底物浓度对催化反应速度的影响_二硝基水杨酸法
实验方法原理根据Michaelis-Menten 方程: 可以得到Lineweaver-Burk 双倒数值线方程: 在 1/ V 纵轴上的截距是1/ Vmax , 在1/ [ S ] 横轴上的截距是- 1/ Km 。 测定Km 和Vmax , 特别是测定Km , 是酶学研究的基本内容之一, Km 是酶的一个基本的特性常数, 它包含着酶与底物结合和解离的性质, 特别是同一种酶能够作用于几种不同的底物时,米氏常数Km 往往可以反映出酶与各种底物的亲和力强弱, Km值越大, 说明酶与底物的亲和力越弱, 反之, Km 值越小, 酶与底物的亲和力越强。 双倒数作图法应用最广泛, 其优点是: ① 可以精确地测定Km 和Vmax ; ② 根据是否偏离线性很容易看出反应是否违反Michaelis-Menten 动力学; ③ 可以较容易地分析各种抑制剂的影响。此作法的缺点是实验点不均......阅读全文
血糖测定实验
酶法 实验方法原理 血糖中β-D葡萄糖在葡萄糖氧化酶催化下,氧化成葡萄糖酸,并产生过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶催化下,氧化氧的受体——邻联甲苯胺产生有色化合
血糖测定实验
实验方法原理 血糖中β-D葡萄糖在葡萄糖氧化酶催化下,氧化成葡萄糖酸,并产生过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶催化下,氧化氧的受体——邻联甲苯胺产生有色化合物。在有足够的葡萄糖氧化酶和过氧化物酶存在下,形成有色化合物的量和葡萄糖的量成正比,并在625 nm处有最大吸收。实验材料 葡萄糖试剂、试剂盒 邻联
溶菌酶的测定实验
实验方法原理 肽聚糖乙酰胞壁酰脱氢酶,胞壁酸酶。在肽聚糖中,水解在 N-乙酰胞壁酸和 N-乙酰基-D-葡糖胺残基的 1,4-β-键(这一过程也会弱化几丁质酶的活性)细菌滕黄微球菌(M.luteus)裂解以后,取混浊液进行酶的实验。实验材料 酶样品试剂、试剂盒 磷酸钾滕黄微球菌冷冻细胞的悬浊液仪器、耗
elisa实验测定报告
1. 所谓的单波长比色等于通常的以对显色具有吸收的波长如450nm或492nm进行比色测定;2. 而双波长双色则酶标仪在敏感波长如450nm和非敏感波长630nm下各测定一次,敏感波上下的吸光度测定值为样本测定酶反应特异显色的吸光度与板孔上指纹、刮痕、灰尘等脏物所致的吸光度之和;3. 非敏感波长下测
脲酶的测定实验
实验方法原理 实验材料 脲酶试剂、试剂盒 脲HCl仪器、耗材 pH 稳定计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」9 ml 0.2 mol/L 脲0.2 ml 脲酶自动滴定管充满 0.1 mol/L HCl,通过 pH 稳定计使得 pH 保持在 6.1,大约每 10 min 记录一次通过自动滴定管每
Rh血型测定实验
实验方法原理Rh血型鉴定系采用不完全抗体血清,属IgG型,分子量小.在生理盐水介质中不能与相应红细胞发生凝集,木瓜酸可以破坏红细胞在表面带电荷的唾液酸.从而降低红细胞表面电荷,使其得以靠拢,使其有特异性不完全抗体能与经酶处理的具备相应抗原红细胞发生凝集。试剂、试剂盒抗D不完全抗体血清木瓜酶液实验步骤
生化需氧量测定实验
生化需氧量(Biochemical oxygen demand,简称BOD)是指在有氧的条件下,水中微生物分解有机物的生物化学过程中所需溶解氧的质量浓度,以氧的mg/L 表示。水中有机物含量多,消耗的溶解氧就多,生化需氧量也就高。有机物质的生物化学氧化反应,一般分为两个阶段,第一阶段为碳氢化
糖发酵测定实验
糖发酵试验是最常用的生化反应,在肠道细菌的鉴定上尤为重要。绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源和能源,但是它们在分解糖的能力上有很大的差异,有些细菌能分解某种糖并产酸和气体;有些细菌只产酸不产气。实验方法原理酸的产生可利用指示剂来断定。在配制培养基时预先加入溴甲酚紫[pH5.2(黄色)~6.8(紫色)]
糖发酵测定实验
糖发酵试验是最常用的生化反应,在肠道细菌的鉴定上尤为重要。绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源和能源,但是它们在分解糖的能力上有很大的差异,有些细菌能分解某种糖并产酸和气体;有些细菌只产酸不产气。实验方法原理酸的产生可利用指示剂来断定。在配制培养基时预先加入溴甲酚紫[pH5.2(黄色)~6.8(紫色)]
酶活性测定实验
实验方法原理U/L=K•ΔA/min实验步骤1. 诱导试剂.2. 开机预温达37度.3. 选取测定程序.4. 测试:加入试剂准确计的30秒后测定读取吸光度.以后每隔30秒测定一次.5. 实验结果:计算ΔA/min求出测定结果.
根系体积测定实验
实验方法原理 将根系浸入水中时水面升高,测出升高部分的水的体积,即可求出根系的体积。仪器、耗材 微量滴定管酸滴定管粗玻管细玻管橡皮管定架移液管吸耳球实验步骤 1.测定根系体积装置用橡皮管连接作为体积计的粗玻管及细玻管,后者固定在夹子上与水平面成一倾斜角度。角度愈小,仪器灵敏度愈高。体积计被固定在另一
谷胱甘肽的测定实验
谷胱甘肽(glutathiose,r-glutamyl cysteingl +glycine,GSH)是一种含γ-酰胺键和巯基的三肽,由谷氨酸、半胱氨酸及甘氨酸组成。存在于几乎身体的每一个细胞。实验方法双抗夹心ELISA法 免疫组织法 实验方法原理 先将康体包被于反应板上,加入待测抗原,然后再加入酶
根系体积测定实验
实验方法原理将根系浸入水中时水面升高,测出升高部分的水的体积,即可求出根系的体积。仪器、耗材微量滴定管酸滴定管粗玻管细玻管橡皮管定架移液管吸耳球实验步骤1.测定根系体积装置用橡皮管连接作为体积计的粗玻管及细玻管,后者固定在夹子上与水平面成一倾斜角度。角度愈小,仪器灵敏度愈高。体积计被固定在另一夹子上
根系体积测定实验
实验方法原理:将根系浸入水中时水面升高,测出升高部分的水的体积,即可求出根系的体积。仪器、耗材:微量滴定管 酸滴定管
脲酶的测定实验
pH 稳定计法 光度计测定法 实验方法原理 实验材料 脲酶
谷胱甘肽的测定实验
双抗夹心ELISA法 免疫组织法 实验方法原理 先将康体包被于反应板上,加入待测抗原,然后再加入酶标康体,显色后即可测得抗原含量。
内毒素测定实验
实验方法原理 鲎是一种海洋节肢动物,其血液中的有核变形细胞含有凝固酶原和可凝固蛋白。将这些变形细胞冻融裂解后制成鲎变形细胞溶解物(limulus amebocyte lysate,LAL),此溶解物若与待检标本中的内毒素相遇,内毒素激活 LAL 的凝固酶原成为凝固酶,作用于可凝固蛋白,使其凝
熔点的测定实验
实验方法原理纯净的晶体有机物具有一定的熔点,熔程不超过0.5℃,当有杂质时熔点下降,熔程加宽。利用测定熔点可以判断出固体有机化合物的纯度,鉴别不同的有机化合物。熔点:在大气压下,化合物受热由固态转变为液态,此时固液两相蒸气压一致,固液两相平衡共存,这时的温度称为化合物的熔点。试剂、试剂盒乙酰苯胺苯甲
APOA-APOB测定实验
实验方法原理 火箭免疫电泳法是单向免疫扩散法的一种改进,通过应用直流电(稳压稳流)使抗(APOA1和B)在含有特异性抗体的琼脂糖凝胶中扩散,PH8.6时抗原向阳极移动,在泳动图中与凝胶中的抗体反应,逐渐形成类似火箭的沉淀锋,其锋高(或锋面积)与抗原浓度成正比,故可作抗原定量。实验步骤 一、 实验器材
溶菌酶的测定实验
实验方法原理肽聚糖乙酰胞壁酰脱氢酶,胞壁酸酶。在肽聚糖中,水解在 N-乙酰胞壁酸和 N-乙酰基-D-葡糖胺残基的 1,4-β-键(这一过程也会弱化几丁质酶的活性)细菌滕黄微球菌(M.luteus)裂解以后,取混浊液进行酶的实验。实验材料酶样品试剂、试剂盒磷酸钾滕黄微球菌冷冻细胞的悬浊液仪器、耗材分光
溶菌酶的测定实验
基本方案 实验方法原理 肽聚糖乙酰胞壁酰脱氢酶,胞壁酸酶。在肽聚糖中,水解在 N-乙酰胞壁酸和 N-乙酰基-D-葡糖胺残基的 1,4-β-键(这一过程也会弱化
熔点的测定实验
实验方法原理 纯净的晶体有机物具有一定的熔点,熔程不超过0.5℃,当有杂质时熔点下降,熔程加宽。利用测定熔点可以判断出固体有机化合物的纯度,鉴别不同的有机化合物。熔点:在大气压下,化合物受热由固态转变为液态,此时固液两相蒸气压一致,固液两相平衡共存,这时的温度称为化合物的熔点。试剂、试剂盒 乙酰苯胺
谷胱甘肽的测定实验
实验方法原理 先将康体包被于反应板上,加入待测抗原,然后再加入酶标康体,显色后即可测得抗原含量。实验材料 抗体试剂、试剂盒 碳酸盐缓冲液Na2CO3磷酸盐缓冲液NaClKClTMB二甲基亚砜牛血清蛋白仪器、耗材 酶标仪培养箱实验步骤 一、材料准备1. 包被液:0.05 mol/l(pH9.6)碳酸
酶活性测定实验
实验方法原理U/L=K•ΔA/min实验步骤1. 诱导试剂.2. 开机预温达37度.3. 选取测定程序.4. 测试:加入试剂准确计的30秒后测定读取吸光度.以后每隔30秒测定一次.5. 实验结果:计算ΔA/min求出测定结果.
APOA-APOB测定实验
实验方法原理火箭免疫电泳法是单向免疫扩散法的一种改进,通过应用直流电(稳压稳流)使抗(APOA1和B)在含有特异性抗体的琼脂糖凝胶中扩散,PH8.6时抗原向阳极移动,在泳动图中与凝胶中的抗体反应,逐渐形成类似火箭的沉淀锋,其锋高(或锋面积)与抗原浓度成正比,故可作抗原定量。实验步骤一、 实验器材:l
ABO血型测定实验
实验方法原理红细胞血型抗原与相应抗体特异性结合,可发生凝集反应,通过正反定型试验来确定ABO血型.实验材料受检者血清红细胞盐水悬液实验步骤一、实验试剂:1、抗A、抗B及抗A+B分型血型2、5%A、B、O对照红细胞盐水悬液3、受检者血清4、受检者5%红细胞盐水悬液二、实验操作:1、取洁净小试管3支,分
异构酶的测定实验_葡萄糖异构酶的测定实验
实验方法原理D-葡萄糖 ⇌ D-木果糖实验材料酶溶液试剂、试剂盒TES NaOHD-葡萄糖CoCl2半胱氨酸·HCl咔唑溶液硫酸仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」实验步骤与木糖异构酶基本相同,唯一不同的是在酶反应以及加完半胱氨酸后,咔唑和硫酸混合物可以放置 30 min 进行
生长分数的测定实验
实验方法原理连续48h 标记细胞,间隔地取样用于放射自显术。实验步骤操作步骤除第3步外,其余各步骤如方案 21.10,温育时间应分别为 15min、30min 和1、2、4、8、24、48h。
生长分数的测定实验
验方法原理 连续48h 标记细胞,间隔地取样用于放射自显术。实验步骤 操作步骤除第3步外,其余各步骤如方案 21.10,温育时间应分别为 15min、30min 和1、2、4、8、24、48h
胰岛素测定实验
实验材料 胰岛素标准品125 I-胰岛素试剂、试剂盒 抗血清第二抗体PBS正常兔血清仪器、耗材 计数仪试管加样器离心机实验步骤 一、材料及试剂 1. 胰岛素标准品(不同浓度的) 2、125 I-胰岛素 3、抗血清 4、第二抗体 5、分析试剂 为0.05 mol/L pH7.4 PBS液+1%正常