检测抗原的竞争法知识点
用于测定小分子抗原,如药物、激素等。原理为先用抗小分子的特异性抗体包被固相,然后同时加入待测样本和酶标记的小分子,两种小分子竞争与固相上的抗小分子的特异性抗体结合,温育一定时间后洗涤,加入酶底物显色。特点是:①酶标记抗原与样品或标准品中的非标记抗原具有相同的与固相抗体结合的能力;②反应体系中,固相抗体和酶标抗原是固定限量,且前者的结合位点少于酶标记和非标记抗原的分子数量和;③免疫反应后,结合于固相载体上复合物中被测定的酶标抗原的量(酶活性)与样品或标准品中非标记抗原的浓度成反比。......阅读全文
检测抗原的竞争法知识点
用于测定小分子抗原,如药物、激素等。原理为先用抗小分子的特异性抗体包被固相,然后同时加入待测样本和酶标记的小分子,两种小分子竞争与固相上的抗小分子的特异性抗体结合,温育一定时间后洗涤,加入酶底物显色。特点是:①酶标记抗原与样品或标准品中的非标记抗原具有相同的与固相抗体结合的能力;②反应体系中,固相抗
检测抗原的竞争法知识点
用于测定小分子抗原,如药物、激素等。原理为先用抗小分子的特异性抗体包被固相,然后同时加入待测样本和酶标记的小分子,两种小分子竞争与固相上的抗小分子的特异性抗体结合,温育一定时间后洗涤,加入酶底物显色。特点是:①酶标记抗原与样品或标准品中的非标记抗原具有相同的与固相抗体结合的能力;②反应体系中,固相抗
ELISA抗原竞争法检测样品中sIL...
实验概要本法是用纯化或重组的IL-2R(α链,P55,CD25,Tac抗原)蛋白包被96孔酶标反应板,同时加入已知量的抗IL-2RMcAb,再分别加入sIL-2R标准品与待测样品。则待测sIL-2R或者sIL-2R标准品与包被的纯化或重组的IL-2R蛋白竞争与抗IL-2R McAb结合。通过与标
竞争法测定抗原的操作步骤
竞争法可用于测定抗原,也可用于测定抗体。以测定抗原为例,受检抗原和酶标抗原竞争与固相抗体结合,因此结合于固相的酶标抗原量与受检抗原的量呈反比。操作步骤如下:⑴将特异抗体与固相载体连接,形成固相抗体。洗涤。⑵待测管中加受检标本和一定量酶标抗原的混合溶液,使之与固相抗体反应。如受检标本中无抗原,则酶标抗
竞争法测定抗原抗体的相关介绍
⑴将特异抗体与固相载体连接,形成固相抗体。洗涤。 ⑵待测管中加受检标本和一定量酶标抗原的混合溶液,使之与固相抗体反应。如受检标本中无抗原,则酶标抗原能顺利地与固相抗体结合。如受检标本中含有抗原,则与酶标抗原以同样的机会与固相抗体结合,竞争性地占去了酶标抗原与固相载体结合的机会,使酶标抗原与固相
ELISA抗原竞争法检测样品中sIL2R含量
【基本原理】 本法是用纯化或重组的IL-2R(α链,P55,CD25,Tac抗原)蛋白包被96孔酶标反应板,同时加入已知量的抗IL-2RMcAb,再分别加入sIL-2R标准品与待测样品。则待测sIL-2R或者sIL-2R标准品与包被的纯化或重组的IL-2R蛋白竞争与抗IL-2R McAb结合
ELISA抗原竞争法检测样品中sIL2R含量
实验概要本法是用纯化或重组的IL-2R(α链,P55,CD25,Tac抗原)蛋白包被96孔酶标反应板,同时加入已知量的抗IL-2RMcAb,再分别加入sIL-2R标准品与待测样品。则待测sIL-2R或者sIL-2R标准品与包被的纯化或重组的IL-2R蛋白竞争与抗IL-2R McAb结合。通过与标
ELISA测定的常用模式竞争法测抗原
大分子抗原因其具有两个以上的抗原决定簇,而可用双抗体夹心法测定,小分子半抗原如地高辛、茶碱等药物以及T3,T4及睾酮等激素因其只有一个抗原决定簇,从而无法使用双抗夹心方法测定,只能采用竞争抑制法测定。具体步骤如下:1.先用抗小分子的特异抗体如双抗体夹心法一样包被固相并封闭。2.同时加入待测样本和酶标
竞争法测定抗原的相关内容介绍
竞争法可用于测定抗原,也可用于测定抗体。以测定抗原为例,受检抗原和酶标抗原竞争与固相抗体结合,因此结合于固相的酶标抗原量与受检抗原的量呈反比。操作步骤如下: ⑴将特异抗体与固相载体连接,形成固相抗体。洗涤。 ⑵待测管中加受检标本和一定量酶标抗原的混合溶液,使之与固相抗体反应。如受检标本中无抗
竞争法测抗原基本原理
竞争法测抗原基本原理:首先将特异性抗体吸附于固相载体表面(包被),经洗涤后分成两组:一组加酶标记抗原和被测抗原的混合液,而另一组只加酶标记抗原,标本中的抗原和一定量的酶标抗原竞争与固相抗体结会(标本中抗原量含量愈多,结含在固相上的酶抗原愈少,最后的显色也愈浅);再经孵育洗涤后加底物显色,两组底物降解
人ELISA试剂盒竞争法测抗原
人ELISA试剂盒然后再加标本和酶标抗体进行竞争结合反应。竞争法测抗体有多种模式,可将标本和酶标抗体与固相抗原竞争结合,抗HBc 一般采用此法。另一种模式为将标本与抗原一起加入到固相抗体中进行竞争结合,洗涤后再加入酶标抗体,与结合在固相上的抗原反应。抗HBe的检测一般采用此法。小分子抗原或半
竞争法测抗原基本原理
竞争法测抗原基本原理:首先将特异性抗体吸附于固相载体表面(包被),经洗涤后分成两组:一组加酶标记抗原和被测抗原的混合液,而另一组只加酶标记抗原,标本中的抗原和一定量的酶标抗原竞争与固相抗体结会(标本中抗原量含量愈多,结含在固相上的酶抗原愈少,最后的显色也愈浅),再经孵育洗涤后加底物显色,两组底物降解
ABO血型抗原知识点总结
(1)AB0抗原的遗传:AB0血型系统的产生及定位:由3个分离位点的基因所控制,即AB0、Hh、Sese基因。基因Hh和Sese紧密相连在第9对染色体上。现在一般接受“三复等位基因”学说:认为在决定AB0血型遗传的基因座上,有A、B、O三个等位基因。AB0遗传座位在第9号染色体的长臂3区4带。A和B
关于Elisa试剂盒竞争法测抗原的原理与步骤
当抗原材料中的干扰物质不易除去,或不易得到足够的纯化抗原时,可用此法检测特异性抗体。其原理为标本中的抗体和一定量的酶标抗体竞争与固相抗原结合。标本中抗体量越多,结合在固相上的酶标抗体愈少,因此阳性反应呈色浅于阴性反应。如抗原为高纯度的,可直接包被固相。如抗原中会有干扰物质,直接包被不易成功,可采用捕
免疫技术中竞争法可以测大分子抗原吗
可以的 因为ELISA中有一种方法是竞争法测抗体,一般的抗原应该没有抗体大吧IgG有15KD的,但是个人感觉就好像你拿1000ul的移液器去吸取0.5ul一样,准确率不敢保证,原理上来说是没问题的,下例:抗体的测定一般不使用竞争法。当抗原中杂质难以去除或抗原的结合特异性不稳定时,可采用这种模式测定抗
ELISA常用检测法——竞争法原理介绍
做ELISA实验,有几种常见的实验方法,他们分别是竞争法、捕获法、间接法、夹心法、而夹心法又可以分为双抗体夹心法和双抗原夹心法!在今天的文章中,将详细得跟大家讲述竞争法的实验原理!竞争法一般分为直接竞争法和间接竞争法,这里我们以直接竞争法为例进行原理讲解。直接竞争法,其基本原理是:将合适浓度的包被抗
检测细菌或其抗原的手段—抗原检测与分析
有些细菌即使用生化反应变难区别,但其细菌抗原成份(包括菌体抗原、鞭毛抗原)却不同。利用已知的特异抗体测定有无相应的细菌抗原可以确定菌种或菌型。 常用的方法为玻片凝集反应,用已知的特异免疫血清与待鉴定的细菌在玻片上做凝集反应,如出现凝集菌团则为阳性,说明该菌有相应的特异抗原。近年采用了各种检测抗
HLA抗原的检测(一)
(一)HLA-A、B、C抗原的检测 HLA-A、B、C抗原可用血清学方法鉴定,故又称SD抗原(serologically defined antigen),常采用微量淋巴细胞毒性试验(microlymphocytotoxicity test),又称补体依赖细胞毒试验(complemen
HLA抗原的检测(二)
(四)HLA-DP抗原的检测 HLA-DP抗原的检测可采用预处理淋巴细胞分型试验(primed lymphocyte typing test,PLT)基本步骤是首先取有一个单倍体相同的两个个体的淋巴细胞进行混合培养,这在双亲与子女间很容易找到,如亲代a/b,子代a/c。先将a/c经X线照射
双抗体夹心法和竞争-ELISA-检测法的比较
双抗体夹心法和竞争 ELISA 法有以下几个方面的比较:原理双抗体夹心法:利用两种针对抗原不同表位的特异性抗体,一种包被在固相载体上捕获抗原,另一种用酶标记用于检测被捕获的抗原,形成“固相抗体 - 抗原 - 酶标抗体”复合物。竞争 ELISA 法:分为直接竞争法和间接竞争法。直接竞争法是将酶标记的抗
病毒抗原检测的相关叙述
病原检测主要指用病毒分离培养、电镜形态观察、病毒抗原检测和基因测定等方法从宿主标本中直接检测病毒或病毒基因。由于前两种方法难度大,且需要特殊设备和专业技术人员。因此仅抗原检测和RT-PCR(反转录-PCR)可用于临床诊断。HIV-1P24抗原检测可用于HIV-1抗体不确定或窗口期的辅助诊断;HI
检测抗原的方法有哪些?
1.双抗体夹心法:属于非竞争结合,检测抗原最常用的方法,检测含有至少两个抗原决定簇的多价抗原。原理是先将特异性抗体与固相载体连接;加入待测标本,形成固相抗原抗体复合物;再加入酶标抗体形成双抗体夹心,洗涤;加底物显色,根据颜色反应的程度进行该抗原的定性或定量检测。如血清标本中有类风湿因子(RF) 存在
检测抗原的方法有哪些?
1.双抗体夹心法:属于非竞争结合,检测抗原最常用的方法,检测含有至少两个抗原决定簇的多价抗原。原理是先将特异性抗体与固相载体连接;加入待测标本,形成固相抗原抗体复合物;再加入酶标抗体形成双抗体夹心,洗涤;加底物显色,根据颜色反应的程度进行该抗原的定性或定量检测。如血清标本中有类风湿因子(RF) 存在
竞争法测抗体的实验原理
竞争法测抗体的实验原理当抗原材料中的干扰物质不易除去,或不易得到足够的纯化抗原时,可用此法检测特异性抗体。其原理为标本中的抗体和一定量的酶标抗体竞争与固相抗原结合。标本中抗体量越多,结合在固相上的酶标抗体愈少,因此阳性反应呈色浅于阴性反应。如抗原为高纯度的,可直接包被固相。如抗原中会有干扰物质,直接
腺病毒的抗原检测的介绍
常用来直接检测腺病毒在呼吸道和胃肠道的感染,较快速且灵敏度较高。免疫荧光(尤其对呼吸道标本、咽拭子和活组织标本)和酶免疫分析(尤其对于粪便标本)是常用的方法,与细胞培养相比,免疫荧光所测腺病毒的灵敏性能提高40%~60%,其它直接测定抗原的方法包括免疫层析法和乳胶凝集法。研究证实,与细胞培养检测
HCMV抗原检测有什么?
①早期抗原免疫荧光检查(DEAFF):通过测定DNA合成前产生的早期抗原(EA)来确定HCMV的存在。 ②HCMV抗原血症诊断:可帮助早期诊断免疫抑制或免疫缺陷患者的活动性HCMV感染。该方法直接定性或定量检测外周血白细胞中HCMV抗原的表达,一般在活动性感染前1周即出现阳性。
Elisa竞争法抑制试验原理
针对于HBeAb的中和抑制法采用抗-HBe抗体包被反应板,加入校准品及被测样本,同时加入定量HBeAg中和抗原,经过振荡孵育,洗板后再加入铕标记的抗-HBe,若标本中抗-HBe浓度高,HBeAg将被大量中和,使最后形成的抗-HBe-HBeAg-铕标记抗-HBe复合物减少。增强液(β-NTA)将标记在
Elisa竞争法抑制试验原理
针对于HBeAb的中和抑制法采用抗-HBe抗体包被反应板,加入校准品及被测样本,同时加入定量HBeAg中和抗原,经过振荡孵育,洗板后再加入铕标记的抗-HBe,若标本中抗-HBe浓度高,HBeAg将被大量中和,使最后形成的抗-HBe-HBeAg-铕标记抗-HBe复合物减少。增强液(β-NTA)将标记在
血型抗原的检测方法是什么?
常用盐水凝集法检测红细胞上存在的血型抗原,以及血清中存在的血型抗体, 依据抗原抗体存在的情况判定血型。常规的方法有: ①正向定型:用已知抗体的标准血清检查红细胞上未知的抗原。 ②反向定型:用已知血型的标准红细胞检查血清中未知的抗体。 结果判定:凡红细胞出现凝集者为阳性,呈散在游离状态为阴
人类免疫缺陷病毒的抗原检测
第四代艾滋病病毒抗原抗体检测可以同时检出艾滋病病毒抗体和HIVp24抗原,广泛用于临床。与单纯抗体检测相比,提高了准确性,尤其是对慢性艾滋病病毒感染者的敏感性和特异性接近100%。此外,第四代艾滋病病毒检测将艾滋病窗口期缩短至14~21天,有助于早期发现艾滋病病毒感染。不足之处是,增加了非特异性