活动等工作，将全面清查整顿人工繁育场所，深入开展市场执法检查，严防人工繁育场所成为非法交易候鸟等野
中国首次成功繁育帝企鹅－“宝宝”戴平安锁
这六张拍摄于2010年8月初至11月底的照片展示了小帝企鹅从孵化到成长的过程 中国首次成功繁育帝企鹅 三年科研攻关最终繁育成功 昨天，由大连老虎滩海洋公园极地馆成功繁育的帝企鹅“宝宝”与它的“妈妈”帝企鹅海伦首次公开亮相。按照中国传统习俗，极地馆的工作人员给
大泷六线鱼实现全人工繁育
大泷六线鱼是黄海、渤海中经济型鱼类之一，外形美观，肉质鲜嫩。其鲜鱼红烧、清蒸、氽汤味道均佳，尤其是质地肥美丰满的六线鱼氽汤，其汤汁如同奶油状，汤鲜、肉嫩，风味绝佳。 大泷六线鱼的肉质淡泊细嫩，是典型的白肉鱼，正直盛产期的六线鱼体内油脂丰富，肉质也会变得非常细腻甘甜软滑可口，但在其他非盛产季节的
确定样品处理方法的原则与依据（一）
样品处理是整个分析测试过程中的一个重要环节，其目的是利用各种化学方法将待测元素从固（液）态试样中定量地以离子形式转入测试溶液。选择合理的样品分解方法，可使分析手续大大简化，使分析方法的适应性、准确性大大提高。设计最佳样品处理的原则是：①保证样品中的被测元素全部定量地转入试液，即样品分解要完全；②避免
临床微生物检验的思路与原则
（1）确保临床标本可靠 恰当的辨别采集是感染性疾病诊断最为中亚的一个步骤。 （2）全面了解机体正常菌群 必须排除正常菌群的污染才能确定为感染。 （3）保证检验质量 应选择正确的建议程序和适合的试验方法，重视检验全过程每个环节的质量，一保证最终结果的可靠性。 （4）微生物学定性、定量
肠球菌属的结果评价与治疗原则
结果评价药敏结果中必须注明β-内酰胺类（如青霉素G、氨苄西林）的敏感性。庆大霉素的耐药水平（是否为高水平耐药）、万古霉素的敏感性以及β-内酰胺酶测试结果。治疗原则一般采用β-内酰胺类和氨基糖苷类联合治疗。必要时还要改用万古霉素或替考拉宁。
关节活动受限的鉴别诊断与治疗原则
鉴别诊断 1.肩关节活动受限 肩关节活动受限需要与肩关节周围炎、外伤性肩关节前脱位等相鉴别。 2.髋关节活动受限 股骨头坏死应与早期股骨头转移癌、骨肉瘤、骨斑点症、股骨头骨骺滑脱或股骨头骨骺坏死合并严重关节退行性改变鉴别。 治疗原则 针对原发病进行治疗。早期给予理疗、针灸、适度的推拿
旋转蒸发仪的优缺点与选购原则
旋转蒸发仪又叫旋转蒸发器它主要是由：马达、蒸馏瓶、加热锅、冷凝管等部分组成的实验室常用设备。一、旋转蒸发仪的优点1、所有的旋转蒸发仪都内置了一个升降马达，该装置可以在断电的时候自动将烧瓶提升到加热锅以上的位置。2、由于液体样品和蒸发瓶间的向心力和摩擦力的作用，液体样品在蒸发瓶内表面形成一层液体薄膜，
酶制剂的适当选择与使用原则
工业上应用的酶制剂大多数为水解酶，按作用底物的不同，可分为淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、果胶酶、木聚糖酶、β－葡聚糖酶、纤维素酶、植酸酶、核糖核酸酶等2底物特异性在日粮中添加非淀粉多糖酶，一方面可打破细胞壁中纤维素、半纤维素和果胶等对养分的束缚，让消化酶迅速充分的接触饲料养分，使营养物质更好地被利用。
抗氧剂与光稳定剂的选用原则
抗氧剂、光稳定剂选用时，主要应根据塑料材料的种类及型号，加工设备及工艺条件，其他化学添加剂的品种及加入量，制品的使用环境及期限等因素来综合确定抗氧剂、光稳定剂的品种。选择工业用途的抗氧剂、光稳定剂应基本参考以下原则。 1、相容性 塑料聚合物的高分子一般是非极性的，而抗氧剂、光稳定
旋转蒸发仪的优缺点与选购原则
旋转蒸发仪又叫旋转蒸发器它主要是由：马达、蒸馏瓶、加热锅、冷凝管等部分组成的实验室常用设备。一、旋转蒸发仪的优点1、所有的旋转蒸发仪都内置了一个升降马达，该装置可以在断电的时候自动将烧瓶提升到加热锅以上的位置。2、由于液体样品和蒸发瓶间的向心力和摩擦力的作用，液体样品在蒸发瓶内表面形成一层液体薄膜，
确定样品处理方法的原则与依据（二）
氧弹燃烧法 该法是将煤样置于充满高压氧的不锈钢弹筒内，通电点燃煤样，煤中有机质充分燃烧，无机矿物质也发生氧化、分解等反应；煤中Se元素转化为氧化物，再以气态形式被溶解到弹筒内的吸收液（水或稀碱）中。国外有的实验室采用此法测煤中Se。其优点是样品处理除氧外，不引入其它试剂，减少了引入干扰元素的机会。
荧光定量PCR引物的设计原则与方法
实时荧光定量PCR是一种在DNA扩增反应中，以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应（PCR）循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。 实时荧光定量PCR是实验室最常用的实验。研究基因在mRNA表达水平,以及验证基因敲除后下游靶基因变化情况等等。对于新
讲解什么是化学需氧量
化学需氧量表示在强酸性条件下重铬酸钾氧化一升污水中有机物所需的氧量,可大致表示污水中的有机物量。COD是指标水体有机污染的一项重要指标,能够反应出水体的污染程度。所谓化学需氧量（COD），是在一定的条件下，采用一定的强氧化剂处理水样时，所消耗的氧化剂量。它是表示水中还原性物质多少的一个指标。水中的
移液器的操作技巧讲解
移液器作为实验室常规的工具，在日常使用过程中，一些正确操作和技巧需要引起使用者的重视： 1、设定容量：在设定所需要的容量时应调整到大于设定容量值的1/4圈，然后再调至设定值，这样可排除机械间隙，使设定量值准确，也就是说先将容量调节钮旋转超过目的容量值的1/4圈，再向下调至设定值。 2、吸液