ELISA检测抗HCV影响因素分析
ELISA检测抗HCV已是血站、医院的常规检测项目,虽然该方法操作简单,灵敏度高,但在实际操作中,ELISA检测抗HCV结果假阴性、假阳性问题还是比较常见,该临床诊断给治疗带来很大困难。影响ELISA检测抗HCV因素众多[1]。现就比较常见的影响因素加以分析总结。 1 试剂影响因素 目前ELISA检测抗HCV试剂盒均采用HCV基因工程或合成多肽抗原核心区,NS3,NS4,NS5等包被固相,由于不同厂家HCV抗原组合不同,来源和用量方面也有差异,就造成临床上使用不同厂家的ELISA检测抗HCV试剂盒检测结果有很大差异,经常是家试剂检测阳性,另一家试剂检测阴性,尤其是较弱阳性标本,这不但是这部分HCV感染的临床诊断不明确,而且在筛检献血员时,极易发生漏检,造成输血后HCV感染。  ......阅读全文
“核酸检测”:筑起输血安全的防火墙
众所周知,输血传播疾病以病毒传染疾病为主。在我国,乙肝、丙肝和艾滋等传染病的输血传播风险一直是最为关注的焦点。我国是乙肝的高发地区, 正常人群中乙肝阳性率高达10% ,丙肝阳性率虽在3%左右但其慢性化率高达85%, 其中20%的患者易发展为肝硬化,而艾滋在我国发展速度已进入快速增长期, 艾滋
使用一抗的直接-ELISA-实验方案
实验概要本实验提供了一个使用一抗的直接 ELISA 实验方案。主要试剂1. 碳酸氢盐/碳酸盐包被缓冲液 (100 mM) 应将抗原或抗体在包被缓冲液中稀释,从而将它们固定到孔上: 3.03 g Na2CO3 6.0 g NaHCO3 1000 ml 蒸馏水 pH 9.62. PBS: 1.16 g
使用一抗的直接-ELISA-实验方案
实验概要本实验提供了一个使用一抗的直接 ELISA 实验方案。主要试剂1. 碳酸氢盐/碳酸盐包被缓冲液 (100 mM) 应将抗原或抗体在包被缓冲液中稀释,从而将它们固定到孔上: 3.03 g Na2CO3 6.0 g NaHCO3 1000 ml 蒸馏水 pH 9.62. PBS: 1.16 g
谷胱甘肽的测定实验——双抗夹心ELISA法
以及含量;(2)谷胱甘肽具有广谱解毒作用,不仅可用于药物,更可作为功能性食品的基料,在延缓衰老、增强免疫力、抗肿瘤等功能性食品广泛应用实验方法原理先将康体包被于反应板上,加入待测抗原,然后再加入酶标康体,显色后即可测得抗原含量。实验材料抗体试剂、试剂盒碳酸盐缓冲液Na2CO3磷酸盐缓冲液NaClKC
小鼠抗利尿激素(AVP)ELISA试剂盒
小鼠抗利尿激素(AVP)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗小鼠 AVP 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 AVP与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠AVP,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Strep
小鼠抗线粒体抗体(AMA)ELISA试剂盒
小鼠抗线粒体抗体(AMA)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗小鼠 AMA 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 AMA与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠AMA,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Stre
血液检验室内质控存在的若干问题及其对策
室内质量控制(IQC)是由实验室人员采用一系列方法,连续的评价本实验室工作的可靠程度,确定报告能否发出,是保证实验室工作质量的重要措施。目前血站系统检测抗HCV、抗-HIV HBsAg均采用ELISA法。ELISA有其自身的特点如灵敏度较高,同时影响因素也较多,这就更需加强质量控制。本文就实验
ELISA法检测立克次体
ELISA法检测立克次体 立克次体(Rickettsia)是一类专性活细胞内寄生的原核细胞微生物,具有细胞壁,含有RNA和DNA,以二分裂繁殖。需在细胞内繁殖,不能在无细胞的人工培养基中生长。它是属于人兽共患的自然疫源性疾病。临床上常见的有普氏立克次体、莫氏立克次体、恙虫病立克次体和Q热立克次体
丙肝病毒暴露后,何时检测丙型肝炎?
导语:一般来说,丙肝病毒(HCV)侵入人体后不会马上产生抗体,往往需要一段时间才能产生足够的可检测到的抗体。从病毒感染到能够从血中检测到抗-HCV的这段时间,称为丙肝病毒感染的“窗口期”。在这段“窗口期”时间内,尽管血清抗-HCV阴性,但实际上血液内已经存在丙肝病毒的复制,并具有传染性。
关于丙型肝炎病毒的自然史的介绍
大部分患者在感染的急性期无明显症状,伴有高水平的病毒血症和ALT升高。HCV急性感染后HCV RNA早于抗-HCV出现于血液中。HCV RNA最早可于暴露后2周检出,HCV 核心抗原可在HCV RNA出现后1~2d检出,而抗-HCV直到8~12周才能检出,也就是说,在HCV感染发生后,有约8-1
血液检验室内质控存在的若干问题及对策
室内质量控制(IQC)是实验室人员采用一系列方法,连续评价本实验室工作的可靠程度。确定报告能否发出,是保证实验室工作质量的重要措施。目前采供血机构检测抗HCV、抗HIV、HBsAg均采用ELISA法,ELISA有其自身的特点,如灵敏度较高,同时影响因素也较多,这就更需加强质量控制。本
儿童丙型肝炎病毒(HCV)感染的诊断
丙型肝炎病毒(HCV)慢性感染是一个世界范围内的严重公共问题,全球约1.8亿人感染,欧美儿童HCV感染率约为0.05%~0.36%,而发展中国家可达1.80%~5.00%,可能是因为卫生经济条件的差异所致。由于尚无HCV疫苗及妊娠期用药的限制,垂直传播仍是新生儿感染的主要原因。儿童HCV感染的诊断
丙型肝炎RNA的临床意义
抗-HCV是非中和抗体,是HCV感染的标志,抗-HCV的存在一般表示有传染性。高效价的抗-HCV阳性,常与HCV现存感染有关,如能同时查到HCV-RNA即可确诊病毒复制和有传染性。在疾病的急性期,抗体通常在丙肝起病和接触病毒后3-6个月后升高。抗体的升高可和转氨酶峰值一致或在其后。抗-HCV一般
简述-丙型肝炎RNA的临床意义
抗-HCV是非中和抗体,是HCV感染的标志,抗-HCV的存在一般表示有传染性。高效价的抗-HCV阳性,常与HCV现存感染有关,如能同时查到HCV-RNA即可确诊病毒复制和有传染性。在疾病的急性期,抗体通常在丙肝起病和接触病毒后3-6个月后升高。抗体的升高可和转氨酶峰值一致或在其后。抗-HCV一般
丙肝治愈HCV检验诊断困局的破解
杨瑞锋 北京大学人民医院,北京大学肝病研究所丙型肝炎病毒(HCV)属于黄病毒科、丙型肝炎病毒属,是单股正链RNA病毒。我国HCV感染者基数庞大,HCV抗体阳性率为0.43%,连同高危人群(如90年前后输血者、单采血浆者、静脉吸毒者、免疫系统功能受损者等),总共约1000万感染者。慢性丙型肝炎是
关于慢性丙型肝炎的检查介绍
1.抗-HCV检测 HCV感染后,机体可产生相应的抗体,最早出现的抗体是针对病毒核心壳区的C22蛋白(抗C22),随后是针对NS3区的C33蛋白(抗C33)的产生,该抗体的滴度低于C22,但高于最后出现的抗C100。 2.HCVRNA检测 在感染HCV几天内,即在ALT升高及抗-HCV出现
临床化学检查方法介绍丙型肝炎抗体检测介绍
丙型肝炎抗体检测(抗-HCV-Ig)介绍: 丙型肝炎抗体是由丙型肝炎病毒(HCV)所引起。机体感染HCV后,在血清中抗体出现较晚。丙型肝炎抗体检测(抗-HCV-Ig)正常值: 抗-HCIgM阴性,抗-HCIgG阴性。丙型肝炎抗体检测(抗-HCV-Ig)临床意义: 抗-HCV-IgA是丙型肝炎诊
新生儿丙肝抗体阳性,该如何面对?
周一上班中,刚参加完院部交班回办公室,一阵急促的电话铃声响起,“喂,你好,刘老师,请教一下,我科一新生儿检出抗HCV阳性,其母亲抗-HCV阳性,是否就是丙肝病毒感染?是否需要治疗呢?”。接到电话后我,我也不知道怎么回答。作为一个执着的院感人,不懂就问,不懂就查规范、查文献、查资料是我一贯的作风。
elisa筛选时需要到多少酶标二抗
酶标二抗常规包装为100ul(都是浓缩液).用于ELISA的时候,稀释比为一万到十万,最低的也可以达到一千.就以最低的算,100ul也可以稀释成100ml.(当然一般是用多少稀释多少,不要一次配完).这样一个孔加入100ul.可以用十块板.这都是以最低的量计算.实际上应该可以做更多的板子.如果你不是
人抗Mi2抗体ELISA试剂盒
Mi2抗体实验原理:本试剂盒采用双抗体夹心免疫法(ELISA)测定标本中人抗Mi2抗体(anti-Mi2-Ab)。用纯化的人抗Mi2抗体(anti-Mi2-Ab)抗体包被微孔板,制成固相抗体,可与样品中抗Mi2抗体(anti-Mi2-Ab)相结合,经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后再与HRP标记的抗
丙型病毒性肝炎的诊断
1、抗HCV 即丙肝抗体,目前诊断丙型病毒性肝炎的主要指标。但因感染HCV后抗HCV出现较慢,一般在发病后2~6个月,甚至1年才转阳,故不能作为早期诊断的方法。而且1次阴性,也不能直接否定诊断。当各型病毒性肝炎特异性标志检测阴性,临床症状及单项ALT升高,提示急性病毒性肝炎时,应考虑是否为丙型
临床化学检查方法介绍丙型肝炎RNA介绍
丙型肝炎RNA介绍: 丙型肝炎病毒(hepatitis virus C,HCV)是一小的有囊膜的单股正链RNA病毒,属黄病毒科丙型肝炎病毒属。HCV基因组为一长的开放读码框架(ORF),在其两侧的5′和3′均有非编码区,从5′端开始,编码区由7个基因区组成,即C、E1、E2、NS1、NS2,NS3
病原体检测丙型肝炎RNA介绍
丙型肝炎RNA介绍: 丙型肝炎病毒(hepatitis virus C,HCV)是一小的有囊膜的单股正链RNA病毒,属黄病毒科丙型肝炎病毒属。HCV基因组为一长的开放读码框架(ORF),在其两侧的5′和3′均有非编码区,从5′端开始,编码区由7个基因区组成,即C、E1、E2、NS1、NS2,NS3
抗ENA抗体的检测
1.斑点酶免疫技术(dot-ELISA)。 2.免疫印迹技术(IBT): 属于膜载体酶免疫技术,其固相载体为吸附有抗原的硝酸纤维膜。不需纯化单个抗原,并可在同一载体上作多项抗原分析。
抗磷脂抗体检测
抗磷脂抗体(antiphospholipid antibodies,APL)临床上主要与抗磷脂综合征(antiphospholipid syndrome, APS)密切相关。APS是APL引起的一组临床征象的总称,主要表现为反复动静脉血栓形成、习惯性流产、血小板减少、精神神经症状,伴有抗心磷脂抗体
抗核抗体检测
抗核抗体(ANA)是能与细胞核或者其组成成分反应的自身抗体,主要出现在红斑狼疮等一类自身免疫病,是诊断红斑狼疮的主要手段之一。过去多用测定血液中狼疮细胞(血液中多核白细胞吞噬抗核抗体和核蛋白结合后形成的复合物称为狼疮细胞)来确定病人的抗核抗体,检出率低且没有特异性,需要有经验的技术员才能辨认出
Elisa试剂盒花板问题出现如何处理?
在结果"花板"的这一问题中,对检测数据造成很大影响,往往会使检测者做出误判,是实验中必须要注意和避免的。针对这个问题,我公司技术部人员做出分析总结,上海劲马为您讲谈Elisa试剂盒"花板"问题出现该如何是好。一、标本/试剂/1.标本:出入境人员的血液标本。2.试剂:HBsAg、HCV、HIV、梅毒试
简述丙型肝炎病毒抗体的临床意义
HCV-Ab为HCV感染后产生的特异性抗体,是HCV感染的标志,为非保护性抗体。HCV-Ab一般用于流行病学筛查。临床病原学诊断须结合丙型肝炎病毒核糖核酸(HCVRNA)检测以及其他相关检测指标。 HCV-Ab和HCVRNA检测结果可出现以下四种模式: 1.HCVRNA及HCV-Ab均为阳性
ELISA检测方法有哪些?
酶联免疫吸附测定(Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay,ELISA)是研究蛋白抗体的重要方法。它是采用抗原与抗体的特异结合将被测物质与酶标抗体进行直接或间接结合,然后通过标记酶与底物产生颜色反应进行定性和定量分析。那么,它与其它检测方法的灵敏度及您了解吗?
ELISA法检测丝虫抗体
丝虫病(filariasis)在我国是由斑氏和马来丝虫寄生于人体淋巴系统所引起的慢性寄生虫病,通过蚊虫传播。早期临床特征主要为淋巴管炎和淋巴结炎,晚期为淋巴管阻塞形成象皮肿。常用的检查方法是用ELISA 法检测丝虫抗体。 [检测方法] ELISA法 [方法学原理] 将微丝蚴固定在玻片上制