外周血细胞形态学检验及诊断技巧(二)

二.血细胞染色法(一)细胞染色机理:染色是将细胞经染色剂的物理及化学作用,使其清楚显示细胞各个组成部分,有利辨识细胞形态。●染色可分二个步骤:1.染料受相应物质吸附而附着于物质表面;2.固着作用: ○即染色粒子进入细胞内起化学反应(染料透过细胞膜的学说很 多,尚无定论),与相应的物质形成溶解度很低的盐固着于细胞内而显色。 ○染色剂皆有选择作用,其染色不是将细胞全部一齐着色,而只是将其中一部分染色,多余的被冲洗掉。目前多以吸附学说(电力吸附、机械吸附、化学吸附)来解释。●一般染色方法由两种染色剂(酸性、碱性)组成,通常细胞核及浆碱性粒体为碱性,细胞浆为酸性。 ○酸性染料可和带正电荷的(碱性)物质结合,这种物质称嗜酸性物质,对酸性染料具有亲和力,因此嗜酸性粒细胞之颗粒本身为碱性物质; ○碱性染料可和带负电荷的(酸性)物质相结合,这种物质称嗜碱性物质,对碱性染色粒具有亲和力。 ○另一种蛋白质在pH6.4 呈等电状态,本身所含的正/负电......阅读全文

外周血免疫细胞检测

            实验材料 静脉全血 试剂、试剂盒 肝素 鼠抗人目的单克隆抗体 溶红细胞液 生理盐

外周血免疫细胞检测

实验材料静脉全血试剂、试剂盒肝素鼠抗人目的单克隆抗体溶红细胞液生理盐水仪器、耗材FCM 测量管实验步骤1. 取 1000 U/ml 肝素 100 ul 抗凝静脉全血,置于 FCM 测量管中。2. 直接标记法:加入带荧光标记的鼠抗人目的单克隆抗体试剂 10 ul,充分混匀,在 4℃ 冰箱中反应 30

外周血免疫细胞检测

            实验材料 静脉全血 试剂、试剂盒 肝素 鼠抗人目的单克隆抗体 溶红细胞液 生理盐

外周血B细胞的检测

外周血CD19+、CD20+细胞检测 活性B细胞检测             实验步骤

外周血B细胞的检测

外周血CD19+、CD20+细胞检测 活性B细胞检测             实验步骤

外周血T细胞的检测

用荧光标记三参数检测外周血T细胞亚群 用荧光标记双参数检测外周血T细胞亚群 用荧光标记单参数检测外周血T细胞亚群 外周血T细胞亚群的检测分析            

外周血T细胞的检测

用荧光标记三参数检测外周血T细胞亚群 用荧光标记双参数检测外周血T细胞亚群 用荧光标记单参数检测外周血T细胞亚群 外周血T细胞亚群的检测分析            

外周血单个核细胞简介

  外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)是外周血中具有单个核的细胞,包括淋巴细胞和单核细胞。注意这里是 mononuclear cell 单个核细胞,而不是 Monocyte 单核细胞。外周血单个核细胞主要的分离方法是Ficoll-hypa

外周血活性T细胞的检测

外周血活性T细胞的检测             实验步骤      

外周血单个核细胞的简介

  周血单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞。单个核细胞的体积、形态和比重与外周血其他细胞不同,红细胞和多核白细胞的比重在1.092左右,单个核细胞的比重为1.075-1.090,血小板为1.030-1.035。因此利用一种介于1.075-1.092之间而近于等渗的溶液作密度梯度离心,使一定密度的细胞按

如何分离外周血单个核细胞

外周血单个核细胞即外周血中具有单个核的细胞,包括淋巴细胞和单核细胞。体外检测淋巴细胞首先要分离外周血单个核细胞,目前主要的分离方法是Ficoll-hypaque(葡聚糖-泛影葡胺)密度梯度离心法,因为血液中各有形成分的比重存在差异最多12天,但需要刺激。 PBMC(外周血单个核细胞)是原代细胞,单纯

外周血活性T细胞的检测

实验步骤             展开

外周血干细胞移植的现状

  1979年Goldman等为一组加速期或急变期 慢性粒细胞白血病患者移植初诊时采集冻存的外周血细胞,使患者重新回到慢性期,开始了外周血造血干细胞移植(PBSCT)的临床应用。 80年代中期以后,由于细胞分离机性能提高,1990年以后G—CSF应用于PBSC动员获得成功之后,PBSCT得到迅速发展

外周血活性T细胞的检测

实验步骤展开

外周血单个核细胞的分类

  一、基本原理  外周血单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞,其比重为1.070左右,而红细胞和多核白细胞的比重超过1.080。这样利用介于两者比重之间的溶液(称为分层液)做密度梯度离心,就可得到单个核细胞。最常用的分层液为聚蔗糖和泛影酸钠混合比重为1.070±0.001的溶液,国内常用泛影葡胺代替泛

人外周血白细胞DNA制备

实验概要本实验从人外周血中制备了白细胞DNA,介绍了制备基本原理及操作步骤。实验原理从全血制备白细胞DNA,可用非离子去污剂Triton   X-100直接破裂血中红细胞和白细胞的细胞膜,释出血红蛋白及细胞核,在反应体系中含一定浓度蔗糖,维护核膜内外的渗透压,以防止核膜破裂,通过离心等手段即可获得白

外周血自然杀伤细胞(NK)细胞的检测

外周血自然杀伤细胞(NK)细胞的检测             实验步骤

外周血自然杀伤细胞(NK)细胞的检测

实验步骤             展开

外周血干细胞移植的细胞采集方法

  外周血干细胞(PBSC)的采集方法与成分血的单采术类似,即用血细胞分离机分离采集外周血的单个核细胞组分。目前最常用的细胞分离机机型是FewnalCS—3000(或CS—3000Plus)。多采用分离淋巴细胞的程序分离。一般情况下行大静脉穿刺即可,外周静脉穿刺困难(尤其是小儿)时需中心静脉穿刺。 

关于外周血干细胞移植的细胞动员介绍

  正常情况下,外周血中的干/祖细胞的含量占单个核细胞的 0.01%—0.1%相当于骨髓的1%—10%,动员后外周血MNC中CD34+细胞数及CFU—删数均明显高于骨髓。迄今已发现多聚阴离子化合物(如硫酸葡聚糖)、糖皮质激素、细菌内毒素、抗肿瘤药物、四氢叶酸以及造血生长因子等均能有效地动员骨髓和其它

关于外周血功能细胞的含义介绍

  外周血单个核细胞即外周血中具有单个核的细胞,包括淋巴细胞和单核细胞。体外检测淋巴细胞首先要分离外周血单个核细胞,主要的分离方法是Ficoll-hypaque(葡聚糖-泛影葡胺)密度梯度离心法,因为血液中各有形成分的比重存在差异,因此得以分离。红细胞和粒细胞密度大于分层液,同时因红细胞遇到Fico

外周血单个核细胞的分离实验

实验方法原理体外测定免疫细胞的数量和功能常需将某种免疫细胞首先分离出来。本实验是采用密度梯度离心法分离单个核细胞(mononuclear cell)。单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞(monocyte)。 血液中各种细胞的大小和比重不同,因此,可用不同比重(密度)的分离液使不同比重的细胞在离心沉降过

大鼠外周血淋巴细胞分离液

【检验方法】全过程样本、试剂及实验环境均需在20±2℃的条件下进行。首先取抗凝血按体积比 1:1的比例与样本稀释液(产品编号:2010C1119)混匀,根据稀释后的样本量大小,分以下两种情况:情况 A:稀释后的血液样本量小于 5ml时,实验方法如下:1.取一支15ml离心管,先加入与稀释后样本等量的