免疫测定法方法学评价
免疫测定法几乎可以用于所有细胞因子的检测。优点:①特异性高,使用特异的单克隆抗体,可用于单一细胞因子的检测;②操作简便、快速,无需依赖细胞株,故不需维持培养,可操作性增加,容易推广和便于普查;③影响因素相对较少且容易控制,重复性好,方法容易标准化。缺点:①所测定的只是细胞因子的蛋白含量,与其生物活性不一定成正比;②测定结果与所用的抗体来源及亲和力有很大的关系,使用不同来源亲和力的单抗,对同一标本测到的结果可能不同;③敏感性相对较低,比生物活性法约低10~100倍,测定下限一般为100pg;④若标本中存在细胞因子的可溶性受体,可能会影响特异性抗体对细胞因子的结合。......阅读全文
血红蛋白测定的方法学评价有哪些
1、氰化高铁血红蛋白法(HiCN): 1966年被ICSH推荐为参考方法。该法操作简单、显色快、结果稳定可靠、读取吸光度后可直接定值等优点。其致命的弱点是氰化钾(KCN)试剂有剧毒,使用管理不当可造成公害。 2、十二烷基硫酸钠血红蛋白测定法(SDS): 该法操作简单、呈色稳定、准确性和精确
荧光偏振免疫测定是什么?方法评价是什么?
利用抗原抗体竞争反应原理,根据荧光素标记抗原与其抗原抗体复合物的荧光偏振程度的差异,测定体液中小分子物质的含量。(一)基本原理荧光偏振免疫测定常用异硫氰酸荧光素(FITC)标记小分子抗原。(二)方法评价荧光偏振免疫测定样品用量少;荧光素标记结合物稳定,使用寿命长;方法重复性好;快速,易自动化;试剂盒
白细胞分类计数(DC)的检测原理和方法学评价
【检测原理】制片→染色→油镜分类 求得各种白细胞的比值(百分率)各类白细胞的绝对值 (白细胞计数值×白细胞分类计数%)
白细胞分类计数(DC)的检测原理和方法学评价
【检测原理】 制片→染色→油镜分类 求得各种白细胞的比值(百分率) 各类白细胞的绝对值 (白细胞计数值×白细胞分类计数%) 【方法学评价】 1.显微镜分类法 能准确地根据细胞形态特征进行分类,是白细胞分类计数参考方法,但耗时、精确性和重复性较差。 2.血液分析仪分类法 有三分群
荧光酶免疫测定的基本原理和方法评价
基本原理 以碱性磷酸酶(ALP)标记抗体(或抗原),以固相载体包被抗原(或抗体),碱性磷酸酶分解荧光底物4-甲基伞酮磷酸盐(4-MUP)形成4-MU,经360nm激发光的照射,发出450nm的荧光。 方法评价 固相荧光酶免疫测定法,避免了血清和其他生物样品的背景荧光会干扰。
钾、钠测定方法学评价之化学测定法是什么
主要利用复环王冠化合物如穴冠醚或球冠醚,亦称为冠醚,均为离子载体进行测定,由于大环结构内有空穴,分子内部氧原子有未共用电子对可与金属离子结合,根据空穴大小,可选择性结合不同直径的金属离子,从而可达到测出离子浓度的目的。测定血清K,一般采用普通冠醚阴离子染料进行比色定量。
尿颜色和透明度的检测原理与方法学评价
(一)检测原理 通过肉眼观察判断尿外观。透明度,可分为清晰透明、轻度混浊(雾状)、混浊(云雾状)、明显混浊4个等级。(二)方法学评价尿色和透明度判断,受主观因素影响。尿透明度还易受某些盐类结晶的影响。临床应用仅作参考。
BV-Blue法诊断细菌性阴道病的方法学评价
【摘要】 目的:对BV Blue 法诊断细菌性阴道病(BV)进行方法学评价。方法:以Amsel法为诊断用BV的参考方法,同时应用BV Blue法检测320例妇科门诊患者的BV发病率。结果:BV Blue法诊断BV的阳性率为19.7%,Amsel法阳性率为20.6%,两者差异无统计学
实时PCR检测HSV2-DNA的方法学评价及应用
【摘要】 目的 对本室利用Taq Man MG技术建立的HSV-2实时定量PCR法进行方法学评价及临床应用。 方法 收集60名近期有流产史妇女的全血及血清标本,分别用FQPCR和ELISA法同时检测,并进行比较;另对FQPCR从重复性、灵敏度、线性范围、特异性几方面进行方法学评价。结果 对60
应用流式细胞仪检测CD34+细胞方法学评价
应用流式细胞术(FACS)测定动员后的外周血及采集的自体外周血造血干细胞(APBSC)中的CD34+细胞及其亚群,操作简单、快速、重复性好,对及时掌握最佳采集时机,准确判断采集的干/祖细胞数量具有重要指导意义。为准确检测外周血及APBSC中的CD34+细胞,本文比较了几种FACS检测CD34+细胞方
应用流式细胞仪检测CD34+细胞方法学评价
应用流式细胞术(FACS)测定动员后的外周血及采集的自体外周血造血干细胞(APBSC)中的CD34+细胞及其亚群,操作简单、快速、重复性好,对及时掌握最佳采集时机,准确判断采集的干/祖细胞数量具有重要指导意义。为准确检测外周血及APBSC中的CD34+细胞,本文比较了几种FACS检测CD34+细胞方
BV-Blue法诊断细菌性阴道炎的方法学评价
【摘要】 目的:对BV Blue 法诊断性阴道病(BV)进行方法学评价。方法:以Amsel法为诊断用BV的参考方法,同时应用BV Blue法检测320例妇科门诊患者的BV发病率。结果:BV Blue法诊断BV的阳性率为19.7%,Amsel法阳性率为20.6%,两者差异无统计学意义(P>0.
应用流式细胞仪检测CD34+细胞方法学评价
应用流式细胞术(FACS)测定动员后的外周血及采集的自体外周血造血干细胞(APBSC)中的CD34+细胞及其亚群,操作简单、快速、重复性好,对及时掌握最佳采集时机,准确判断采集的干 /祖细胞数量具有重要指导意义。为准确检测外周血及 APBSC中的CD34+细胞,本文比较了几种 FACS检测CD
糖尿病及其并发症的实验室检测及方法学评价
(一)体液葡萄糖的检测 酶法为推荐使用的测定方法(如:己糖激酶法或葡萄糖氧化酶法)。 1. 标本收集和贮存 大多数临床实验室采用血浆或血清测葡萄糖浓度,而大多数床旁测定葡萄糖的方法使用的是全血。使用不同的标本应采用不同的参考值。 室温下,血细
糖尿病及其并发症的实验室检测及方法学评价
(一)体液葡萄糖的检测 酶法为推荐使用的测定方法(如:己糖激酶法或葡萄糖氧化酶法)。 1. 标本收集和贮存 大多数临床实验室采用血浆或血清测葡萄糖浓度,而大多数床旁测定葡萄糖的方法使用的是全血。使用不同的标本应采用不同的参考值。 室温下,血细胞中进行的糖酵解使血中葡萄糖
糖尿病及其并发症的实验室检测及方法学评价
(一)体液葡萄糖的检测 酶法为推荐使用的测定方法(如:己糖激酶法或葡萄糖氧化酶法)。 1. 标本收集和贮存 大多数临床实验室采用血浆或血清测葡萄糖浓度,而大多数床旁测定葡萄糖的方法使用的是全血。使用不同的标本应采用不同的参考值。 室温下,血细胞中进行的糖酵解使
ELISA方法学
ELISA方法用于杂交瘤和噬菌体展示筛选是最为广泛的高通量的抗体发现的筛选方法,其实质是亲和力测定方法的一种变种,其目的是需要建立ELISA信号值和样品亲和力大小之间的正相关性。相对于采用ELISA进行抗体的亲和力测定方法,用于杂交瘤和噬菌体展示筛选的ELISA方法有以下难点:待测样本极具多样性,且
糖尿病及其并发症的实验室检测及方法学评价(二)
(三)乳酸和丙酮酸的检测(四)糖化蛋白的检测 糖基化是指通过非酶促作用将糖基加到蛋白质的氨基酸基团上。测定糖化蛋白(glycated protein)可为较长时间段的血糖浓度提供回顾性评估,而不受短期血糖浓度波动的影响。 1. 糖化血红蛋白 糖化Hb的形成是不可逆的,其浓度
糖尿病及其并发症的实验室检测及方法学评价(一)
(一)体液葡萄糖的检测 酶法为推荐使用的测定方法(如:己糖激酶法或葡萄糖氧化酶法)。 1. 标本收集和贮存 大多数临床实验室采用血浆或血清测葡萄糖浓度,而大多数床旁测定葡萄糖的方法使用的是全血。使用不同的标本应采用不同的参考值。 室温下,血细胞中进行的糖酵解使血中葡萄糖
缺失定位法方法介绍
一个细胞中的两个同源染色体中的一个上有一个突变基因,另一染色体上有一小段已知范围的缺失,如果这一突变基因的位置在缺失范围内,便不可能通过重组而得到野生型重组体;如果突变基因不在缺失范围内,那么就可以得到野生型重组体。利用一系列已知缺失位置和范围的缺失突变型,便能测定突变型基因的位置。
转录定位法方法介绍
许多 RNA病毒的整个基因组往往作为一个单位转录。随着转录的进行,由基因组上各个基因所编码的蛋白质也依序在寄主细胞中出现。当寄主细胞被紫外线照射使本身的蛋白质合成受到抑制时,病毒蛋白的出现更为明显。紫外线照射也起着抑制病毒基因组的转录的作用。紫外线在 RNA分子的某一部位造成损伤后,损伤的部位和它后
免疫测定ELISA法
ELISA法是细胞因子首选检测法,可作定性或定量分析。双抗体夹心法是用于细胞因子测定的最常用方法,该法使用的抗体可以是针对同一抗原的多克隆抗体,也可以是针对同一抗原的不同抗原表位的单克隆抗体。 细胞因子测定的标本主要包括两大类,一是血清(血浆)、关节液等体液,可用于细胞因子和可溶性黏附分子的检
荧光免疫测定技术
荧光免疫测定技术的概念:将试剂抗原或试剂抗体用荧光素进行标记,试剂与标本中相应的抗体或抗原反应后,测定复合物中的荧光素,这种免疫技术,称为免疫荧光测定技术。荧光免疫测定技术分类:荧光抗体技术(荧光显微镜技术):抗原抗体反应后,利用荧光显微镜判定结果的检测方法。免疫荧光测定技术:抗原抗体反应后,利用特
酶免疫测定方法
ACA(抗心磷脂抗体)主要通过抑制血管内皮细胞合成PGI2,干扰血栓调节素、纤溶酶原激活剂和蛋白质C系统的活性,抑制抗凝血酶III的活化等而致凝血前高凝状态,与复发性动静脉血栓形成、反复自然流产及血小板减少症关系密切。其主要程序为用纯心磷脂的无水乙醇溶液包被聚苯乙烯板,封闭后分别于标本孔和对照孔中加
免疫测定的概念
中文名称免疫测定英文名称immunoassay定 义基于免疫亲和结合(抗体与抗原的结合)原理对特定的生化物质所进行的定性或定量分析。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
异相酶免疫测定
异相酶免疫测定是目前应用最广泛的一类标记免疫测定技术。异相液相酶免疫测定主要用于检测样品中极微量的短肽激素和某些药物等小分子半抗原。酶标志物具有更好的稳定性,且无放射性污染。1.平衡法:将待测样品抗原、酶标抗原及特异性抗体进行一次性温育,待反应达平衡后,测定离心沉淀物(酶标抗原抗体复合物)中加入酶底
共缺失法方法介绍
缺失带来和基因突变相同的表型。由一次缺失所造成的突变只涉及相邻接的基因,因此可以从缺失所带来的基因突变的分析来测定一些基因的相对位置,这一方法被广泛应用于酵母菌的线粒体基因的定位(见染色体外遗传)。根据基因行为的定位 基因的某些行为可以反映它们的位置。在细菌接合过程中“雄性”细菌的染色体基因按先后
显微注射法方法简介
显微注射法(microinjection)是利用管尖极细(0.1至0.5μm)的玻璃微量注射针,将外源基因片段直接注射到原核期胚或培养的细胞中,然后藉由宿主基因组序列可能发生的重组(rearrangement)、缺失(deletion)、复制(duplication)或易位(translocatio
共转导法方法介绍
共转导法公式2每一种转导噬菌体有一定的大小,只能携带一定长度的供体细菌的 DNA。例如大肠杆菌噬菌体PI的头部中只能包装大约分子量为5.8×10的DNA,大肠杆菌的染色体DNA的分子量是2.5×10,所以PI所能包装的 DNA至多相当于大肠杆菌的遗传学图上相距两分钟这样一段DNA分子。如果两个基因能
血液透析疗法方法介绍
将患者的血液和透析液同时引进透析器(两者的流动方向相反),利用透析器(人工肾)的半透膜,将血中蓄积的过多毒素和过多的水分清出体外,并补充碱基以纠正酸中毒,调整电解质紊乱,替代肾脏的排泄功能。血液透析器俗称人工肾,有空心纤维型、盘管型及平板型3种 。最常用的是空心纤维型 ,由1万~1.5万根空心纤维组