测定酶活性浓度测试——固定时间法

固定时间法(取样法、终点法、两点法)先让酶与底物在一定温度下作用一段固定的时间,然后停止酶反应,加入试剂进入化学反应呈色测出底物和产物的变化。用这类方法测酶活性浓度,必须保证酶和底物在所选定的温度下作用时间要很精确,否则将引起较大误差。该法最基本的一点是停止反应后才测定底物或产物的变化。......阅读全文

酶的包埋法固定化技术的简介

  包埋法(entrapment)是将酶包埋在高聚物的细微凝胶网格中或高分子半透膜内的固定化方法。  包埋法制备的固定化酶可防止酶渗出,底物需要渗入凝胶孔隙或半透膜内与酶接触。此法较为简便,固定化时一般不需要与酶蛋白的氨基酸残基起结合反应,酶分子本身不参加水不溶性凝胶或半透膜的形成,仅仅是被包围起来

病毒中和实验_固定病毒-稀释抗血清法

中和试验 (neutralization test)是在体外适当条件下孵育病毒与特异性抗体的混合物,使病毒与抗体相互反应,再将混合物接种到敏感的宿主体内,然后测定残存的病毒感染力的一种方法。凡是能与病毒结合,并使其失去感染力的抗体称为中和抗体。因为病毒要依赖于活的宿主系统复制增殖,因此,中和试验必须

病毒中和实验_固定抗血清-稀释病毒法

实验材料已知标准的抗病毒血清 (20抗体单位 0. 1 ml)试剂、试剂盒已知阴性血清 (56℃ 30 min 灭活)宿主:敏感细胞、敏感动物、鸡胚仪器、耗材细胞培养板水浴锅细胞培养箱实验步骤(以细胞培养为例):①用细胞维持液连续 10倍稀释病毒分离物10-1~10-8);②取 0. 6ml不同浓度

丙烯酰胺包埋法固定化酶实验

实验方法原理丙烯酰胺的聚合已经应用于聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),也应用于酶的包埋。长的聚合物链通过交联 N,N'-亚甲基二丙烯酰胺连接而成(图 1)。聚合反应是通过N,N,N',N'-四甲基乙二胺(TEMED)和过硫酸铵引发的。通过改变交联剂的数量,可以控制聚合物网孔尺寸

酶的包埋法固定化技术的微胶囊包埋法介绍

  微胶囊型包埋即将酶包埋在各种高聚物制成的半透膜微胶囊内的方法。常用于制造微胶囊的材料有聚胺、火棉胶、醋酸纤维素等。   用微胶囊型包埋法制得的微囊型固定化酶的直径通常为几微米到数百微米,胶囊孔径为几埃至数百埃,适合于小分子底物和产物的酶的固定化,如脲酶、天冬酰胺酶、尿酸酶、过氧化氢酶等。此法需

时间分辨荧光分析法(TRFIA)

时间分辨荧光分析法(Time resolved fluoroisnmunoassay,TRFIA)是近十年发展起来的一测微量分析方法,是目前最灵敏的微量分析技术,其灵敏度高达10-19,较放射免疫分析(RIA)高出3个数量级。  时间分辨荧光分析法(TRFIA)实际上是在荧光分析(FIA)的基础上发

时间分辨荧光分析法(TRFIA)

 时间分辨荧光分析法(Time resolved fluoroisnmunoassay,TRFIA)是近十年发展起来的一测微量分析方法,是目前最灵敏的微量分析技术,其灵敏度高达10-19,较放射免疫分析(RIA)高出3个数量级。  时间分辨荧光分析法(TRFIA)实际上是在荧光分析(FIA)的基础上

凝血时间测定的静脉采血法

静脉采血法:由于血液中较少的混入组织液,因此对内源凝血因子缺乏的第三性比毛细血管采血法要高。目前有3种检测法:(1)普通试管法:仅能Ⅷ:C水平

计时电流法和电流时间法有什么区别

计时电流法:是一种控制电位的分析方法,电位是控制的对象,电流是被测定的对象,记录的是i-t曲线.被控制的电位是有规律变化的.计时电流法是一大的类别,具体的分析方法包括:线形扫描,循环伏安法等等.电流 -时间曲线是一具体的分析方法,如果要将其分类,应该是分在恒电位分析中,在实验过程中在电极上施加一恒定

按固定相的几何形式分类色谱法

按固定相的几何形式分类柱色谱法(column chromatography)柱色谱法是将固定相装在一金属或玻璃柱中或是将固定相附着在毛细管内壁上做成色谱柱,试样从柱头到柱尾沿一个方向移动而进行分离的色谱法。·纸色谱法(paper chromatography)纸色谱法是利用滤纸作固定液的载体,把试样

色谱法按固定相的几何形式分离

柱色谱法是将固定相装在一金属或玻璃柱中或是将固定相附着在毛细管内壁上做成色谱柱,试样从柱头到柱尾沿一个方向移动而进行分离的色谱法。纸色谱法(paper chromatography)纸色谱法是利用滤纸作固定液的载体,把试样点在滤纸上,然后用溶剂展开,各组分在滤纸的不同位置以斑点形式显现,根据滤纸上斑

高效液相色谱法的固定相的分类

高效液相色谱法的固定相的分类 : (1)按固定相承受压力分:刚性固体:以二氧化硅为基质,可承受较高压力,表面可键合各种功能官能团---键合固定相,是目前应用最广泛的固定相。硬胶:主要用于离子交换色谱法和凝胶色谱法中,由聚苯乙烯与二乙烯基苯交联而成,可承受的压力较低。  (2)按孔隙深度分:表面多孔型

丙烯酰胺包埋法固定化酶实验2

实验方法原理丙烯酰胺的聚合已经应用于聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),也应用于酶的包埋。长的聚合物链通过交联 N,N'-亚甲基二丙烯酰胺连接而成(图 1)。聚合反应是通过N,N,N',N'-四甲基乙二胺(TEMED)和过硫酸铵引发的。通过改变交联剂的数量,可以控制聚合物网孔尺寸

色谱法关于保留时间的理论

  保留时间是样品从进入色谱柱到流出色谱柱所需要的时间,不同的物质在不同的色谱柱上以不同的流动相洗脱会有不同的保留时间,因此保留时间是色谱分析法比较重要的参数之一。  保留时间由物质在色谱中的分配系数决定:  tR = t0(1 + KVs / Vm)  式中tR表示某物质的保留时间,t0是色谱系统

如何缩短库伦法水分仪平衡时间

  (1)检查分子筛是否干燥(可加少许变色硅胶作指示) :更换分子筛(可再生, 160 -300℃ 24 小时以上)  (2)检查滴定杯是否干净(会吸附水分):将滴定杯拆下,清洗干净,干燥后再装配  (3)检查泵管是否有残留的溶剂:将残留的溶剂敲入滴定杯,进行预滴定  (4)检查滴定杯是否拧紧(潮湿

羊水细胞普通培养法和收获时间

羊水细胞普通培养法 1.一切操作均在严格无菌条件下进行,抽取羊水20~30ml,立即送往实验室。 2.将穿刺所得羊水离心(1500r/min)5分钟,而后在接种箱内吸出上清液留其他检查用,将剩下的0.5ml沉淀在管底的羊水细胞轻轻打匀,分别接种在两个盛有培养液的无菌培养瓶内,充分混匀,放入3

实验室分析方法色谱法-固定液定义和对固定液的要求

一般是一种高沸点的有机物的液膜,通过对不同组份的不同分子间的作用,使组份在色谱柱中得到分离。对气相色谱用的固定液,一般有如下几点要求:1.在操作温度下蒸气压低,热稳定性好,与被分析物理或载气不产生不可逆反应;2.在操作温度下呈液态,而且粘度愈低愈好。物质在高粘度的固定液中传质速度慢,柱效率因而降低。

色谱固定相(固定液)

色谱固定相(固定液)色谱柱是色谱的心脏,样品的分离是在色谱柱上完成的。在色谱柱中不能移动而能起分离作用的物质称为固定相。固定相分两大类,一类是具有吸附性的多孔固体物质,也称为吸附剂;另一类是能起分离作用的液体物质称为固定液。固定液要涂渍在载体上常用的固体吸附固定相有吸附剂、高分子多孔小球和化学键合固

色谱固定相(固定液)

色谱固定相(固定液)色谱柱是色谱的心脏,样品的分离是在色谱柱上完成的。在色谱柱中不能移动而能起分离作用的物质称为固定相。固定相分两大类,一类是具有吸附性的多孔固体物质,也称为吸附剂;另一类是能起分离作用的液体物质称为固定液。固定液要涂渍在载体上常用的固体吸附固定相有吸附剂、高分子多孔小球和化学键合固

色谱固定相(固定液)

色谱柱是色谱的心脏,样品的分离是在色谱柱上完成的。在色谱柱中不能移动而能起分离作用的物质称为固定相。固定相分两大类,一类是具有吸附性的多孔固体物质,也称为吸附剂;另一类是能起分离作用的液体物质称为固定液。固定液要涂渍在载体上。常用的固体吸附固定相有吸附剂、高分子多孔小球和化学键合固定相。吸附剂中有硅

微胶囊化尼龙珠法酶固定化实验

微胶囊化尼龙珠法             实验方法原理 实验材料 酶溶液

色谱法按固定相的几何形式分类介绍

  柱色谱法是将固定相装在一金属或玻璃柱中或是将固定相附着在毛细管内壁上做成色谱柱,试样从柱头到柱尾沿一个方向移动而进行分离的色谱法。  ·纸色谱法(paper chromatography)  纸色谱法是利用滤纸作固定液的载体,把试样点在滤纸上,然后用溶剂展开,各组分在滤纸的不同位置以斑点形式显现

微胶囊化尼龙珠法酶固定化实验

实验方法原理实验材料酶溶液试剂、试剂盒碳酸氢钠癸二酰二氯化合物溶液磷酸钾NaCl实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」相同体积的酶和 1,6-己烷溶液混合,为了尼龙珠子在形成的时候彼此不相互接触,癸二酰二氯化合物溶液用微量注射器缓慢注入混合液中。5 min 后,有机相被轻轻倒出,在有机溶液完全挥发后

微胶囊化尼龙珠法酶固定化实验

实验方法原理 实验材料 酶溶液试剂、试剂盒 碳酸氢钠癸二酰二氯化合物溶液磷酸钾NaCl实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」相同体积的酶和 1,6-己烷溶液混合,为了尼龙珠子在形成的时候彼此不相互接触,癸二酰二氯化合物溶液用微量注射器缓慢注入混合液中。5 min 后,有机相被轻轻倒出,在有

关于吸附色谱法的色谱固定相的介绍

  液固色谱法采用的固体吸附剂按其性质可分为极性和非极性两种类型。极性吸附剂包括硅胶、氧化铝、氧化镁、硅酸镁、分子筛及聚酰胺等。非极性吸附剂最常见的是活性炭。  极性吸附剂可进一步分为酸性吸附剂和碱性吸附剂。酸性吸附剂包括硅胶和硅酸镁等,碱性吸附剂有氧化铝、氧化镁和聚酰胺等。酸性吸附剂适于分离碱,如

细胞凋亡有没有时长从更新到凋亡有没有固定时间

每个物种的细胞存活时间是不同的,而且同一个生命体的不同种细胞的存活时间也是不同的,比如人小肠的上皮细胞更新周期约为3-6天;胃内胃底腺的颈粘液细胞寿命约1周,但主细胞和壁细胞的寿命则长达200天。血细胞中,红细胞寿命是120天,但白细胞就只有几天。正常表皮细胞的更新时间平均为28天。

液相色谱中流动相、固定相和保留时间的关系是怎样

一般极性大的样品用反相色谱柱,流动相极性大于固定相极性,样品极性越小,保留时间越长。极性小的样品用正相色谱柱,流动相极性小于固定相极性,样品极性越大,保留时间越长。当然如果有其它保留机理,如氢键等,波流时间会变化。固定相不同保留能力会有不同,如C8的保留能力弱于C18。流动相根据不同的溶解能力、极性

色谱法中保留时间越长越好吗

不是的。这要具体情况具体分析。分析要考虑多方面因素:1,快速分析,就是时间问题。你如果一个样品运行两三个小时,那太影响效率了。2,准确度。样品保保留时间越短越不利于分离,但时间越长,样品在柱子里扩散越严重,越容易影响分析结果。3,成本。不只是上面说的时间成本,还要考虑人力成本,还有试剂,用电,仪器损

色谱法中保留时间越长越好吗

不是的。这要具体情况具体分析。分析要考虑多方面因素:1,快速分析,就是时间问题。你如果一个样品运行两三个小时,那太影响效率了。2,准确度。样品保保留时间越短越不利于分离,但时间越长,样品在柱子里扩散越严重,越容易影响分析结果。3,成本。不只是上面说的时间成本,还要考虑人力成本,还有试剂,用电,仪器损

色谱法中保留时间越长越好吗

不是的。这要具体情况具体分析。分析要考虑多方面因素:1,快速分析,就是时间问题。你如果一个样品运行两三个小时,那太影响效率了。2,准确度。样品保保留时间越短越不利于分离,但时间越长,样品在柱子里扩散越严重,越容易影响分析结果。3,成本。不只是上面说的时间成本,还要考虑人力成本,还有试剂,用电,仪器损