应用流式细胞仪检测CD34+细胞方法学评价
应用流式细胞术(FACS)测定动员后的外周血及采集的自体外周血造血干细胞(APBSC)中的CD34+细胞及其亚群,操作简单、快速、重复性好,对及时掌握最佳采集时机,准确判断采集的干/祖细胞数量具有重要指导意义。为准确检测外周血及APBSC中的CD34+细胞,本文比较了几种FACS检测CD34+细胞方法的异同。1、材料与方法1.1 外周血造血干细胞 APBSC采集自经环磷酰胺(CTX)+重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员后的实体瘤患者(淋巴瘤、乳腺癌),采集使用CS3000- Plus血细胞分离机(Baxter公司,美国)。1.2 CD34+细胞的标记 对10份APBSC分别进行2种不同再处理与CD34标记。 1.2.1 溶血法 APBSC与CD34-PE荧光单克隆抗体(Immunotec,法国)室温暗处反应15min,然后用细胞裂解液溶解红细胞,待测。 1.2.2 分离单个核细胞法 经Fi......阅读全文
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