凝胶电泳常见问题分析
要跑琼脂糖凝胶电泳， 5ng 就能很清楚的跑出来是这样吗？能够照相的清楚的条带，至少需要多少量呢？ 参考见解：5ng 已经可以了，但是或许20ng50ng-200ng效果好，在此范围内呈线性。 把210bp的pcr产物进行酶切,得到190+20bp的两个片段,请问能用琼脂糖凝胶电泳检测酶切结果吗?用多大浓度的胶和多大的电压呢? 参考见解：可以用琼脂糖凝胶电泳分开,电压不变,可用1.5%到2%的胶,20bp得片断不一定能看得到,所以应用未酶切的PCR片断作对照. 琼脂糖浓度（W/V） 大小范围（bp） 0.6% 1000-23000 0.8% 800-10000 1.0% 400-8000 1.2% 300-7000 1.5% 200-4000 2% 100-3000 丙烯酰胺凝胶电泳更适合于分离纯化小分子量核酸（5-500bp）并且分辨率高，可以达到1个bp。所以建议进行丙烯酰胺......阅读全文
凝胶电泳常见问题分析
要跑琼脂糖凝胶电泳， 5ng 就能很清楚的跑出来是这样吗？能够照相的清楚的条带，至少需要多少量呢？ 参考见解：5ng 已经可以了，但是或许20ng50ng-200ng效果好，在此范围内呈线性。 把210bp的pcr产物进行酶切,得到190+20bp的两个片段,请问能用琼脂糖凝
凝胶电泳常见问题分析
要跑琼脂糖凝胶电泳， 5ng 就能很清楚的跑出来是这样吗？能够照相的清楚的条带，至少需要多少量呢？参考见解：5ng 已经可以了，但是或许20ng50ng-200ng效果好，在此范围内呈线性。把210bp的pcr产物进行酶切,得到190+20bp的两个片段,请问能用琼脂糖凝胶电泳检测酶切结果吗?用多大
凝胶电泳常见问题分析
1、要跑琼脂糖凝胶电泳，5ng就能很清楚的跑出来，是这样吗？能够照相的清楚的条带，至少需要多少量呢？ 参考见解 ： 5ng已经可以了，但是或许20ng～200ng效果好，在此范围内呈线性。 2、把210bp的PCR产物进行酶切，
凝胶电泳（gel－electrophoresis）常见问题分析
琼脂糖凝胶电泳检测DNA时,跑出的带后面出现拖尾现象,什么原因造成的?参考见解： DNA带模糊：1、 DNA降解??避免核酸酶污染。2、 DNA上样量过多??减少凝胶中DNA上样量。3、 所用电泳条件不合适??电泳时电压不应超过20V/cm，温度＜30℃,巨大DNA链，温度应＜15℃，核查所用电泳缓
双向凝胶电泳实验常见问题分析
(1)低拷贝蛋白的鉴定。人体的微量蛋白往往还是重要的调节蛋白。除增加双向凝胶电泳灵敏度的方法外，最有希望的还是把介质辅助的激光解吸/离子化质谱用到PVDF膜上，但当前的技术还不足以检出拷贝数低于1000的蛋白质。(2)极酸或极碱蛋白的分离。(3)极大（>200kD）或极小（
琼脂糖凝胶电泳常见问题
琼脂糖凝胶电泳是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。对于分子量较大的样品，如大分子核酸、病毒等，一般可采用孔径较大的琼脂糖凝胶进行电泳分离。琼脂糖凝胶电泳常见为题都有哪些？、一、DNA带模糊、1、DNA降解：琼脂糖凝胶电泳试验中要避免核酸酶污染2、电泳缓冲液陈旧：电泳缓冲液多系使用后，离子强度
琼脂糖凝胶电泳常见问题
琼脂糖凝胶电泳是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。对于分子量较大的样品，如大分子核酸、病毒等，一般可采用孔径较大的琼脂糖凝胶进行电泳分离。琼脂糖凝胶电泳常见为题都有哪些？DNA带模糊DNA降解：琼脂糖凝胶电泳试验中要避免核酸酶污染电泳缓冲液陈旧：电泳缓冲液多系使用后，离子强度降解，PH值上升，
琼脂糖凝胶电泳常见问题有哪些
琼脂糖凝胶电泳是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。对于分子量较大的样品，如大分子核酸、病毒等，一般可采用孔径较大的琼脂糖凝胶进行电泳分离。琼脂糖凝胶电泳常见为题都有哪些？DNA带模糊DNA降解：琼脂糖凝胶电泳试验中要避免核酸酶污染电泳缓冲液陈旧：电泳缓冲液多系使用后，离子强度降解，PH值上升，
琼脂糖凝胶电泳常见问题有哪些
琼脂糖凝胶电泳是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。对于分子量较大的样品，如大分子核酸、病毒等，一般可采用孔径较大的琼脂糖凝胶进行电泳分离。琼脂糖凝胶电泳常见为题都有哪些？DNA带模糊DNA降解：琼脂糖凝胶电泳试验中要避免核酸酶污染电泳缓冲液陈旧：电泳缓冲液多系使用后，离子强度降解，PH值上升，
SDSPAGE凝胶电泳常见问题及其解决方案
SDS-PAGE凝胶电泳常见问题及其解决方案
琼脂糖凝胶电泳常见问题与解决办法
一、凝胶制备1. 微波炉溶解琼脂糖时，胶液沸腾冲溢出三角锥瓶微波炉加热时胶液可能发生剧烈沸腾，（1）总液体量不宜超过三角锥瓶的50%容量。（2）2%以上胶液设置中火加热。（3）胶液剧烈沸腾时，停止加热，移开三角锥瓶，请戴上防热手套，小心摇动三角锥瓶，然后再次加热，胶液沸腾直至胶液清澈，保证琼脂糖完全
水质分析常见问题
15、测总磷，洗衣液稀释100倍，加热后水样变黄色，对测量结果有没有影响?答：消解后如果水样没有颜色，则不干扰实验结果。水中有颜色的物质会在消解时被消解成无色的，不影响测量结果。16、连华5B-3F水质测定仪如何恢复出厂设置?答：仪器在关闭的状态，一手按住“校正”键，一手打开开关，待屏幕上显示“99
水质分析常见问题
11、请问定量器为什么吸不起来?答：定量器内有两个玻璃柱，吸液时弯头附近玻璃柱会将底部封死，溶液会吸上来;排液时下面玻璃柱会将底部封死让溶液从弯头排出。两个玻璃柱相当于两个单向阀。新定量器使用时吸不上来就是弯头附近玻璃柱底部没完全密封，可用手指轻弹几下或用洗耳球将溶液吸到弯头玻璃柱处就可以了。12、
水质分析常见问题
26、配总磷过硫酸钾，由于不好溶，加塞子水浴加热到了10秒左右，塞子不是很紧，过硫酸钾还能使用吗?答：如果进水不建议使用，可以做标准溶液试一试。过硫酸钾不好溶可以多搅拌或超声，不建议加热，控制不好温度过高后会导致过硫酸钾失效。另过硫酸钾最佳保存温度25-30℃，冷藏容易结晶。27、用3B做甲醛之前做
水质分析常见问题
05、做总磷实验时，过硫酸钾结晶了，影响检测结果吗，该怎么解决?答：过硫酸钾配制时较难溶解，使用超声波帮助其溶解。如果没有超声波，尤其是冬季室温较低，可以加热使其溶解(温度不能超过60℃，否则过硫酸钾会分解)，放冷后会有析出，因为溶液为过饱和，再加热溶解是可以使用的，不影响总磷的测定。06、请问在做
水质分析常见问题
13、请问做氨氮实验时，为什么加入N3试剂出现大量白色浑浊，加入N2试剂后下层红色上层青色不断有小气泡上升?答：钙镁离子高，应做絮凝沉淀预处理。水样带色或浑浊以及含其他一些干扰物质，影响氨氮的测定。因此，在分析时需做适当的处理。对较清洁的水，可采用絮凝沉淀发;对污染严重的水或工业废水，则用蒸馏法消除
水质分析常见问题
24、测定cod用密封管消解行不行?答：可以的，但是建议使用敞口管消解。密封消解时如果密封盖没有拧紧，在颠倒摇匀的时候，可能会让溶液洒出，导致测值结果不准，甚至可能会造成人身伤害;部分水样在消解时会释放大量的气体，此种水样不可密封消解，如水里的次氯酸根太高，消解时会释放出大量氯气，密封消解会导致消解
水质分析常见问题
水质分析常见问题水质分析又称水化学分析。即用化学和物理方法测定水中各种化学成分的含量。水质分析过程中常见的问题有哪些呢？01、BOD缓冲剂液化了还能用吗?答：BOD缓冲剂时间稍长后会出现液化的现象，这是正常情况，不影响使用。02、我们测氨氮，是以氮元素计还是以铵根离子计?答:氨氮是指水中以游离氨和铵
水质分析常见问题
19、含氯酸钠废水COD如何检测?答：含氯酸钠废水的COD检测水样的原水COD很高，用户使用了氯酸钠来处理，氯酸钠具有氧化性，能降低COD，但这种废水，使用正常方法无法检测，经过查找资料及连华技术人员的建议，我们进行了方法测试，找到解决方案。1)取2.5ml水样，加入4.8ml的E试剂，注意速度不要
芯片常见问题分析
1 芯片实验和定量PCR的优劣比较? 基因表达谱芯片实验可以对大量基因一次性进行定量研究,定量PCR则对大量基因需逐一进行定量研究。 2 在芯片制作过程中的PCR原液是否可以为客户保存? 可以抽干冷冻保存一年。 3 可否用DNA和芯片杂交? 不可以，因为芯片上的样品是cDNA而真核基因D
eds分析常见问题
Q1:能谱的缩写是EDS还是EDX？ 开始的时候能谱的缩写有很多，比如EDS，EDX，EDAX等。ED就是Energy Dispersive，后面因为X-ray Analysis和Spectrum这几个词的不同用法，导致了缩写的不同。而且相应的汉译也有很多，比如能量色散谱，能量散射谱等等。不过
水质分析常见问题
08、请问BOD营养盐有黄色不溶物正常吗?答：正常，营养盐配好是淡黄色不完全溶解的溶液，用前需摇匀。09、请问N2试剂前一天配出来没什么问题，为什么放一天后变棕黄色变浑?答：N2试剂配好后应转移到聚乙烯瓶中密封、避光、低温储存。如果放到矿泉水瓶内，时间稍长会出现变质。如果未密封保存，空气中的有机气体
水质分析常见问题
24、测定cod用密封管消解行不行?答：可以的，但是建议使用敞口管消解。密封消解时如果密封盖没有拧紧，在颠倒摇匀的时候，可能会让溶液洒出，导致测值结果不准，甚至可能会造成人身伤害;部分水样在消解时会释放大量的气体，此种水样不可密封消解，如水里的次氯酸根太高，消解时会释放出大量氯气，密封消解会导致消解
水质分析常见问题
21、BOD缓冲剂液化还能用吗?答：BOD缓冲剂时间稍长后会出现液化的现象，这是正常情况，不影响使用。22、仪器测总氮时空白和标液正常，测水样显示(9999)什么原因?答：仪器测标样没问题，仪器一般不会有问题，可能是水样浓度太高需要稀释，总氮直测范围0.05-10mg/L，275nm波长下的吸光度尽
聚丙烯酰氨凝胶电泳常见问题及解决方案
常见问题及解决方案问题原因解决方案①出现“微笑”形带（两边翘起中间凹下）由于凝胶的中间部分凝固不均匀所致，多出现于较厚的凝胶中待其充分凝固再作后续实验②出现“皱眉”形带（两边向下中间鼓起）主要出现在蛋白质垂直电泳槽中，一般是两板之间的底部间隙气泡未排除干净可在两板间加入适量缓冲液，以排除气泡③带出现
PCR克隆常见问题分析
1、克隆PCR产物的最优条件是什么？ 最佳插入片段：载体比需实验确定。1:1（插入片段:载体）常为最佳比，摩尔数比1:8或8:1也行。应测定比值范围。连接用5ul 2X连接液, 50ng质粒DNA,1Weiss单位的T4连接酶，插入片段共10ul。室温保温1小时，或4℃过夜。在
TA克隆常见问题分析
现象可能原因解决方案 转化后无菌落生长 感受态细胞已经失效用pUC18质粒进行转化，确认细胞的感受态效率。1ng pUC18质粒至少应得到1000个以上的转化子。如有问题，重新制备感受态细胞。 平板所用抗性不对pBS-T载体为amp抗性，工作浓度 100 ug/ml 连接中使用了不恰当的vector
QPCR常见问题及其分析
一般来讲，进行real-time qPCR MasterMix都是2×的浓缩液，只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR灵敏度高，所以每个样品至少要做3个平行孔，以防在后面的数据分析中，由于Ct相差较多或者SD太大，无法进行统计分析。通常来讲，反应体系的引物终浓度为10
QPCR常见问题及其分析
一般来讲，进行real-time qPCR MasterMix都是2×的浓缩液，只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR灵敏度高，所以每个样品至少要做3个平行孔，以防在后面的数据分析中，由于Ct相差较多或者SD太大，无法进行统计分析。通常来讲，反应体系的引物终浓度为100-400
QPCR常见问题及其分析
一般来讲，进行real-time qPCR MasterMix都是2×的浓缩液，只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR灵敏度高，所以每个样品至少要做3个平行孔，以防在后面的数据分析中，由于Ct相差较多或者SD太大，无法进行统计分析。通常来讲，反应体系的引物终浓