酶测定中底物浓度的影响有哪些?

在检测试剂中底物浓度、辅因子、活化剂、复构剂的种类和浓度均对酶的测定至关重要。其中以底物的种类和浓度最为重要。底物浓度影响遵循米氏方程:ν=V[S]/Km+[S]当底物浓度远远小于Km,增加底物浓度,反应速度增加。当底物[S]>>Km时,公式近似为ν=V,反应速度不再增加,故此时反应速度为最大反应V。从理论上说只有测定的是酶最大反应V,反应速度才和酶量成正比。(1)底物的种类若所测的酶专一性不强,可作用于多种底物,Km最小的底物往往是此酶的生理底物。(Km表示酶和底物的亲和力,Km越小亲和力越大)如该酶测定主要用于临床诊断工作,首先应考虑有效诊断价值的底物。选择Km小的底物测定酶活性,在最大反应速度时底物浓度也将最低。这意味着试剂成本可能较低,不易出现底物难溶解的困难。(2)选择底物的合适浓度确定底物种类后,重要的是选择底物的合适浓度。米氏方程在选择酶测定底物浓度有着重要的指导作用。计算出某一酶的Km后就可以计算出不同底物浓度和......阅读全文

水质COD浓度高对环境和人体有哪些影响

   COD是化学需氧量的代号,是指在强酸并加热(使用标准COD消解器)的条件下,用重铬酸钾作为氧化剂处理水样时所消化的氧化剂的量,以氧的mg/L来表示。COD反映了水中受还原性物质污染的程度,水中的还原性物质包括有机物(为主)、亚硝酸盐、硫化物、亚铁盐等。因此,化学需氧量(COD)又往往作为衡量水

真核生物中典型的呼吸酶及其底物

真核生物中典型的呼吸酶及其底物呼吸酶氧化还原对中点电位(伏)NADH脱氢酶NAD/NADH−0.32琥珀酸脱氢酶FMN或FAD/ FMNH2或FADH2−0.20细胞色素bc1复合体辅酶Q10ox/ 辅酶Q10red+0.06细胞色素bc1复合体细胞色素box/ 细胞色素bred+0.12复合体IV

酶活性测定的常见方法有哪些?

  (1)定时法:(两点法)  通过测定酶反应开始后某一时间段内(t1到t2)产物或底物浓度的总变化量来求取酶反应初速度的方法。其中t1往往取反应开始的时间。  酶与底物在一定温度下作用一段固定的时间,通过加入强酸、强碱、蛋白沉淀剂等,使反应完全停止(也叫中止反应法)。加入试剂进入化学反应呈色测出底

酶浓度对酶促反应速度的影响

  从米门公式和酶浓度与酶促反应速度的关系图解可以看出[1]:酶促反应速度与酶分子的浓度成正比。当底物分子浓度足够时,酶分子越多,底物转化的速度越快。但事实上,当酶浓度很高时,并不保持这种关系,曲线逐渐趋向平缓。根据分析,这可能是高浓度的底物夹带有许多的抑制剂所致。

酶免疫技术中酶和酶作用底物是怎么样的呢?

  酶和酶作用底物  (一)酶的要求:  一个酶蛋白分子每分钟可催化10 3 ~10 4 个底物分子转变成有色产物。用于标记的酶应符合:  1.酶的活性要强,催化反应的转化率高,纯度高。  2.酶催化底物后产生的产物易于判断或测量,方法简单易行、敏感和重复性好。  3.作用专一性强 ,酶活性不受样品

酶免疫技术酶与底物

酶结合物是酶与抗原或者抗体、半抗原在交联剂作用下联结的产物,是 ELISA 成败的关键试剂。它不仅具有抗原抗体的特异性反应,还具有酶促反应的特性,最终产生生物放大的特性。酶免疫反应中,最常用的酶是辣根过氧化物酶,HRP的催化反应需要底物过氧化氢(H2O2)和供氢体(DH2)。供氢体多为无色的还原型染

食品中铝的测定方法有哪些

食品中铝含量属于微量测定,统一品牌同一批次不同的样品每次测得的结果都不同,甚至相同的样品两次的顶的结果都不同。这个没有固定数值的吧。

酶浓度的调节方式有几种?

酶浓度的调节主要有两种方式,一种是诱导或抑制剂的合成;一种是调节酶的降解。

解离酶浓度过高或过低会对细胞产生哪些影响?

解离酶浓度过高或过低可能会对细胞产生以下影响:解离酶浓度过高:细胞损伤可能导致细胞膜破裂,细胞内容物泄漏,影响细胞的完整性和功能。过度消化细胞表面的蛋白质和受体,改变细胞的表面特性和信号传导能力。细胞活力下降对细胞造成较大的化学应激,导致细胞凋亡或死亡,从而降低细胞的活力和存活率。RNA 和蛋白质降

底物浓度对催化反应速度的影响及米氏常数Km

二硝基水杨酸法             实验方法原理 根据Michaelis-Menten 方程:     可以得到Lineweaver-Burk 双倒数值线方程:     在

真核生物中典型的呼吸酶及其底物介绍

真核生物中典型的呼吸酶及其底物呼吸酶氧化还原对中点电位(伏)NADH脱氢酶NAD/NADH−0.32琥珀酸脱氢酶FMN或FAD/ FMNH2或FADH2−0.20细胞色素bc1复合体辅酶Q10ox/ 辅酶Q10red+0.06细胞色素bc1复合体细胞色素box/ 细胞色素bred+0.12复合体IV

均相酶免疫测定的种类有哪些

  1.酶增强免疫测定技术(EMIT):EMIT的基本原理是半抗原与酶结合成酶标半抗原,保留半抗原和酶的活性。当酶标半抗原与抗体结合后,所标的酶与抗体密切接触,使酶的活性中心受到影响而活性被抑制。反应后酶活力大小与标本中的半抗原量呈一定的比例,从酶活力的测定结果就可推算出标本中半抗原的量。  2.克

影响血钾浓度的因素有哪些?

①钾在细胞内外的移动各种原因钾自细胞内移到细胞外液时,血钾浓度会增高。细胞外液的钾进入细胞内时血钾浓度会降低。②细胞外液的浓缩与稀释细胞外液被稀释时,血钾浓度降低。细胞外液浓缩时血钾浓度会增高。③钾总量过多或过少,如钾总量过多,血钾会过高。④缺钾则伴有低血钾。⑤当细胞外液的钾大量进入细胞内或血浆受到

测定尿胰蛋白酶有哪些意义?

(1)胰蛋白酶原的分子量比较小(25kd),很容易由肾小球滤出,但是肾小管对胰蛋白酶原-2的回吸收低于胰蛋白酶原-1,尿中前者的浓度较大。(2)在急性胰腺炎时尿中胰蛋白酶原-2的浓度明显升高。有报道急性胰腺炎时尿胰蛋白酶原-2的特异性为95%,敏感性为94%,说明其优于淀粉酶,是一个比较敏感而特异的

木聚糖酶酶活测定方法有哪些

对酶制剂中各种酶活性进行定量分析具有重要意义。首先,它是酶制剂和饲料产品质量检测的依据。酶制剂是生命活性物质,其活性随饲料的加工保存时间与条件以及饲料中其它成分的变化而变化,因此应对各个生产环节添加酶制剂的实际效价进行检测。其次,准确的酶活检测方法也是根据饲料中NSP含量和组成来合理调整添加酶的种类

模板的浓度对PCR有什么影响

pcr的灵敏度很高,几pg的DNA就能检测出来了。一般用pcr产物或者质粒做模板,只需要1ng左右就可以了,如果是基因组或者cDNA做模板,模板量可适当增加。

淀粉酶活力测定实验中有哪些影响因素

  1.反应速度  大多数酶促反应是可逆反应,其速度既受底物浓度的影响,也受产物生成量的影响。当底物浓度较高时,在反应的初期,其浓度变化甚微,产物生成量也很少,此时反应速度可看作是恒定的。酶反应动力学中所指速度就是反应的初速度。  2.底物浓度  米氏方程ν=νmax[S]/Km+[S]是反映酶促反

常用于焙烤食品中酶有哪些?

淀粉酶、B一淀粉酶、葡萄糖氧化酶、蛋白酶、半纤维素酶、巯基氧化酶和脂肪氧化酶等,最常用于面包改良剂的为 一淀粉酶和蛋白酶。 一淀粉酶是在面粉自身的 一淀粉酶活力低时添加,提高面粉的烘烤品质。它可使面团在醒发时连续不断地生成糊精和麦芽糖,继而转化为葡萄糖,作为发酵时酵母的来源。另外还可以改善操作性能,

油中水分常用的测定方法有哪些

水分测量方法油品中水分测定方法主要分为现场测定法、在线测定法和实验室测定法。现场测定法视觉检测法 爆裂试验法 氢化钙实验法在线测定法传感器可以测量石油产品的温度和相对饱和水含量,传感器种类很多,主要有水分传感器、光学传感器。水分传感器随着水的浓度的增加或减少,装置的电容也随之发生变化,通过将水分含量

测定食品中脂肪含量的方法有哪些

食品中脂肪含量的测定的五种方法:1、 索氏提取法2、 酸水解法3、 罗紫-哥特里法4、 巴布科克法5、 氯仿-甲醇提取法

测定食品中脂肪含量的方法有哪些

食品中脂肪含量的测定的五种方法:1、 索氏提取法2、 酸水解法3、 罗紫-哥特里法4、 巴布科克法5、 氯仿-甲醇提取法

油中水分常用的测定方法有哪些

水分测量方法油品中水分测定方法主要分为现场测定法、在线测定法和实验室测定法。现场测定法视觉检测法 爆裂试验法 氢化钙实验法在线测定法传感器可以测量石油产品的温度和相对饱和水含量,传感器种类很多,主要有水分传感器、光学传感器。水分传感器随着水的浓度的增加或减少,装置的电容也随之发生变化,通过将水分含量

测定食品中脂肪含量的方法有哪些

食品中脂肪含量的测定的五种方法:1、 索氏提取法2、 酸水解法3、 罗紫-哥特里法4、 巴布科克法5、 氯仿-甲醇提取法

临床上需测定药物浓度进行监测的主要药物有哪些

(1)强心苷类:毒毛花苷K、去乙酰毛花苷(西地兰)、地高辛和洋地黄毒苷。(2)抗癫痫药类:苯妥英、苯巴比妥、卡马西平、乙琥胺、丙戊酸钠等。(3)治疗情感性精神障碍药:丙米嗪类、去甲替林、阿米替林、多虑平、碳酸锂等。(4)氨基苷类抗生素:链霉素、庆大霉素、妥布霉素、卡那霉素、丁胺卡拉霉素等。(5)免疫

底物浓度对催化反应速度的影响-_二硝基水杨酸法

实验方法原理根据Michaelis-Menten 方程:  可以得到Lineweaver-Burk 双倒数值线方程:  在 1/ V 纵轴上的截距是1/ Vmax , 在1/ [ S ] 横轴上的截距是- 1/ Km 。 测定Km 和Vmax , 特别是测定Km , 是酶学研究的基本内容之一, Km

麻纺织行业中的应用的酶有哪些?

麻类纤维主要成分为纤维素,与棉纤维同属于天然纤维素纤维,所不同的是麻纤维的非纤维素成分(统称胶质)含量高。胶质内又含有半纤维素、果胶、木质素等多种物质,纺织用麻纤维即是指从原麻中脱去部分或几乎全部胶质而分离出纤维。因此,决定在麻纺织品加工过程中目前可以利用的生物酶有果胶酶、半纤维素酶、纤维素酶、木质

​ELISA测定试剂盒操作技术的影响有哪些?

ELISA测定试剂盒误差的方法:做实验时少说话,防止唾液掉进酶标条中。2.加入一抗二抗需要放入37°。3.如果同时做多个板子,多个板子别罗一起;尽量少用排枪。4.加样时,由低浓度向高浓度加,这样减少跳孔的几率。5.勤换枪头。一、移液器的使用,加样(抗体)等需要准确定量的试剂时不使用排枪,经验证明排枪

色谱柱长对测定结果的影响有哪些

现在色谱柱的柱效比以前的高很多了,用短柱就能满足分离度的要求,就没必要用长柱,短柱快速啊,省溶剂又省时间。不是柱越长越好,这需要流动相的线速度和柱子的长度以达到平衡才行,如果仅是柱子增长,到一定程度所造成的峰扩展将严重影响灵敏度和柱效(溶剂不变的情况下),这反而造成不好的影响。而一般情况下,随柱子长

色谱柱长对测定结果的影响有哪些

现在色谱柱的柱效比以前的高很多了,用短柱就能满足分离度的要求,就没必要用长柱,短柱快速啊,省溶剂又省时间。不是柱越长越好,这需要流动相的线速度和柱子的长度以达到平衡才行,如果仅是柱子增长,到一定程度所造成的峰扩展将严重影响灵敏度和柱效(溶剂不变的情况下),这反而造成不好的影响。而一般情况下,随柱子长

色谱柱长对测定结果的影响有哪些

现在色谱柱的柱效比以前的高很多了,用短柱就能满足分离度的要求,就没必要用长柱,短柱快速啊,省溶剂又省时间。不是柱越长越好,这需要流动相的线速度和柱子的长度以达到平衡才行,如果仅是柱子增长,到一定程度所造成的峰扩展将严重影响灵敏度和柱效(溶剂不变的情况下),这反而造成不好的影响。而一般情况下,随柱子长