测定酶活性浓度测试——固定时间法

固定时间法(取样法、终点法、两点法)先让酶与底物在一定温度下作用一段固定的时间,然后停止酶反应,加入试剂进入化学反应呈色测出底物和产物的变化。用这类方法测酶活性浓度,必须保证酶和底物在所选定的温度下作用时间要很精确,否则将引起较大误差。该法最基本的一点是停止反应后才测定底物或产物的变化。......阅读全文

色谱法中保留时间越长越好吗

不是的。这要具体情况具体分析。分析要考虑多方面因素:1,快速分析,就是时间问题。你如果一个样品运行两三个小时,那太影响效率了。2,准确度。样品保保留时间越短越不利于分离,但时间越长,样品在柱子里扩散越严重,越容易影响分析结果。3,成本。不只是上面说的时间成本,还要考虑人力成本,还有试剂,用电,仪器损

干热灭菌法要求的温度和时间

为了保证灭菌效果,一般规定:135-140摄氏度灭菌3-5h;160-170摄氏度灭菌2-4h;180-200摄氏度灭菌0.5-1h。干热灭菌法 细菌的繁殖体在干燥状态下,80℃~100℃ 1小时可被杀死;芽胞需要加热至160℃~170℃ 2小时才杀灭。干热灭菌的方法有①焚烧:用火焚烧是一种彻底的灭

组织固定固定液的选择

影响标本固定的因素很多,如组织与固定液的比例、固定时间、固定温度等;除此之外,固定液本身也很重要,若所选固定液不当,细胞内蛋白质、脂类、核 酸等成 分将会有不同程度地损失。固定剂最好随配随用,并注意其浓度和酸碱度。因此根据实际工作的目的,选用合适的固定液非常重要。下面是一些常用固定液的配制方

细胞介导细胞毒作用检测法:时间分辩荧光分析法

1)铕荧光检测法:标记靶细胞:1、EuCl3的制备:称取58.08mg Eu2O3,用少量1N HCl搅拌至溶解,再用1N NaOH调节pH至4.0。加双蒸水配成33~100mmol/L的保存液,4℃保存备用。2、用预冷的标记液将靶细胞浓度调整到5×106/ml,加50μl 10mg/ml硫酸葡聚糖

如何选择反相键合相色谱法的固定相

键合相色谱法是由液-液色谱法即分配色谱发展起来的。键合相色谱法将固定相共价结合在载体颗粒上,克服了分配色谱中由于固定相在流动中有微量溶解,及流动相通过色谱柱时的机械冲击,固定相不断损失,色谱柱的性质逐渐改变等缺点。键合相色谱法可分为正常相色谱法和反相色谱法。反相色谱法在反相色谱法中共价结合到载体上的

液相色谱法什么是固定相什么是流动相

用流动相稀释样品主要是为了提高分离度,增加理论塔板数,使峰形尖锐,对称。具体理由如下:色谱法的实质是样品在流动相与固定相之间反复分配的过程,这个过程在实际中会受到很多因素的影响从而造成分离度下降,理论塔板数降低,使得分离不理想.根据液相色谱vandeemter方程h=a+cμ(a为涡流扩散系数,c为

液相色谱法什么是固定相什么是流动相

在色谱法中,是利用溶液中被分离物质在两相中分配系数不同以使组分分离的方法。其中一相为液体,涂布或使之键合在固体载体上,称固定相;另一相为液体或气体,称流动相,流动相中携带了(溶解)待测的药物。固定相就是用来分离物质的,流动相就是载体,将物质带到固定相里并通过固定相的流体。在气相里就是栽气,在液相里就

液相色谱法什么是固定相什么是流动相

在色谱法中,是利用溶液中被分离物质在两相中分配系数不同以使组分分离的方法。其中一相为液体,涂布或使之键合在固体载体上,称固定相;另一相为液体或气体,称流动相,流动相中携带了( 溶解)待测的药物。固定相就是用来分离物质的,流动相就是载体,将物质带到固定相里并通过固定相的流体。在气相里就是栽气,在液相里

液相色谱法什么是固定相什么是流动相

在色谱法中,是利用溶液中被分离物质在两相中分配系数不同以使组分分离的方法。其中一相为液体,涂布或使之键合在固体载体上,称固定相;另一相为液体或气体,称流动相,流动相中携带了( 溶解)待测的药物。固定相就是用来分离物质的,流动相就是载体,将物质带到固定相里并通过固定相的流体。在气相里就是栽气,在液相里

气相色谱法中-什么是保留时间

气相色谱法是一种色谱分析法,色谱分析是利用样品承载于流动相中通过固定相,基于中不同组分在固定相中的滞留(保留)行为不同,而产生分离的分析方法。气相色谱的流动相为气体,所以叫气相色谱仪。保留时间就是样品中该种组分在固定相中的通过时间。样品通过进样器进入到色谱系统中,通过分流口,进入色谱柱,在色谱柱中受

时间分辨荧光免疫分析法的分析原理

普通物质荧光光谱分为激发光谱和发射光谱,在选择荧光物质作为标记物时,必须考虑激发光谱和发射光谱之间的波长差,即Stokes位移的大小。如果Stokes位移小,激发光谱和发射光谱常有重叠,相互干扰,影响检测结果的准确性。镧系元素的荧光光谱有较大的Stokes位移,最大可达290nm,激发光谱和发射光谱

时间分辨荧光免疫分析法的主要应用

1.激素:甲状腺激素、甾体类激素。2.病毒性肝炎标志物。3.肿瘤相关抗原、胃蛋白酶原(PG)。4.药物。5.多肽类。

气相色谱法中什么是保留时间

气相色谱法是一种色谱分析法,色谱分析是利用样品承载于流动相中通过固定相,基于中不同组分在固定相中的滞留(保留)行为不同,而产生分离的分析方法。气相色谱的流动相为气体,所以叫气相色谱仪。保留时间就是样品中该种组分在固定相中的通过时间。样品通过进样器进入到色谱系统中,通过分流口,进入色谱柱,在色谱柱中受

高效液相法影响出峰时间的因素

首先是柱子类型(包括填料类型,粒径,柱内径,柱长等);其次是流动相配比(包括不同极性流动相及其配比);流速;柱温等。在柱子一定的条件下,同一物质(假设为C18柱),流动相中有机相比例越高出峰时间越早,流速越快出峰时间越早(一般流速固定),柱温一般影响不大。

气相色谱法中什么是保留时间

气相色谱法是一种色谱分析法,色谱分析是利用样品承载于流动相中通过固定相,基于中不同组分在固定相中的滞留(保留)行为不同,而产生分离的分析方法。气相色谱的流动相为气体,所以叫气相色谱仪。保留时间就是样品中该种组分在固定相中的通过时间。样品通过进样器进入到色谱系统中,通过分流口,进入色谱柱,在色谱柱中受

气相色谱法中什么是保留时间

保留时间就是样品在柱中停留的时间,也就是出峰的时间。同一样品保留时间相同,保留时间不同,样品肯定不同,保留时间相同,样品可能相同。气相色谱原理:1、气相色谱分析主要是以气体作为其流动相,使用微量注射器将样品准确注入进样器。2、被汽化后的待测样品被流动相也就是载气携带进入毛细管色谱柱或填充柱,由于待测

气相色谱法中-什么是保留时间

保留时间就是样品在柱中停留的时间,也就是出峰的时间。同一样品保留时间相同,保留时间不同,样品肯定不同,保留时间相同,样品可能相同。

多功能酶标仪时间分辨荧光法参数简介

  时间分辨荧光法(TRF)  1)波长范围 280~850nm,单色器递增量1nm。  2)数据采集可调  3)测读次数:1~100flashes,  4)测读延迟:0~600usec。  5)读取数据积分时间:50~1500usec。  6)发射光带宽:9nm。  7)激发光带宽:15nm。  

高效液相法影响出峰时间的因素

首先是柱子类型(包括填料类型,粒径,柱内径,柱长等);其次是流动相配比(包括不同极性流动相及其配比);流速;柱温等。在柱子一定的条件下,同一物质(假设为C18柱),流动相中有机相比例越高出峰时间越早,流速越快出峰时间越早(一般流速固定),柱温一般影响不大。

气相色谱法中-什么是保留时间

保留时间就是样品在柱中停留的时间,也就是出峰的时间。同一样品保留时间相同,保留时间不同,样品肯定不同,保留时间相同,样品可能相同。气相色谱原理:1、气相色谱分析主要是以气体作为其流动相,使用微量注射器将样品准确注入进样器。2、被汽化后的待测样品被流动相也就是载气携带进入毛细管色谱柱或填充柱,由于待测

高效液相法影响出峰时间的因素

首先是柱子类型(包括填料类型,粒径,柱内径,柱长等);其次是流动相配比(包括不同极性流动相及其配比);流速;柱温等。在柱子一定的条件下,同一物质(假设为C18柱),流动相中有机相比例越高出峰时间越早,流速越快出峰时间越早(一般流速固定),柱温一般影响不大。

实验室分析方法气相色谱法的术语死时间、保留时间

从进样到惰性气体峰出现极大值的时间称为死时间,以td表示。从进样到出现色谱峰最高值所需的时间称保留时间,以tr表示。

细胞常用固定剂和固定方法

培养细胞常用固定剂有4%多聚甲醛磷酸缓冲液、丙酮、甲醇和95%乙醇。在固定之前需用37℃预热的PBS轻洗细胞。1.4%多聚甲醛磷酸缓冲液 固定10—20分钟,干燥。2.甲醇 10‰甲醇固定5—20分钟,自然干燥。3.丙酮 4℃冷丙酮固定组织穿透性和脱水性强,抗原保存好,很少用于组织切片,常用于培养细

细胞介导细胞毒作用检测法4:时间分辩荧光分析法

时间分辩荧光分析法1)铕荧光检测法标记靶细胞1.EuCl3的制备:称取58.08mg Eu2O3,用少量1N HCl搅拌至溶解,再用1N NaOH调节pH至4.0。加双蒸水配成33~100mmol/L的保存液,4℃保存备用。2.用预冷的标记液将靶细胞浓度调整到5×106/ml,加50μl 10mg/

等电聚焦水平板电泳法的固定和染色的介绍

  一、固定和染色  (1)试剂  a. 固定液 20%三氯醋酸  b. 染色液 i) 染色储备液 称取1.0gG-250,溶于20ml水中,为溶液1;称取125g(NH4)2SO4,溶于400ml水中,为溶液2;称取20g H3PO4,为溶液3;将溶液3加入到溶液1中,待G-250完全溶解后 ,与

D阿洛酮糖生物酶法生产及酶固定化载体

#D-阿洛酮糖生物酶法生产及酶固定化载体 酶的固定化技术是指将天然的游离酶限定在一定空间内或完全附着在某固态结构上而不能自由移动的一种生物技术,是一种常用、有效、便捷的生物酶修饰手段,对酶的催化活性和操作稳定性具有极大的改善和提升。固定化技术对生物酶的改造效果受多方面因素的影响,如固定化载体、反应介

组织固定

一、固定的目的和意义活体组织一旦停止血液循环和物质代谢就会因物质代谢障碍产生一系列的生物化学和组织化学改变,并导致形态学上可见的细胞器变化和细胞组织的形态改变直至腐 败自溶。固定的目的就是要通过使用化学和物理的方法,尽可能地保存组织细胞离体时具有的生理和病理形态结构及生物化学和免疫化学成分。良好

色谱固定相(固定液)的相关介绍

  色谱柱是色谱的心脏,样品的分离是在色谱柱上完成的。在色谱柱中不能移动而能起分离作用的物质称为固定相。固定相分两大类,一类是具有吸附性的多孔固体物质,也称为吸附剂;另一类是能起分离作用的液体物质称为固定液。固定液要涂渍在载体上常用的固体吸附固定相有吸附剂、高分子多孔小球和化学键合固定相。吸附剂中有

固定化细胞和固定化酶比较

固定化细胞:优点: 固定化细胞内酶的活性基本没有损失。缺点: 固定化细胞只能用于生产细胞外酶。固定化酶:优点:容易与水溶性反应物和产物分离。缺点: 一种酶只催化一种化学反应,而产物形成是通过一系列酶促反应得到的.

酶固定化技术固定化方法比较

 1 吸附法吸附法是利用物理吸附法,将酶固定在纤维素、琼脂糖等多糖类或多孔玻璃、离子交换树脂等载体上的固定方式。显著特点是:工艺简便及条件温和,包括无机、有机高分子材料,吸附过程可同时达到纯化和固定化;酶失活后可重新活化,载体也可再生。但要求载体的比表面积要求较大,有活泼的表面。2 包埋法包埋固定化